hbv基因分型與病毒載量及血清標志物關系的探討

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1、HBV基因分型與病毒載量及血清標志物關系的探討作者：曹軍皓，趙冰紅，葉彬，黃前川【摘要】　　目的探討HBV基因型與HBVDNA水平及血清標志物的相關性。方法選擇125例乙肝患者血清HBVDNA復制陽性的標本分別檢測HBV病毒基因分型、HBVDNA、乙肝血清標志物、谷丙轉氨酶(ALT)和總膽紅素(TBL)。結果125例HBVDNA復制陽性標本中HBV基因分型以B型為主占71.2%（89/125），C型占24.0%（30/125），BC混合型占2.4%（3/125），非B非C型占2.4%（3/125）；B基因型患

2、者血清ALT（297.3±193.6）U/L和TBL（105.1±59.7）mol/L水平高于C基因型患者ALT（158.1±107.5）U/L和TBL（53.1±22.7）mol/L，P<0.01；B基因型患者血清抗HBe陽性率91.0%(81/89)顯著高于C基因型的23.3%(7/30)，P<0.01；B型HBVDNA水平(5.87±1.72)log10copies/mL與C型(6.01±1.91)log10copies/mL無差異（P>0.05）。結論本地區(qū)HBV病毒基因型以B型為主，C

3、型次之，B基因型對肝臟損害較C基因型重，并與HBV載量及HBeAg系統(tǒng)具有相關性，B基因型易發(fā)生YMDD突變?！娟P鍵詞】基因分型；HBVDNA；HBeAg/HBeAb；血清標志物Abstract:ObjectiveTostudytherelationshipsamongHBVgenotype,levelofserumHBVDNAandHBVmarkersinpatientssamples125HBVDNApositivepatientsandHBVgenotyping,HBVDNA，ALT,TBLandHBV

4、serummarkersixedgenotype(B+C)，and2.4%（3/125）inantHBVgenotypeinthelocalareaisgenotypeB.paredpairliverandisliabletoinduceYMDDmutant,in，離心10min，及時分離血清凍存于－40℃冰箱中待檢測?！　?.2方法　　1.2.1HBV血清學分型　　采用熒光PCR法，試劑盒由上海復星公司提供，按說明書處理標本及配制反應體系后分別加入B型、C型熒光探針，PCR擴增程序為：50℃，2min→94℃，5m

5、in→（93℃，15s→60℃，45s）循環(huán)40次，以Ct值判斷乙型肝炎病毒的基因型（表1）。表1乙型肝炎病毒的基因型結果判斷標準（略）　　1.2.2HBVM血清標志物的檢測　　采用ELISA法檢測，試劑購自上?？迫A生物技術有限公司，按說明書操作?！　?.2.3ALT、TBL的檢測　　使用美國生產BeckmanCoulterUnicelD×C8000全自動分析儀測定，試劑由上海復星長征醫(yī)學科學有限公司提供。　　1.2.4HBV血清YMDD突變檢測　　采用熒光PCR法，試劑盒由上海復星公司提供，按說明書處理標本及配制

6、反應體系后分別加入C、V、I熒光探針，各代表著YMDD野生株、YVDD突變、YIDD突變，PCR擴增程序為：50℃，2min→94℃，5min→（94℃，20s→53℃，30s）循環(huán)40次，以Ct值判斷YMDD的突變類型（表2）。表2YMDD突變結果判斷標準（略）　　1.2.5統(tǒng)計方法　　組間比較采用方差分析或t檢驗，P<0.05具有統(tǒng)計學意義?！　?結果　　2.1HBV基因分型結果125例標本中HBV基因分型以B型為主，占71.2%（89/125），C型占24.0%（30/125），BC混合型占2.4%（3/

7、125），非B非C型占2.4%（3/125），因BC混合型和非B非C型各僅3例，只將B型和C型病例進行比較研究?！　?.2HBV基因型臨床資料比較B基因型血清ALT、TBL水平，HBeAg和HBeAb陽性率與C基因型存在顯著差異（P<0.01），HBVDNA水平差異不顯著（P>0.05），見表3。表3HBV基因型臨床資料（略）　　2.3B基因型HBVDNA水平與HBeAg系統(tǒng)、TBL、ALT的相關性66例高復制組（5.0～8.0log10copies/mL）與23例低復制組（3.0～5.0log10c

8、opies/mL）HBeAg系統(tǒng)、TBL、ALT存在顯著差異（P<0.01），見表4。表4B基因型HBVDNA水平與HBeAg系統(tǒng)、TBL、ALT的相關性（略）　　2.4B基因型HBVDNA水平與YMDD突變66例B基因型高復制組中YMDD突變率為90.5%，23例低復制組中YMDD突變率為13.0%，差異有統(tǒng)計學意義（P<0.