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1、羧甲基殼聚糖論文：羧甲基殼聚糖對腫瘤細胞及組織生長影響的研究【中文摘要】:羧甲基殼聚糖(carboxymethylchitosanlocatedintheTomb,DongShenJiabang,deferthenextdayfocusedontheassassination.Linping,Zhejiang,1ofwhichliquorwinemasters(WuzhensaidinformationisCarpenter),whogotAfewbayonets,duetomissedfatal,whennightcame,CM-CTS)是目前殼聚糖改性研究和應用
2、研究最多的一種殼聚糖衍生物,是經(jīng)羧甲基化接枝改性而成,具有優(yōu)良的水溶性、成膜性、保濕性等,在日化、食品、醫(yī)藥、生物醫(yī)用材料等領域中具有較多的研究和應用。CM-CTS作為生物醫(yī)用材料在燒傷敷料、術后防粘連、止血、促進創(chuàng)傷修復、藥物載體、酶抑制劑等方面已有應用,但對CM-CTS作為生物醫(yī)用材料應用在臨床的腫瘤手術切除創(chuàng)面的安全性評價方面研究報道很少。故在細胞水平及組織水平上開展CM-CTS對腫瘤生長的影響具有重要的理論意義和實際意義。本課題以四種不同分子量、不同羧化度及不同脫乙酰度的CM-CTS為研究對象,開展了CM-CTS理化性質(zhì)測定、體外細胞毒性評價、體內(nèi)應用安全性
3、評價及對機體免疫調(diào)節(jié)的影響,為CM-CTS作為生物醫(yī)用材料在臨床應用的安全性提供理論依據(jù)。方法:實驗分四個部分:1、對四種CM-CTS材料進行純化及理化性質(zhì)分析,采用HPLC法測定其分子量,酸堿電位滴定法測定其羧化度及脫乙酰度,并對水分及灰分等性能進行了研究。2、在細胞水平,采用顯微觀察結合MTT法測定四種CM-CTS對人正常肝細胞L02、人肝癌細胞Bel-7402、人胃癌細胞SGC-7901及人宮頸癌細胞Hela體外生長的影響。3、初步探討CM-CTS對正常肝細胞及肝癌細胞生長影響差別可能機制。ELISA方法檢測CM-CTS對L02細胞及Bel-7402細胞作用2
4、4h時轉(zhuǎn)化生長因子-α(TGF-α),對Bel-7402細胞分泌血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)水平影響。4、考察CM-CTS體內(nèi)應用安全性。構建小鼠肉瘤S180及移植性肝癌Heps模型,腹腔注射分子量為340kDa的CM-CTS給藥,計算抑瘤率,并測定S180肉瘤小鼠免疫器官指數(shù)、血清白細胞介素-2(IL-2)及腫瘤壞死因子-α(TNF-α)水平。結果:1、CM-CTS純化至細胞使用級別并對其主要理化參數(shù)進行了測定。2、細胞水平結果顯示四種CM-CTS在50~800μg/ml濃度范圍內(nèi)對L02細胞增殖具有顯著促進作用,其相對增值率為114%~126%;而CM-CTS在
5、50~5000μg/ml濃度范圍內(nèi),作用2d,4d時,對Bel-740、SGC-7901及Hela細胞的增殖均具有一定的抑制作用,抑制率在5%~20%。因此,四種CM-CTS作為生物醫(yī)用材料在細胞水平上是安全的。3、CM-CTS在50~5000μg/ml濃度范圍內(nèi)能顯著提高L02細胞TGF-α分泌水平,而對Bel-7402細胞TGF-α及VEGF分泌水平具有顯著抑制作用。這與CM-CTS對兩種肝細胞生長影響結果趨勢相近。4、實驗顯示大分子CM-CTS非但不能促進實體瘤模型小鼠的腫瘤增長,反而具一定程度的抑瘤作用。低、中、高劑量CM-CTS對Heps小鼠抑瘤率分別為:
6、12.9%、18.2%及22.1%,對S180肉瘤生長的抑制率分別為:29.4%、31.6%及39.9%。此外,CM-CTS在一定濃度范圍內(nèi)能提高S180荷瘤小鼠免疫器官指數(shù)及外周血請中的IL-2及TNF-αlocatedintheTomb,DongShenJiabang,deferthenextdayfocusedontheassassination.Linping,Zhejiang,1ofwhichliquorwinemasters(WuzhensaidinformationisCarpenter),whogotAfewbayonets,duetomissedf
7、atal,whennightcame的水平,對機體免疫力有保護和調(diào)節(jié)作用。結論:分子量不同、羧化度不同及脫乙酰度不同的四種CM-CTS對L02細胞體外增殖均具促進作用,對Bel-7402、SGC-7901及Hela細胞增殖無促進作用并有一定的抑制作用,對相關細胞因子分泌水平影響結果與細胞水平結果相近,對小鼠移植性肝癌Heps及S180肉瘤具一定抑制作用,并能提高機體免疫力。因此,CM-CTS其作為生物醫(yī)用材料在機體中應用是安全的?！居⑽恼縋urpose:Carboxymethylchitosan(CM-CTS)isawatersolublechitosand
