低密度脂蛋白膽固醇測(cè)定方法研究進(jìn)展_1

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1、從本學(xué)科出發(fā)，應(yīng)著重選對(duì)國(guó)民經(jīng)濟(jì)具有一定實(shí)用價(jià)值和理論意義的課題。課題具有先進(jìn)性，便于研究生提出新見(jiàn)解，特別是博士生必須有創(chuàng)新性的成果低密度脂蛋白膽固醇測(cè)定方法研究進(jìn)展　摘要血清或血漿中低密度脂蛋白膽固醇與冠心病發(fā)生和動(dòng)脈粥樣硬化損傷呈正相關(guān)，而且是美國(guó)國(guó)家膽固醇教育計(jì)劃作為脂類(lèi)疾病分類(lèi)和風(fēng)險(xiǎn)預(yù)測(cè)的一個(gè)重要指標(biāo)。LDL-C也是選擇藥物治療和預(yù)后方面的一個(gè)十分有意義的臨床指標(biāo)，國(guó)內(nèi)外都在研究和開(kāi)發(fā)行之有效、可靠的標(biāo)準(zhǔn)化測(cè)定方法。本文對(duì)其有關(guān)的測(cè)定方法和研究進(jìn)展作綜述。　　關(guān)鍵詞：低密度脂蛋白膽固醇；方法學(xué)；心血管疾病　　臨床和流行病學(xué)研究證明血清中LDL-C

2、與冠狀動(dòng)脈粥樣硬化有密切的正相關(guān)[1]。在1986年病理學(xué)家們就研究證明LDL-C濃度越高時(shí)動(dòng)脈粥樣硬化損傷的程度越大，粥樣硬化程度小時(shí)，測(cè)到血清中LDL-C也低[2,3]。課題份量和難易程度要恰當(dāng)，博士生能在二年內(nèi)作出結(jié)果，碩士生能在一年內(nèi)作出結(jié)果，特別是對(duì)實(shí)驗(yàn)條件等要有恰當(dāng)?shù)墓烙?jì)。從本學(xué)科出發(fā)，應(yīng)著重選對(duì)國(guó)民經(jīng)濟(jì)具有一定實(shí)用價(jià)值和理論意義的課題。課題具有先進(jìn)性，便于研究生提出新見(jiàn)解，特別是博士生必須有創(chuàng)新性的成果　　lDL是一組不均一的脂蛋白顆粒，一般認(rèn)為L(zhǎng)DL的漂浮密度為～，且包括了中間密度脂蛋白～及Lp(a)～。LDL中蛋白含量約為20％～25％，

3、主要是載脂蛋白B-100，而載脂蛋白E和載脂蛋白CⅡ含量很少。膽固醇的含量約是血清中總量的三分之二。LDL是通過(guò)受體途徑進(jìn)行降解，如過(guò)量時(shí)可以導(dǎo)致巨噬細(xì)胞和其他吞噬細(xì)胞變成泡沫細(xì)胞，這被認(rèn)為是與動(dòng)脈粥樣硬化有關(guān)的因素。因此，LDL-C的測(cè)定結(jié)果直接影響到分類(lèi)和治療。美國(guó)的NCEP專(zhuān)家組以LDL-C濃度將成人、小孩、青少年各分為：成人在/L(1300mg/L)以下為合適水平，在～/L(1300～1590mg/L)間作為中危水平，高于/L(1600mg/L)時(shí)作為高危水平；小孩和青少年在/L(1100mg/L)以下為合適水平，在～/L(1100～1290mg/

