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《5-氮雜-527-脫氧胞苷的合成工藝優(yōu)化及其對skov3作用的研究》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫。
1、安徽醫(yī)科大學(xué)碩士論文rpmrevolutionsperminute每分鐘轉(zhuǎn)數(shù)RSDrelativestandarddeviation相對標(biāo)準(zhǔn)差SAMS-adenosylmethionineS-腺苷甲硫氨酸TLCthin-layerchromatography薄層色譜法TMSOTfTrimethylsilyTrifluoromethanesulfonate三氟甲磺酸三甲基硅酯UVultravioletspectrophotometry紫外分光光度法μgmicrogram微克μlmicroliter微升μmmicrometer微米-2-
2、安徽醫(yī)科大學(xué)碩士論文5-氮雜-5'-脫氧胞苷的合成工藝優(yōu)化及其對SKOV3作用的研究研究生李飛龍導(dǎo)師李俊教授湯文建副教授安徽醫(yī)科大學(xué)藥學(xué)院中文摘要多數(shù)腫瘤細(xì)胞的DNA甲基轉(zhuǎn)移酶（DNAmethyltransferase,DNMT）水平表達(dá)明顯高于正常細(xì)胞，并與抑癌基因啟動(dòng)子高甲基化狀態(tài)相關(guān)，DNMT抑制劑類藥物是一類通過抑制DNMT的活性、逆轉(zhuǎn)基因的異常甲基化狀態(tài)，從而達(dá)到抗癌效果的藥物。胞苷類似物作為DNA甲基化酶抑制劑，能夠逆轉(zhuǎn)基因的甲基化狀態(tài)，從而恢復(fù)基因的表達(dá)水平，糾正腫瘤細(xì)胞的異常生物學(xué)特征，在腫瘤研究中受到極大的關(guān)注。本
3、課題前期以雙氰胺為原料合成、分離得到5-氮雜-5'-脫氧胞（5-Aza-5'-deoxycytidine,5A5DC），實(shí)驗(yàn)證實(shí)了β-異構(gòu)體有著較強(qiáng)的生物活性。但在合成方面，存在催化劑價(jià)格過高、反應(yīng)時(shí)間長、純化方法復(fù)雜等缺點(diǎn)。因此本文旨在優(yōu)化其合成工藝、降低成本、提高產(chǎn)率，并探討5A5DC對SKOV3的增殖及細(xì)胞周期的影響。具體研究工作分為以下兩個(gè)部分：1.5-氮雜-5'-脫氧胞苷（5A5DC）的合成及工藝優(yōu)化通過分析各種核苷類化合物的合成方法，確定了本文的合成路線:5-氮雜胞嘧啶經(jīng)硅烷化保護(hù)，在路易斯酸作用下與1,2,3-三乙酰基
4、-5-脫氧-D-核糖進(jìn)行偶聯(lián)得-3-安徽醫(yī)科大學(xué)碩士論文2',3'-二乙酰氧基-5'-脫氧-5-氮雜胞苷，最后經(jīng)堿性脫保護(hù)、乙酸乙酯重結(jié)晶得5A5DC。通過正交設(shè)計(jì)，比較在Hilbert-Johnson偶聯(lián)反應(yīng)中不同Lewis酸、溶劑和反應(yīng)時(shí)間對合成5A5DC的影響。以無水SnCl4為Lewis酸，1,2-二氯乙烷為催化劑、反應(yīng)時(shí)間為8h時(shí)，5A5DC的收率最高。以雙氰胺計(jì)，總收率為31%。1.5A5DC對卵巢癌細(xì)胞株SKOV3的影響2.1.5A5DC對SKOV3細(xì)胞生長曲線的影響SKOV3對數(shù)期生長期細(xì)胞，加入不同濃度的5A5DC
5、，臺(tái)盼藍(lán)染色后光鏡下進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)，連續(xù)計(jì)數(shù)7d，繪制生長曲線。5A5DC對SKOV3細(xì)胞增殖具有不同程度的抑制作用,呈現(xiàn)劑量依賴關(guān)系。劑量愈大，生長曲線愈低平。其中劑量大于100μmol/L抑制作用較為明顯。2.2.MTT法檢測5A5DC對SKOV3細(xì)胞增殖的影響SKOV3對數(shù)期生長期細(xì)胞，加入不同濃度的5A5DC，MTT法檢測5A5DC對SKOV3細(xì)胞增殖抑制的影響。5A5DC作用細(xì)胞72h后，對SKOV3具有不同程度的抑制作用，呈現(xiàn)劑量依賴關(guān)系，其中以200μmol/L抑制效應(yīng)最為強(qiáng)。2.3.流式細(xì)胞術(shù)檢測對SKOV3細(xì)胞周期的
6、影響流式細(xì)胞儀檢測5A5DC作用SKOV3細(xì)胞72h后，SKOV3細(xì)胞周期變化情況，當(dāng)5A5DC的濃度達(dá)到100μmol/L以上，細(xì)胞周期的G0/G1期明顯受到阻滯。關(guān)鍵詞：5-氮雜-5'-脫氧胞苷；Hilbert-Johnson偶聯(lián)反應(yīng)；Lewis酸；SKOV3。-4-安徽醫(yī)科大學(xué)碩士論文StudyonsynthesisandactivityofSKOV3of5-Aza-5'-deoxycytidinePh.MCandidate:LiFeilongSupervisor:Prof.LiJunSchoolofPharmacy,Anhu
7、iMedicalUniversioty,Hefei,PR.ChinaAbstractTheexpressionlevelofDNAmethyltransferase(DNAmethyltransferase,DNMT)ofmosttumorcellswashigherthannormalcells,andrelevantwiththehypermethylationstatusoftumorsuppressorgenepromoter,DNMTinhibitorsareaclassofdrugsbyinhibitingtheacti
8、vityofDNMTtoreversetheabnormalgenemethylationstatus,toachievetheanti-cancereffect.CytidineanalogsasDNAmethyltransfera
