臨床微生物實(shí)驗(yàn)室血培養(yǎng)規(guī)范劉英

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1、臨床微生物實(shí)驗(yàn)室血培養(yǎng)操作規(guī)范劉英2015-6-11血液及無(wú)菌體液——最有意義的病原學(xué)檢測(cè)標(biāo)本根據(jù)培養(yǎng)結(jié)果：選擇正確的抗感染治療方案調(diào)整經(jīng)驗(yàn)治療方案判斷感染性疾病的類型評(píng)價(jià)療效及預(yù)后正確采取感染控制措施是否隔離減少院內(nèi)感染監(jiān)測(cè)敏感事件（如：生物恐怖）完整的血培養(yǎng)過(guò)程醫(yī)師開(kāi)出醫(yī)囑護(hù)理人員收集送檢樣本實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)、分離并鑒定導(dǎo)致血流感染的微生物三級(jí)報(bào)告：為臨床醫(yī)生提供抗菌藥物敏感性試驗(yàn)結(jié)果我院：10年統(tǒng)計(jì)新生兒20%13-14年6-8%國(guó)內(nèi)血培養(yǎng)現(xiàn)狀—陽(yáng)性檢出率低?10%（國(guó)外約為15％）原因何在

2、？血流中含菌量低血液中抗菌物質(zhì)抗生素的應(yīng)用培養(yǎng)條件限制血培養(yǎng)的臨床實(shí)踐欠規(guī)范??！一、采血指征可疑感染患者出現(xiàn)以下一種或幾種特征時(shí)，可以考慮采集血培養(yǎng)：a)發(fā)熱（≥38℃）或低溫（≤36℃）；b)寒戰(zhàn)；c)白細(xì)胞計(jì)數(shù)增多（計(jì)數(shù)>10.0×109/L，特別有“核左移”時(shí)）或減少（計(jì)數(shù)<3.0×109/L）；d)皮膚黏膜出血；e)昏迷；f)多器官衰竭；g)血壓降低；h)C反應(yīng)蛋白升高；i)降鈣素原（PCT）升高；j)1,3-β-D-葡聚糖（G試驗(yàn)）升高；k)突然發(fā)生的急性呼吸、體溫和生

3、命體征改變。血培養(yǎng)套數(shù)應(yīng)同時(shí)采集2～3套血培養(yǎng)，2d～5d內(nèi)無(wú)需重復(fù)采集血培養(yǎng)。只有在懷疑感染性心內(nèi)膜炎或其它血管內(nèi)感染（如導(dǎo)管相關(guān)性感染）時(shí)，才有必要間隔多次采集血培養(yǎng)。對(duì)于新生兒，采集一瓶?jī)和柩跗浚送瑫r(shí)做尿液和腦脊液培養(yǎng)。采血量成人每瓶采血量8mL～10mL，兒童1mL～5mL，但不應(yīng)超過(guò)患兒總血量的1%。血液和肉湯之比為1：5～1：10。新生兒0.5mL。采血量充足的患者宜配套采集需氧瓶和厭氧瓶，將血液先注入?yún)捬跗浚笞⑷胄柩跗俊２裳坎蛔愕幕颊邞?yīng)將足量血標(biāo)本先注入需氧瓶，再將剩余血液

4、注入?yún)捬跗俊Ｓ欣诜蛛x出真菌、銅綠假單胞菌和嗜麥芽窄食單胞菌。血培養(yǎng)瓶運(yùn)送血培養(yǎng)瓶應(yīng)盡快送至實(shí)驗(yàn)室孵育或上機(jī)，如果運(yùn)送延遲，應(yīng)在血液接種以后盡快35℃～37℃孵育，切勿冷藏或冷凍。如果病房沒(méi)有孵箱，血培養(yǎng)瓶應(yīng)置于室溫下，而非冷藏或冷凍。7血培養(yǎng)安全防護(hù)7.1實(shí)驗(yàn)室獲得感染途徑針刺傷病毒感染，包括乙肝病毒、丙肝病毒和HIV；皮膚粘膜暴露是肝炎病毒和逆轉(zhuǎn)錄病毒感染的主要途徑，而其它的主要途徑是氣溶膠或微滴。7.2防護(hù)措施7.2.1洗手洗手是預(yù)防實(shí)驗(yàn)室獲得感染的關(guān)鍵要素。在戴手套前、摘手套后、工

