桃兒七內(nèi)生真菌的分離及其活性產(chǎn)物的初步研究

桃兒七內(nèi)生真菌的分離及其活性產(chǎn)物的初步研究

ID:30658855

大小:18.13 KB

頁數(shù):5頁

時間:2019-01-02

桃兒七內(nèi)生真菌的分離及其活性產(chǎn)物的初步研究_第1頁
桃兒七內(nèi)生真菌的分離及其活性產(chǎn)物的初步研究_第2頁
桃兒七內(nèi)生真菌的分離及其活性產(chǎn)物的初步研究_第3頁
桃兒七內(nèi)生真菌的分離及其活性產(chǎn)物的初步研究_第4頁
桃兒七內(nèi)生真菌的分離及其活性產(chǎn)物的初步研究_第5頁
資源描述:

《桃兒七內(nèi)生真菌的分離及其活性產(chǎn)物的初步研究》由會員上傳分享,免費在線閱讀,更多相關(guān)內(nèi)容在應(yīng)用文檔-天天文庫。

1、從本學(xué)科出發(fā),應(yīng)著重選對國民經(jīng)濟(jì)具有一定實用價值和理論意義的課題。課題具有先進(jìn)性,便于研究生提出新見解,特別是博士生必須有創(chuàng)新性的成果桃兒七內(nèi)生真菌的分離及其活性產(chǎn)物的初步研究[摘要]目的從藥用植物桃兒七中分離的內(nèi)生真菌中篩選出能產(chǎn)生木脂素類化合物的菌株。方法用常規(guī)微生物學(xué)方法從桃兒七植株中分離出其內(nèi)生真菌,分別對各菌株的提取物進(jìn)行薄層層析,通過在紫外檢測儀下觀察和用濃硫酸-乙醇顯色定性。結(jié)果從桃兒七根、莖中共分離出21株內(nèi)生真菌,其中編號為T8的菌株的菌絲體和發(fā)酵液提取物經(jīng)TLC分析,都出現(xiàn)了與標(biāo)準(zhǔn)品顏色和Rf值相同的斑點。結(jié)論該菌株應(yīng)該

2、具有產(chǎn)生鬼臼毒素或其類似木脂素類化合物的能力?! 。坳P(guān)鍵詞]桃兒七;內(nèi)生真菌;鬼臼毒素;木脂素;藥用植物  藥用植物桃兒七是我國一級保護(hù)植物[1],其主要藥用成分是以鬼臼毒素為代表的木脂素類化合物,具有顯著的抗腫瘤活性以及治療尖銳濕疣和抑菌等作用[2~4]。近年來對鬼臼毒素類藥品的市場需求量劇增。但由于桃兒七種群分布區(qū)域有限,生長較為緩慢,且植物體內(nèi)有效成分含量較低,加之人類的大量采挖,野生資源已經(jīng)處于瀕危狀態(tài)。因此,僅靠從天然植物中提取有效成分已很難滿足市場需求。課題份量和難易程度要恰當(dāng),博士生能在二年內(nèi)作出結(jié)果,碩士生能在一年內(nèi)作出結(jié)果

3、,特別是對實驗條件等要有恰當(dāng)?shù)墓烙?。從本學(xué)科出發(fā),應(yīng)著重選對國民經(jīng)濟(jì)具有一定實用價值和理論意義的課題。課題具有先進(jìn)性,便于研究生提出新見解,特別是博士生必須有創(chuàng)新性的成果  由于內(nèi)生真菌在植物體內(nèi)普遍存在,而且某些內(nèi)生真菌能產(chǎn)生和其宿主植物相同或相似的活性物質(zhì)[5,6],因此,如果能從桃兒七植株中分離并篩選出可以產(chǎn)生鬼臼類木脂素的內(nèi)生真菌,就有可能利用工業(yè)化發(fā)酵方法生產(chǎn)。這樣不僅可以開發(fā)該類植物藥生產(chǎn)的新途徑,改善市場供應(yīng),也對保護(hù)這種珍貴的植物資源和生態(tài)環(huán)境具有重要意義。1材料與方法實驗材料桃兒七植株采自陜西省太白山自然保護(hù)區(qū)。標(biāo)準(zhǔn)品鬼臼

4、毒素購自西安潤德公司。培養(yǎng)基馬丁培養(yǎng)基、馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基和馬鈴薯葡萄糖液體培養(yǎng)基均按的配方配制[7]。內(nèi)生真菌的分離和純化將植物樣品按常規(guī)方法消毒后,在無菌條件下分別將其根、莖切成約長的小段,接種于馬丁平板上,置2℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。材料邊緣長出菌絲后,按常規(guī)微生物學(xué)方法分離,純化后編號并轉(zhuǎn)接到PDA斜面上保存。搖瓶培養(yǎng)刮取PDA平板上生長的各菌株的菌絲體制成懸液,等量接種于裝有50ml馬鈴薯葡萄糖液體培養(yǎng)基的三角瓶內(nèi),置每分鐘振蕩110次左右的往復(fù)式搖床上培養(yǎng),溫度2℃。課題份量和難易程度要恰當(dāng),博士生能在二年內(nèi)作出結(jié)果,碩士生能在

