il-6跨信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑在對(duì)乙酰氨基酚誘導(dǎo)的小鼠急性肝損傷中的作用研究

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1、分類號(hào)UDC密級(jí)編號(hào)碩士學(xué)位論文IL-6跨信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑在對(duì)乙酰氨基酚誘導(dǎo)的小鼠急性肝損傷中的作用研究ToStudytheEffectofIL-6Trans-signalinginActueLiverInjuryInducedbyAcetaminopheninMice學(xué)位申請(qǐng)人：韓紅梅指導(dǎo)教師：李三強(qiáng)教授一級(jí)學(xué)科：生物學(xué)二級(jí)學(xué)科：遺傳學(xué)學(xué)位類別：理學(xué)碩士2016年05月萬方數(shù)據(jù)獨(dú)創(chuàng)性聲明本人聲明，所呈交的論文是我個(gè)人在導(dǎo)師指導(dǎo)下完成的研究工作及取得的研究成果。據(jù)我所知，文中除了特別加以標(biāo)注和致謝的地方外，不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果，也不包含為獲得河南科技大學(xué)或其它教育機(jī)構(gòu)的其他學(xué)位

2、或證書而使用過的材料。與我一同工作的同志對(duì)本研究所做的任何貢獻(xiàn)均已在論文中作了明確的說明并表示了謝意。研究生簽名：日期：關(guān)于論文使用授權(quán)的說明本人完全了解河南科技大學(xué)有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定，即：學(xué)校擁有對(duì)所有學(xué)位論文的復(fù)制權(quán)、傳播權(quán)、匯編權(quán)及其它使用權(quán)（特殊情況需要保密的論文應(yīng)提前說明，但在解密后應(yīng)遵守此規(guī)定）。需要保密的論文請(qǐng)?zhí)顚懀罕緦W(xué)位論文在年月至年月期間需要保密，解密后適用本授權(quán)書。（需要保密的學(xué)位論文無須向圖書館提供論文的電子文檔）研究生簽名：導(dǎo)師簽名：日期：萬方數(shù)據(jù)摘要摘要目的本課題旨在利用白介素-6（IL-6）跨信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑的抑制劑sgp130Fc和激動(dòng)劑Hyper-IL-

3、6來研究IL-6跨信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑在對(duì)乙酰氨基酚（acetaminophen,AAP）誘導(dǎo)的小鼠急性肝損傷中的具體作用。方法健康BALB/c雄性小鼠72只，隨機(jī)分4組（A組、B組、C組、D組），A組小鼠腹腔注射0.1mL的PBS，B、C、D組小鼠均按500mg/kg腹腔注射AAP溶液0.1mL，C組小鼠提前1h腹腔注射0.1mL濃度為10μg/mL的sgp130Fc，D組小鼠提前1h腹腔注射0.1mL濃度為0.5μg/mL的Hyper-IL-6。在注射PBS或AAP溶液24h后小鼠眼球取血做血清中谷草轉(zhuǎn)氨酶（AST）、谷丙轉(zhuǎn)氨酶（ALT）的酶活性檢測(cè)和可溶性IL-6受體（solubleIL-6R

4、,sIL-6R）表達(dá)水平的檢測(cè)。之后頸椎脫臼處死小鼠，取其肝臟，一份肝臟組織用10%多聚甲醛4°C固定過夜，制作石蠟切片做以下檢測(cè)：HE染色方法檢測(cè)各組小鼠的肝臟損傷情況；TUNEL染色方法檢測(cè)各組小鼠的肝細(xì)胞凋亡情況；PAS染色方法檢測(cè)各組小鼠肝臟中糖原的表達(dá)情況；另一份肝臟組織經(jīng)研磨后提取蛋白，用蛋白印跡法（westernblot，WB）檢測(cè)各組小鼠中的IL-6跨信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑的激活標(biāo)志p-STAT3（磷酸化的信號(hào)轉(zhuǎn)錄因子3）、增殖細(xì)胞核抗原（PCNA）、細(xì)胞凋亡相關(guān)蛋白Caspase3、血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子（vascularendothelialgrowthfactor，VEGF）及代謝關(guān)鍵

5、酶細(xì)胞色素P4502E1（cytochromeP450，CYP2E1）的表達(dá)情況。結(jié)果1.血清AST、ALT的酶活性：B、C、D組小鼠血清中AST、ALT的水平顯著高于A組（P<0.05或P<0.01），C組小鼠血清中AST、ALT的水平明顯高于B組（P<0.05），D組小鼠血清中AST、ALT的水平明顯低于B組（P<0.05）。2.血清sIL-6R的表達(dá)水平：B、C、D組小鼠血清中sIL-6R的水平均明顯高于A組（P<0.05或P<0.01），C組小鼠血清中sIL-6R的水平明顯低于B組（P<0.05），D組小鼠血清中sIL-6R的水平明顯高于B組（P<0.05）。3.HE染色情況：與B組

6、相比較，C組小鼠肝臟損傷程度加重（P<0.05），而D組小鼠肝臟損傷程度減輕（P<0.05）。4.TUNEL染色情況：A組小鼠中發(fā)生凋亡的肝細(xì)胞很少，B組小鼠中的凋亡肝細(xì)胞數(shù)較A組顯著增多（P<0.01），C組小鼠中的凋亡肝細(xì)胞數(shù)較B組顯著增多（P<0.05），D組小鼠中的凋亡肝細(xì)胞數(shù)較B組顯著減少（P<0.05）。5.PAS染色情況：注射AAP后B、C、D組小鼠與A組小鼠相比其肝臟中都出現(xiàn)了糖原含量的減少（P<0.05或P<0.01），C組小鼠肝臟中糖原的含量較B組顯著減少（P<0.05），而D組小鼠肝臟中糖原的I萬方數(shù)據(jù)摘要含量較B組顯著增多（P<0.05）。6.WB結(jié)果：(1)p-ST

7、AT3、PCNA和VEGF的表達(dá)情況：與B組相比較，C組小鼠肝臟中p-STAT3、PCNA和VEGF的表達(dá)量顯著減少（P<0.05），而D組小鼠肝臟中p-STAT3、PCNA和VEGF的表達(dá)量顯著增多（P<0.05）。(2)Caspase3、CYP2E1的表達(dá)情況：與B組相比較，C組小鼠肝臟中Caspase3、CYP2E1的表達(dá)量顯著增加（P<0.05），而D組小鼠肝臟中Caspase3、CYP2E1的表達(dá)量