臨床微生物實驗室血培養(yǎng)規(guī)范劉英

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1、臨床微生物實驗室 血培養(yǎng)操作規(guī)范劉英2015-6-11血液及無菌體液 ——最有意義的病原學檢測標本根據培養(yǎng)結果:選擇正確的抗感染治療方案調整經驗治療方案判斷感染性疾病的類型評價療效及預后正確采取感染控制措施是否隔離減少院內感染監(jiān)測敏感事件(如:生物恐怖)完整的血培養(yǎng)過程醫(yī)師開出醫(yī)囑護理人員收集送檢樣本實驗室檢測、分離并鑒定導致血流感染的微生物三級報告:為臨床醫(yī)生提供抗菌藥物敏感性試驗結果我院:10年統(tǒng)計新生兒20%13-14年6-8%國內血培養(yǎng)現狀—陽性檢出率低?10%(國外約為15%)原因何在

2、?血流中含菌量低血液中抗菌物質抗生素的應用培養(yǎng)條件限制血培養(yǎng)的臨床實踐欠規(guī)范??!一、采血指征可疑感染患者出現以下一種或幾種特征時,可以考慮采集血培養(yǎng): a)發(fā)熱(≥38℃)或低溫(≤36℃); b)寒戰(zhàn);c)白細胞計數增多(計數>10.0×109/L,特別有“核左移”時)或減少(計數<3.0×109/L);d)皮膚黏膜出血; e)昏迷; f)多器官衰竭; g)血壓降低;h)C反應蛋白升高; i)降鈣素原(PCT)升高; j)1,3-β-D-葡聚糖(G試驗)升高; k)突然發(fā)生的急性呼吸、體溫和生

3、命體征改變。血培養(yǎng)套數應同時采集2~3套血培養(yǎng),2d~5d內無需重復采集血培養(yǎng)。只有在懷疑感染性心內膜炎或其它血管內感染(如導管相關性感染)時,才有必要間隔多次采集血培養(yǎng)。對于新生兒,采集一瓶兒童需氧瓶,宜同時做尿液和腦脊液培養(yǎng)。采血量成人每瓶采血量8mL~10mL,兒童1mL~5mL,但不應超過患兒總血量的1%。血液和肉湯之比為1:5~1:10。新生兒0.5mL。采血量充足的患者宜配套采集需氧瓶和厭氧瓶,將血液先注入厭氧瓶,后注入需氧瓶。采血量不足的患者應將足量血標本先注入需氧瓶,再將剩余血液

4、注入厭氧瓶。有利于分離出真菌、銅綠假單胞菌和嗜麥芽窄食單胞菌。血培養(yǎng)瓶運送血培養(yǎng)瓶應盡快送至實驗室孵育或上機,如果運送延遲,應在血液接種以后盡快35℃~37℃孵育,切勿冷藏或冷凍。如果病房沒有孵箱,血培養(yǎng)瓶應置于室溫下,而非冷藏或冷凍。7血培養(yǎng)安全防護7.1實驗室獲得感染途徑針刺傷病毒感染,包括乙肝病毒、丙肝病毒和HIV;皮膚粘膜暴露是肝炎病毒和逆轉錄病毒感染的主要途徑,而其它的主要途徑是氣溶膠或微滴。7.2防護措施 7.2.1洗手 洗手是預防實驗室獲得感染的關鍵要素。在戴手套前、摘手套后、工

5、作結束后、離開實驗室和進入清潔區(qū)時,都必須洗手。如直接接觸血液或任何潛在的感染性物質后必須立即清洗暴露部位。 7.2.2防護屏障 1.采集血培養(yǎng)時應戴手套,采集下一患者時須換手套。血液污染手套、有破損跡象或失去防護作用時,必須及時更換。在接收和處理標本時,需要戴手套。 2.可能發(fā)生血液或其它感染性物質噴濺的情況下,需要面部防護。 3.在沒有安全柜的情況下,血培養(yǎng)操作和檢驗時需要穿防水、長袖、前面封閉的隔離服。存在任何可見污染時立即脫去。污染的隔離服必須作為生物危險垃圾丟棄或嚴格按流程清洗

6、。離開實驗室或去實驗室內的清潔區(qū)時要脫去隔離服。4.在處理陽性血培養(yǎng)瓶時,必須在Ⅱ級生物安全柜中進行。7.2.5標準防范措施所有實驗室員工應接受基本原理及標準防護措施的操作培訓。相關的安全防護措施包括以下內容:a)盡可能減少注射器及銳器的使用; b)必須使用注射器時,應避免回套針帽; c)若用注射器采集血液,將血液直接注入血培養(yǎng)瓶,無需更換針頭。注射器使用完畢后,應將針頭放 入銳器桶,不可重復使用; d)使用后的注射器或其他銳器如需轉運,必須裝入銳器桶內。7.2.6實驗室意外事故控制在污染區(qū)域采

7、取能使實驗室人員暴露風險最小化的控制程序。禁止在污染區(qū)用嘴吹吸移液管、咬指甲、抽煙、飲食、摘戴隱形眼鏡、手或其他環(huán)境表面與眼、鼻、嘴接觸等。可能發(fā)生溢灑噴濺的操作,必須在生物安全柜中進行。離心機宜使用帶有生物安全罩的轉子或離心桶。盡可能采用螺口密封的塑料離心管,使用前仔細檢查塑料離心管有無損壞的跡象。因樣本中可能含有經空氣傳播的病原體,轉子或離心桶及離心的樣本應在生物安全柜中打開。在打開轉子或離心桶前,檢查內部離心管有無損壞。7.3.3標本處理所有標本必須在生物安全II級防護下處理。疑為高致病性

8、病原體如結核分枝桿菌、布魯菌屬、弗朗西斯菌屬、鼠疫耶爾森菌、類鼻疽博克霍爾德菌陽性的血培養(yǎng)瓶進行傳代培養(yǎng)時,處理操作需按生物安全III級防護進行。疑為腦膜炎奈瑟菌的菌株必須在生物安全柜中處理。8血培養(yǎng)結果的處理及報告程序8.1血培養(yǎng)陽性處理及三級報告程序 一級報告(初步報告) 對于陽性血培養(yǎng),要立即進行涂片和革蘭染色,并報告給臨床醫(yī)師,包括:患者姓名、陽性血培養(yǎng)瓶類型、瓶數、報警時間、涂片革蘭染色特性及形態(tài),詢問患者目前感染情況和抗菌藥物使用情況并記錄,可以向醫(yī)師提出治療建議。此外,還應記錄

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