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《ⅰ群禽腺病毒山東株的分離鑒定及其致病性研究》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學術(shù)論文-天天文庫。
1、山東農(nóng)業(yè)大學碩士學位論文Ⅰ群禽腺病毒山東株的分離鑒定及其致病性研究姓名：國紀壘申請學位級別：碩士專業(yè)：預防獸醫(yī)學指導教師：刁有祥20120615山東農(nóng)業(yè)入學碩士學位論文中文摘要雞包含體肝炎(Inclusionbodyhepatitis，IBH)是由I群禽腺病毒(FowlAdenovirus．I，F(xiàn)AV-I)的某些血清型引起的以侵害肝臟為主并在肝細胞中形成核內(nèi)包含體為特征的傳染病。本病于1963年首次在美國發(fā)生，隨后在世界各地相繼出現(xiàn)。1976年我國臺灣省首次發(fā)生本病，之后全國各地均有發(fā)生本病的報道。
2、山東省自1988年首次報道本病的發(fā)生以來，幾乎每年都有該病的發(fā)生。禽腺病毒能夠引起免疫抑制，造成機體對疫苗的免疫應答失敗，給肉雞養(yǎng)殖業(yè)帶來嚴重的危害。國內(nèi)已經(jīng)分離到血清1型、血清2型和血清8型的ⅣMI。為探明FAV-I在山東地區(qū)的血清型分布、感染情況及其致病性，本課題從山東省不同地區(qū)疑似包含體肝炎的商品肉雞中進行FAV．I的分離，應用PCR方法對分離毒株hexon基因進行擴增；應用瓊脂擴散試驗(AGP)對分離毒株的血清型進行鑒定。結(jié)果在山東地區(qū)共分離到8株FAV．I。所有分離毒株均符合FAV．I的理
3、化特性且均能擴增到特異的目的片段；8株FAV。1分離毒株可分為3個血清型，其中血清2型1株，血清8型4株，血清lO型3株。選擇l株血清10型FAV．1分離毒株通過皮下注射接種途徑人工感染SPF雛雞，同時設對照組。逐同觀察雞只的發(fā)病情況及癥狀；于感染后不同時間隨機剖殺試驗組和對照組雞只，采集心臟、肝臟、肺臟和腸道等器官固定、切片、H．E．染色，觀察各器官病理組織學變化，并進行血常規(guī)和血液生化指標檢測。FAV．I接種后，引起雛雞精神沉郁、食欲不振、嗜睡等癥狀；病理組織學變化以肝臟脂肪變性、肝臟組織結(jié)構(gòu)紊
4、亂、肝竇間出血和炎性細胞浸潤并在肝細胞核內(nèi)可見嗜堿性包含體為主；腸道內(nèi)腸絨毛脫落；肺臟廣泛性出血和炎性細胞浸潤為特征：HGB、WBC、RBC、ALT、ALP、TP和BUN發(fā)生顯著變化。將FAV．I不同血清型的參考毒株濃縮，經(jīng)l‰的甲醛滅活36h后免疫清潔級新西蘭白兔，高免血清經(jīng)辛酸．硫酸銨法和葡聚糖G200柱純化，制得第一抗體。以FITC標記的山羊抗兔IgG為第二抗體。通過反應條件的優(yōu)化，建立了FAV．I間接免疫熒光(IFA)快速診斷方法。試驗結(jié)果表明：一抗的最佳稀釋度為l：25，感作時問為4。C過
5、夜，二抗的最佳工作濃度為l：200，感作時間為37。Clh，F(xiàn)AV．I特異性黃綠色熒光最清晰。應用建立的IFA對FAV-1人工感染雛雞的各組織器官進行檢測，肝臟、脾臟、腸道、肺臟均可檢測到FAV．I，其中肝臟和腸道檢出率最高，表明這兩個器官是FAV．I的主要靶器官。研究表明本法用于FAV．I的診斷具有簡單、快速、特異性強等特點，是對FAV—I進行I群禽腺病毒山東株的分離鑒定及其致病性研究檢測和抗原定位的良好方法。關(guān)鍵詞：I群禽腺病毒；分離鑒定；血清型；致病性；間接免疫熒光；抗原定位山東農(nóng)業(yè)人學碩七學
6、位論文AbstractInclusionbodyhepatitis(IBH)istodisoperatetheliversandformintranuclearinclusioninthelix7ercellscausedbysomeserotypesofFowlAdenovirus．I(FAV—I)．Itwasfirstdetectedinthe1963inAmericaandisnowwidelydistributedinmanycountriesworldwide．Itwasfirstdesc
7、ribedinTaiwanin1976．SubsequentlythereportoflBHincreasedgradually．ThisdiseasewasfirstlyreportedinShandongprovince，Chinain1988，andprevailseveryyear．FowlAdenovirus—Icancausesevereimmunesuppressionwhichresultsinpoororfailureoftheimmuneeffects，andcausessubs
8、tantiallossinthepoultryindustry．SerotypeI，serotypeIIandserotypeVIIIofFAV—1wereisolatedinChina．Inthisstudy，F(xiàn)AV—1wasisolatedfromsuspectedinfectioninShandongprovince．SerotypesofisolatedIBHstrainsweredeterminedbychickembryopathologicalchang
