il-6跨信號轉導途徑在對乙酰氨基酚誘導的小鼠急性肝損傷中的作用研究

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1、分類號UDC密級編號碩士學位論文IL-6跨信號轉導途徑在對乙酰氨基酚誘導的小鼠急性肝損傷中的作用研究ToStudytheEffectofIL-6Trans-signalinginActueLiverInjuryInducedbyAcetaminopheninMice學位申請人：韓紅梅指導教師：李三強教授一級學科：生物學二級學科：遺傳學學位類別：理學碩士2016年05月萬方數(shù)據(jù)獨創(chuàng)性聲明本人聲明，所呈交的論文是我個人在導師指導下完成的研究工作及取得的研究成果。據(jù)我所知，文中除了特別加以標注和致謝的地方外，不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果，也不包含為獲得河南科技大學或其它教育機構的其他學位

2、或證書而使用過的材料。與我一同工作的同志對本研究所做的任何貢獻均已在論文中作了明確的說明并表示了謝意。研究生簽名：日期：關于論文使用授權的說明本人完全了解河南科技大學有關保留、使用學位論文的規(guī)定，即：學校擁有對所有學位論文的復制權、傳播權、匯編權及其它使用權（特殊情況需要保密的論文應提前說明，但在解密后應遵守此規(guī)定）。需要保密的論文請?zhí)顚懀罕緦W位論文在年月至年月期間需要保密，解密后適用本授權書。（需要保密的學位論文無須向圖書館提供論文的電子文檔）研究生簽名：導師簽名：日期：萬方數(shù)據(jù)摘要摘要目的本課題旨在利用白介素-6（IL-6）跨信號轉導途徑的抑制劑sgp130Fc和激動劑Hyper-IL-

3、6來研究IL-6跨信號轉導途徑在對乙酰氨基酚（acetaminophen,AAP）誘導的小鼠急性肝損傷中的具體作用。方法健康BALB/c雄性小鼠72只，隨機分4組（A組、B組、C組、D組），A組小鼠腹腔注射0.1mL的PBS，B、C、D組小鼠均按500mg/kg腹腔注射AAP溶液0.1mL，C組小鼠提前1h腹腔注射0.1mL濃度為10μg/mL的sgp130Fc，D組小鼠提前1h腹腔注射0.1mL濃度為0.5μg/mL的Hyper-IL-6。在注射PBS或AAP溶液24h后小鼠眼球取血做血清中谷草轉氨酶（AST）、谷丙轉氨酶（ALT）的酶活性檢測和可溶性IL-6受體（solubleIL-6R

4、,sIL-6R）表達水平的檢測。之后頸椎脫臼處死小鼠，取其肝臟，一份肝臟組織用10%多聚甲醛4°C固定過夜，制作石蠟切片做以下檢測：HE染色方法檢測各組小鼠的肝臟損傷情況；TUNEL染色方法檢測各組小鼠的肝細胞凋亡情況；PAS染色方法檢測各組小鼠肝臟中糖原的表達情況；另一份肝臟組織經(jīng)研磨后提取蛋白，用蛋白印跡法（westernblot，WB）檢測各組小鼠中的IL-6跨信號轉導途徑的激活標志p-STAT3（磷酸化的信號轉錄因子3）、增殖細胞核抗原（PCNA）、細胞凋亡相關蛋白Caspase3、血管內(nèi)皮生長因子（vascularendothelialgrowthfactor，VEGF）及代謝關鍵

5、酶細胞色素P4502E1（cytochromeP450，CYP2E1）的表達情況。結果1.血清AST、ALT的酶活性：B、C、D組小鼠血清中AST、ALT的水平顯著高于A組（P<0.05或P<0.01），C組小鼠血清中AST、ALT的水平明顯高于B組（P<0.05），D組小鼠血清中AST、ALT的水平明顯低于B組（P<0.05）。2.血清sIL-6R的表達水平：B、C、D組小鼠血清中sIL-6R的水平均明顯高于A組（P<0.05或P<0.01），C組小鼠血清中sIL-6R的水平明顯低于B組（P<0.05），D組小鼠血清中sIL-6R的水平明顯高于B組（P<0.05）。3.HE染色情況：與B組

6、相比較，C組小鼠肝臟損傷程度加重（P<0.05），而D組小鼠肝臟損傷程度減輕（P<0.05）。4.TUNEL染色情況：A組小鼠中發(fā)生凋亡的肝細胞很少，B組小鼠中的凋亡肝細胞數(shù)較A組顯著增多（P<0.01），C組小鼠中的凋亡肝細胞數(shù)較B組顯著增多（P<0.05），D組小鼠中的凋亡肝細胞數(shù)較B組顯著減少（P<0.05）。5.PAS染色情況：注射AAP后B、C、D組小鼠與A組小鼠相比其肝臟中都出現(xiàn)了糖原含量的減少（P<0.05或P<0.01），C組小鼠肝臟中糖原的含量較B組顯著減少（P<0.05），而D組小鼠肝臟中糖原的I萬方數(shù)據(jù)摘要含量較B組顯著增多（P<0.05）。6.WB結果：(1)p-ST

7、AT3、PCNA和VEGF的表達情況：與B組相比較，C組小鼠肝臟中p-STAT3、PCNA和VEGF的表達量顯著減少（P<0.05），而D組小鼠肝臟中p-STAT3、PCNA和VEGF的表達量顯著增多（P<0.05）。(2)Caspase3、CYP2E1的表達情況：與B組相比較，C組小鼠肝臟中Caspase3、CYP2E1的表達量顯著增加（P<0.05），而D組小鼠肝臟中Caspase3、CYP2E1的表達量