5、一年內(nèi)作出結(jié)果,特別是對實驗條件等要有恰當(dāng)?shù)墓烙?。從本學(xué)科出發(fā),應(yīng)著重選對國民經(jīng)濟(jì)具有一定實用價值和理論意義的課題。課題具有先進(jìn)性,便于研究生提出新見解,特別是博士生必須有創(chuàng)新性的成果  從接種后的第2天開始,每天取3瓶培養(yǎng)物,用已預(yù)先稱重的濾紙抽濾,濾液備用;濾出的菌絲體在60℃烘箱中烘至恒重,冷卻后用天平稱重,繪制生長曲線并分別對其中的活性成分進(jìn)行初步的定性檢測。菌絲體和培養(yǎng)液中活性成分的檢測將搖瓶灌養(yǎng)中所得的干菌絲體冷凍后研碎并用80%乙醇回流、過濾、濃縮后再加氯仿萃??;發(fā)酵液濃縮后也用氯仿萃取。二者的氯仿萃取液濃縮后,分別點樣于加有

6、3%CMC的硅膠G薄板上進(jìn)行薄層層析。展開劑為氯仿∶甲醇;顯色劑為濃硫酸-乙醇,顯色條件為120℃,min[8]。2實驗結(jié)果與討論.1內(nèi)生真菌的分離及初步薄層分析從桃兒七根、莖中共分離得到21株真菌。經(jīng)分別培養(yǎng)和初步的TLC分析,有3種真菌的菌絲體提取物與鬼臼毒素標(biāo)準(zhǔn)品的Rf值基本相同,而且編號為T8的菌株發(fā)酵液提取物也出現(xiàn)了與標(biāo)準(zhǔn)品相同Rf值的斑點,說明該菌種不僅可能產(chǎn)鬼臼毒素或類似的代謝產(chǎn)物,而且在胞內(nèi)外均有產(chǎn)生。因此,進(jìn)一步的工作以T8為材料進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng),合并菌絲體和發(fā)酵液的氯仿提取物再進(jìn)行TLC分析。.2T8菌株提取物的薄層層析課題

7、份量和難易程度要恰當(dāng),博士生能在二年內(nèi)作出結(jié)果,碩士生能在一年內(nèi)作出結(jié)果,特別是對實驗條件等要有恰當(dāng)?shù)墓烙?。從本學(xué)科出發(fā),應(yīng)著重選對國民經(jīng)濟(jì)具有一定實用價值和理論意義的課題。課題具有先進(jìn)性,便于研究生提出新見解,特別是博士生必須有創(chuàng)新性的成果T8樣品的提取物濃縮液經(jīng)薄層展開后,晾干,置于紫外檢測器下觀察可見2個熒光斑點。再用濃硫酸-乙醇顯色后,其中遷移速度較快的斑點呈紫紅色,且與標(biāo)準(zhǔn)品的Rf值相同,再次證明該菌株具有產(chǎn)生和其宿主相同的鬼臼毒素或其類似物的能力。另一遷移較慢的斑點為黃棕色,其性質(zhì)還有待進(jìn)一步研究。圖1T8菌株提取物的薄層層析結(jié)

8、果 略  目前國內(nèi)外已有一些從不同產(chǎn)地和不同植物中分離的內(nèi)生真菌中篩選出能產(chǎn)生鬼臼毒素和其他藥用活性成分菌株的報道[5,6],例如從桃兒七[8]、川八角蓮[9]和南方山荷葉[10

當(dāng)前文檔最多預(yù)覽五頁,下載文檔查看全文

此文檔下載收益歸作者所有

當(dāng)前文檔最多預(yù)覽五頁,下載文檔查看全文
溫馨提示:
1. 部分包含數(shù)學(xué)公式或PPT動畫的文件,查看預(yù)覽時可能會顯示錯亂或異常,文件下載后無此問題,請放心下載。
2. 本文檔由用戶上傳,版權(quán)歸屬用戶,天天文庫負(fù)責(zé)整理代發(fā)布。如果您對本文檔版權(quán)有爭議請及時聯(lián)系客服。
3. 下載前請仔細(xì)閱讀文檔內(nèi)容,確認(rèn)文檔內(nèi)容符合您的需求后進(jìn)行下載,若出現(xiàn)內(nèi)容與標(biāo)題不符可向本站投訴處理。
4. 下載文檔時可能由于網(wǎng)絡(luò)波動等原因無法下載或下載錯誤,付費完成后未能成功下載的用戶請聯(lián)系客服處理。