低密度脂蛋白膽固醇測定方法研究進(jìn)展_1

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1、從本學(xué)科出發(fā)，應(yīng)著重選對國民經(jīng)濟具有一定實用價值和理論意義的課題。課題具有先進(jìn)性，便于研究生提出新見解，特別是博士生必須有創(chuàng)新性的成果低密度脂蛋白膽固醇測定方法研究進(jìn)展　摘要血清或血漿中低密度脂蛋白膽固醇與冠心病發(fā)生和動脈粥樣硬化損傷呈正相關(guān)，而且是美國國家膽固醇教育計劃作為脂類疾病分類和風(fēng)險預(yù)測的一個重要指標(biāo)。LDL-C也是選擇藥物治療和預(yù)后方面的一個十分有意義的臨床指標(biāo)，國內(nèi)外都在研究和開發(fā)行之有效、可靠的標(biāo)準(zhǔn)化測定方法。本文對其有關(guān)的測定方法和研究進(jìn)展作綜述?！　￡P(guān)鍵詞：低密度脂蛋白膽固醇；方法學(xué)；心血管疾病　　臨床和流行病學(xué)研究證明血清中LDL-C

2、與冠狀動脈粥樣硬化有密切的正相關(guān)[1]。在1986年病理學(xué)家們就研究證明LDL-C濃度越高時動脈粥樣硬化損傷的程度越大，粥樣硬化程度小時，測到血清中LDL-C也低[2,3]。課題份量和難易程度要恰當(dāng)，博士生能在二年內(nèi)作出結(jié)果，碩士生能在一年內(nèi)作出結(jié)果，特別是對實驗條件等要有恰當(dāng)?shù)墓烙?。從本學(xué)科出發(fā)，應(yīng)著重選對國民經(jīng)濟具有一定實用價值和理論意義的課題。課題具有先進(jìn)性，便于研究生提出新見解，特別是博士生必須有創(chuàng)新性的成果　　lDL是一組不均一的脂蛋白顆粒，一般認(rèn)為LDL的漂浮密度為～，且包括了中間密度脂蛋白～及Lp(a)～。LDL中蛋白含量約為20％～25％，

3、主要是載脂蛋白B-100，而載脂蛋白E和載脂蛋白CⅡ含量很少。膽固醇的含量約是血清中總量的三分之二。LDL是通過受體途徑進(jìn)行降解，如過量時可以導(dǎo)致巨噬細(xì)胞和其他吞噬細(xì)胞變成泡沫細(xì)胞，這被認(rèn)為是與動脈粥樣硬化有關(guān)的因素。因此，LDL-C的測定結(jié)果直接影響到分類和治療。美國的NCEP專家組以LDL-C濃度將成人、小孩、青少年各分為：成人在/L(1300mg/L)以下為合適水平，在～/L(1300～1590mg/L)間作為中危水平，高于/L(1600mg/L)時作為高危水平；小孩和青少年在/L(1100mg/L)以下為合適水平，在～/L(1100～1290mg/

4、L)為中危水平，高于/L(1300mg/L)為高危水平[4]。為提高LDL-C測檢水平，國內(nèi)外對LDL-C測定方法進(jìn)行廣泛的研究并不斷改善，現(xiàn)將有關(guān)方法研究進(jìn)展綜述如下：　　1等密度和密度梯度超速離心法　　血清中的各種脂蛋白的分離是LDL-C測定的一個重要環(huán)節(jié)。由于各種脂蛋白的大小、密度和組成及功能都有很大的不同。超速離心技術(shù)就是利用脂蛋白各種成分的密度不同將它們分離，是脂蛋白分離的主要方法。課題份量和難易程度要恰當(dāng)，博士生能在二年內(nèi)作出結(jié)果，碩士生能在一年內(nèi)作出結(jié)果，特別是對實驗條件等要有恰當(dāng)?shù)墓烙嫛谋緦W(xué)科出發(fā)，應(yīng)著重選對國民經(jīng)濟具有一定實用價值和理論

5、意義的課題。課題具有先進(jìn)性，便于研究生提出新見解，特別是博士生必須有創(chuàng)新性的成果　　1950年Delalla和Gofman首次報道等密度超速離心法。在實驗室中一般采用βQuantification法，它利用的臨界分離液，在離心力為10900g時離心18h，將血漿分成上下兩部分，上清液為VLDL和乳糜顆粒，下面為IDL、LDL和HDL。用試管切開技術(shù)將上下液體分開。下面部分再采用化學(xué)沉淀法將HDL和LDL及IDL分開，分別用酶法測定膽固醇。這方法已被臨床實驗室作為參考方法。而且還可以根據(jù)需要改變分離液密度，當(dāng)密度提高為，可以將IDL與LDL和HDL分開，也可

6、提高到，分離出HDL等。但在選擇脂蛋白分離切點系指它們與緩沖液混和物的密度，而不是脂蛋白自身的密度?！　×硗庥袌蟮烙妹芏忍荻瘸匐x心法[5]。這種方法是將血清加入到已有不同密度梯度的分離液中，進(jìn)行超速離心后，血清中脂蛋白的各種成份可以轉(zhuǎn)移到各自相等密度的相等的區(qū)域。這種方法可以一次將脂蛋白中的各種成份分離。而不足之處是要求離心時間很嚴(yán)格，分開各種組份較困難。根據(jù)離心轉(zhuǎn)子的不同，可以分為水平轉(zhuǎn)子，垂直轉(zhuǎn)子以及固定角度轉(zhuǎn)子。水平轉(zhuǎn)子在實驗中已被證明分離效果最好，但要求離心時間長；垂直轉(zhuǎn)子可以縮短時間，由于轉(zhuǎn)動距離小，會有微量丟失；在等密度超速離心中首選固定角度

7、轉(zhuǎn)子，如在密度梯度超速離心中使用時，離心時間要比垂直轉(zhuǎn)子稍長?！　∵@兩種方法對實驗室要求條件高，一般實驗室都難以應(yīng)用。雖然現(xiàn)在有很多改良方法，克服了傳統(tǒng)方法的部分缺點，但分離的效果仍不能同傳統(tǒng)方法比。所有的超速離心法都有它們的局限性，它們所測得的結(jié)果仍是NCEP作為分類和治療的指標(biāo)。課題份量和難易程度要恰當(dāng)，博士生能在二年內(nèi)作出結(jié)果，碩士生能在一年內(nèi)作出結(jié)果，特別是對實驗條件等要有恰當(dāng)?shù)墓烙?。從本學(xué)科出發(fā)，應(yīng)著重選對國民經(jīng)濟具有一定實用價值和理論意義的課題。課題具有先進(jìn)性，便于研究生提出新見解，特別是博士生必須有創(chuàng)新性的成果　　2譜法　　根據(jù)脂蛋白分子的大

8、小和親和性有很大的不同，利用層析技術(shù)對脂蛋白進(jìn)行分離。目前有多種色