5、作結(jié)束后、離開(kāi)實(shí)驗(yàn)室和進(jìn)入清潔區(qū)時(shí)，都必須洗手。如直接接觸血液或任何潛在的感染性物質(zhì)后必須立即清洗暴露部位。7.2.2防護(hù)屏障1.采集血培養(yǎng)時(shí)應(yīng)戴手套，采集下一患者時(shí)須換手套。血液污染手套、有破損跡象或失去防護(hù)作用時(shí)，必須及時(shí)更換。在接收和處理標(biāo)本時(shí)，需要戴手套。2.可能發(fā)生血液或其它感染性物質(zhì)噴濺的情況下，需要面部防護(hù)。3.在沒(méi)有安全柜的情況下，血培養(yǎng)操作和檢驗(yàn)時(shí)需要穿防水、長(zhǎng)袖、前面封閉的隔離服。存在任何可見(jiàn)污染時(shí)立即脫去。污染的隔離服必須作為生物危險(xiǎn)垃圾丟棄或嚴(yán)格按流程清洗

6、。離開(kāi)實(shí)驗(yàn)室或去實(shí)驗(yàn)室內(nèi)的清潔區(qū)時(shí)要脫去隔離服。4.在處理陽(yáng)性血培養(yǎng)瓶時(shí)，必須在Ⅱ級(jí)生物安全柜中進(jìn)行。7.2.5標(biāo)準(zhǔn)防范措施所有實(shí)驗(yàn)室員工應(yīng)接受基本原理及標(biāo)準(zhǔn)防護(hù)措施的操作培訓(xùn)。相關(guān)的安全防護(hù)措施包括以下內(nèi)容：a)盡可能減少注射器及銳器的使用；b)必須使用注射器時(shí)，應(yīng)避免回套針帽；c)若用注射器采集血液，將血液直接注入血培養(yǎng)瓶，無(wú)需更換針頭。注射器使用完畢后，應(yīng)將針頭放入銳器桶，不可重復(fù)使用；d)使用后的注射器或其他銳器如需轉(zhuǎn)運(yùn)，必須裝入銳器桶內(nèi)。7.2.6實(shí)驗(yàn)室意外事故控制在污染區(qū)域采

7、取能使實(shí)驗(yàn)室人員暴露風(fēng)險(xiǎn)最小化的控制程序。禁止在污染區(qū)用嘴吹吸移液管、咬指甲、抽煙、飲食、摘戴隱形眼鏡、手或其他環(huán)境表面與眼、鼻、嘴接觸等?？赡馨l(fā)生溢灑噴濺的操作，必須在生物安全柜中進(jìn)行。離心機(jī)宜使用帶有生物安全罩的轉(zhuǎn)子或離心桶。盡可能采用螺口密封的塑料離心管，使用前仔細(xì)檢查塑料離心管有無(wú)損壞的跡象。因樣本中可能含有經(jīng)空氣傳播的病原體，轉(zhuǎn)子或離心桶及離心的樣本應(yīng)在生物安全柜中打開(kāi)。在打開(kāi)轉(zhuǎn)子或離心桶前，檢查內(nèi)部離心管有無(wú)損壞。7.3.3標(biāo)本處理所有標(biāo)本必須在生物安全I(xiàn)I級(jí)防護(hù)下處理。疑為高致病性

8、病原體如結(jié)核分枝桿菌、布魯菌屬、弗朗西斯菌屬、鼠疫耶爾森菌、類鼻疽博克霍爾德菌陽(yáng)性的血培養(yǎng)瓶進(jìn)行傳代培養(yǎng)時(shí)，處理操作需按生物安全I(xiàn)II級(jí)防護(hù)進(jìn)行。疑為腦膜炎奈瑟菌的菌株必須在生物安全柜中處理。8血培養(yǎng)結(jié)果的處理及報(bào)告程序8.1血培養(yǎng)陽(yáng)性處理及三級(jí)報(bào)告程序一級(jí)報(bào)告（初步報(bào)告）對(duì)于陽(yáng)性血培養(yǎng)，要立即進(jìn)行涂片和革蘭染色，并報(bào)告給臨床醫(yī)師，包括：患者姓名、陽(yáng)性血培養(yǎng)瓶類型、瓶數(shù)、報(bào)警時(shí)間、涂片革蘭染色特性及形態(tài)，詢問(wèn)患者目前感染情況和抗菌藥物使用情況并記錄，可以向醫(yī)師提出治療建議。此外，還應(yīng)記錄