4、L)為中危水平，高于/L(1300mg/L)為高危水平[4]。為提高LDL-C測(cè)檢水平，國(guó)內(nèi)外對(duì)LDL-C測(cè)定方法進(jìn)行廣泛的研究并不斷改善，現(xiàn)將有關(guān)方法研究進(jìn)展綜述如下：　　1等密度和密度梯度超速離心法　　血清中的各種脂蛋白的分離是LDL-C測(cè)定的一個(gè)重要環(huán)節(jié)。由于各種脂蛋白的大小、密度和組成及功能都有很大的不同。超速離心技術(shù)就是利用脂蛋白各種成分的密度不同將它們分離，是脂蛋白分離的主要方法。課題份量和難易程度要恰當(dāng)，博士生能在二年內(nèi)作出結(jié)果，碩士生能在一年內(nèi)作出結(jié)果，特別是對(duì)實(shí)驗(yàn)條件等要有恰當(dāng)?shù)墓烙?jì)。從本學(xué)科出發(fā)，應(yīng)著重選對(duì)國(guó)民經(jīng)濟(jì)具有一定實(shí)用價(jià)值和理論

5、意義的課題。課題具有先進(jìn)性，便于研究生提出新見(jiàn)解，特別是博士生必須有創(chuàng)新性的成果　　1950年Delalla和Gofman首次報(bào)道等密度超速離心法。在實(shí)驗(yàn)室中一般采用βQuantification法，它利用的臨界分離液，在離心力為10900g時(shí)離心18h，將血漿分成上下兩部分，上清液為VLDL和乳糜顆粒，下面為IDL、LDL和HDL。用試管切開(kāi)技術(shù)將上下液體分開(kāi)。下面部分再采用化學(xué)沉淀法將HDL和LDL及IDL分開(kāi)，分別用酶法測(cè)定膽固醇。這方法已被臨床實(shí)驗(yàn)室作為參考方法。而且還可以根據(jù)需要改變分離液密度，當(dāng)密度提高為，可以將IDL與LDL和HDL分開(kāi)，也可

6、提高到，分離出HDL等。但在選擇脂蛋白分離切點(diǎn)系指它們與緩沖液混和物的密度，而不是脂蛋白自身的密度?！　×硗庥袌?bào)道用密度梯度超速離心法[5]。這種方法是將血清加入到已有不同密度梯度的分離液中，進(jìn)行超速離心后，血清中脂蛋白的各種成份可以轉(zhuǎn)移到各自相等密度的相等的區(qū)域。這種方法可以一次將脂蛋白中的各種成份分離。而不足之處是要求離心時(shí)間很?chē)?yán)格，分開(kāi)各種組份較困難。根據(jù)離心轉(zhuǎn)子的不同，可以分為水平轉(zhuǎn)子，垂直轉(zhuǎn)子以及固定角度轉(zhuǎn)子。水平轉(zhuǎn)子在實(shí)驗(yàn)中已被證明分離效果最好，但要求離心時(shí)間長(zhǎng)；垂直轉(zhuǎn)子可以縮短時(shí)間，由于轉(zhuǎn)動(dòng)距離小，會(huì)有微量丟失；在等密度超速離心中首選固定角度

7、轉(zhuǎn)子，如在密度梯度超速離心中使用時(shí)，離心時(shí)間要比垂直轉(zhuǎn)子稍長(zhǎng)?！　∵@兩種方法對(duì)實(shí)驗(yàn)室要求條件高，一般實(shí)驗(yàn)室都難以應(yīng)用。雖然現(xiàn)在有很多改良方法，克服了傳統(tǒng)方法的部分缺點(diǎn)，但分離的效果仍不能同傳統(tǒng)方法比。所有的超速離心法都有它們的局限性，它們所測(cè)得的結(jié)果仍是NCEP作為分類(lèi)和治療的指標(biāo)。課題份量和難易程度要恰當(dāng)，博士生能在二年內(nèi)作出結(jié)果，碩士生能在一年內(nèi)作出結(jié)果，特別是對(duì)實(shí)驗(yàn)條件等要有恰當(dāng)?shù)墓烙?jì)。從本學(xué)科出發(fā)，應(yīng)著重選對(duì)國(guó)民經(jīng)濟(jì)具有一定實(shí)用價(jià)值和理論意義的課題。課題具有先進(jìn)性，便于研究生提出新見(jiàn)解，特別是博士生必須有創(chuàng)新性的成果　　2譜法　　根據(jù)脂蛋白分子的大

8、小和親和性有很大的不同，利用層析技術(shù)對(duì)脂蛋白進(jìn)行分離。目前有多種色