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1、黃芩苷對(duì)帕金森病小鼠模型的影響張強(qiáng)徐州醫(yī)學(xué)院遺傳學(xué)教研室,江蘇徐州221004:目的:研究黃芩苷對(duì)帕金森病小鼠模型的影響。方法:60只雄性C57BL小鼠隨機(jī)分為模型組、黃芩苷組、美多巴組、正常對(duì)照組。模型組小鼠腹腔注射30mg/kgMPTP;黃芩苷組分別給予100mg黃芩苷灌胃和腹腔注射30mg/kgMPTP;美多巴組給予31mg/kg美多巴灌胃,1/d,15d.正常組給予等量生理鹽水,1次/d,15d。對(duì)4組小鼠的運(yùn)動(dòng)功能、腦紋狀體DA、腦組織GSHGSH-Px、MDA含量進(jìn)行測(cè)定和統(tǒng)計(jì)分析。結(jié)果:模型組小鼠的懸掛實(shí)驗(yàn)、游泳實(shí)驗(yàn)分值均明顯比黃芩苷組、美多巴組和正
2、常對(duì)照組高(P<0.05);黃芩苷組的腦紋狀體DA水平、GSH水平均明顯比美多巴組和模型組高(P<0.05);黃芩苷組小鼠的腦紋狀體GSH-Px、MDA水平均顯著低于美多巴組和模型組(P<0.05)。結(jié)論:黃芩苷預(yù)防給藥能夠有效保護(hù)帕金森病小鼠的神經(jīng)功能,其作用機(jī)制可能與促進(jìn)腦內(nèi)抗氧化物質(zhì)GSH水平的有效提升有相關(guān)聯(lián)系。關(guān)鍵詞:黃芩苷;帕金森病小鼠模型;運(yùn)動(dòng)功能:R285.5:A:1671-5837(2015)25-0191-02帕金森病屬于一種神經(jīng)系統(tǒng)退行性疾病,老年人是多發(fā)人群,近年來(lái)其發(fā)病率呈現(xiàn)逐年上升的趨勢(shì)[1-8]。黃芩苷是黃酮類(lèi)中藥的有效成分,是由黃芩
3、中提取而來(lái),具有明顯的抗氧化性,能夠有效清除羥自由基、過(guò)氧亞硝基等[9-10]。給予黃芩苷有助于增強(qiáng)機(jī)體抗氧化性,本研究對(duì)76只雄性C57BL小鼠的相關(guān)資料進(jìn)行了統(tǒng)計(jì)分析,觀察了黃芩苷對(duì)帕金森病小鼠模型的影響。報(bào)告如下。1材料與方法1.1材料76只雄性C57BL小鼠(模型組(22只)、黃芩苷組(22只)、美多巴組(16只)、正常對(duì)照組(16只)4組。、黃芩苷、鹽酸多巴胺、谷胱苷肽過(guò)氧化酶(GSH-Px)試劑盒、谷胱苷肽(GSH)、丙二醛(MDA)1.2方法給予模型組小鼠腹腔注射MPTP,濃度為30mg/kg,1次/d,連續(xù)注射3d;給予黃芩苷組小鼠100mg/kg
4、,黃芩苷灌胃,1次/d,連續(xù)使用15d,灌胃后第8天給予小鼠腹腔注射30mgMPTP,1次/d,連續(xù)注射3d;給予美多巴組小鼠美多巴灌胃治療,濃度為31mg,1次/d,給予正常組小鼠等量生理鹽水,持續(xù)灌注7d。1.3觀察指標(biāo)懸掛實(shí)驗(yàn):將小鼠懸掛在一水平電線上,1分=小鼠兩前爪均無(wú)法將電線抓住,2分=小鼠用一前爪將電線抓住,3分=小鼠用兩前爪將電線抓住,4分=小鼠軀體上舉;游泳實(shí)將4組小鼠的懸掛實(shí)驗(yàn)和游泳實(shí)驗(yàn)得分計(jì)算出來(lái),然后將其詳細(xì)記錄[4]。運(yùn)用HPLC法對(duì)小鼠腦紋狀體多巴胺(DA)含量進(jìn)行測(cè)量。對(duì)小鼠的運(yùn)動(dòng)功能進(jìn)行有效檢測(cè)后將其處死,在冰上放置,稱(chēng)重取出來(lái)的腦
5、紋狀體,并將其和5倍量0.1mol/L高氯酸混勻,在低溫離心機(jī)中放置并進(jìn)行離心運(yùn)動(dòng),在4℃條件下,以10000r/min離心20min,分析上清液色譜。色譜柱LunaC-18(250mm×4.6mm,5μm),流動(dòng)相甲醇為0.05mol/L,磷酸氫二鈉為0.02mol/L,檸檬酸為5%∶72%∶23%,流速為1.0mL/min,檢測(cè)波長(zhǎng)為280nm,柱溫25℃[5]。將小鼠腦組織紋狀體取出后嚴(yán)格依據(jù)試劑盒說(shuō)明書(shū)中的方法測(cè)定其余腦組織的MDA、GSH、GSH-Px含量[6]。1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)處理對(duì)本研究中所有數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理的過(guò)程中運(yùn)用統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件SPSS20.0,用均
6、數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(x±s),t檢驗(yàn)組間比較表示計(jì)量資料,用P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。2結(jié)果2.14組小鼠的運(yùn)動(dòng)功能測(cè)定結(jié)果比較鼠的懸掛試驗(yàn)分值均明顯比黃芩苷、美多巴組和正常對(duì)照組高(P<0.05),懸掛實(shí)驗(yàn)分值越高,小鼠抓住電線越牢固;說(shuō)明小鼠肢體運(yùn)動(dòng)協(xié)調(diào)情況越好,反之,則說(shuō)明小鼠震顫、肌強(qiáng)直等情況嚴(yán)重;模型組小鼠的游泳實(shí)驗(yàn)分值明顯比美多巴組、正常對(duì)照組以及黃芩苷組低(P<0.05),游泳分值越高小鼠游泳的時(shí)間越多;說(shuō)明小鼠肢體運(yùn)動(dòng)協(xié)調(diào)情況越好,反之,則說(shuō)明小鼠震顫、肌強(qiáng)直等情況嚴(yán)重,見(jiàn)表1。2.24組小鼠的腦紋狀體DA、腦組織MDA、GSH、GSH-Px含量測(cè)定
7、結(jié)果比較黃芩苷組的腦紋狀體DA水平、GSH水平均明顯比美多巴組和模型組高(P<0.05);黃芩苷組小鼠的腦紋狀體GSH-Px、MDA水平均顯著低于美多巴組和模型組(P<0.05),見(jiàn)表2。