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《左歸丸對(duì)衰老大鼠間充質(zhì)干細(xì)胞增殖與分化實(shí)驗(yàn)研究》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線(xiàn)閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫(kù)。
1、廣州中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)位論文原創(chuàng)性聲明本人鄭重聲明：所呈交的學(xué)位論文，是個(gè)人在導(dǎo)師的指導(dǎo)下，獨(dú)立進(jìn)行研究工作所取得的成果。除文中已經(jīng)特別加以注明引用的內(nèi)容外，本論文不含任何其他個(gè)人或集體已經(jīng)發(fā)表或撰寫(xiě)過(guò)的作品成果。對(duì)本文的研究做出重要貢獻(xiàn)的個(gè)人和集體，均已在文中以明確方式標(biāo)明并致謝。本人完全意識(shí)到本聲明的法律結(jié)果由本人承擔(dān)。學(xué)位論文作者簽名讓Et期：矽午年∥月弓Et關(guān)于學(xué)位論文使用授權(quán)的聲明本人完全了解廣州中醫(yī)藥大學(xué)有關(guān)保留使用學(xué)位論文的規(guī)定，同意學(xué)校保留或向國(guó)家有關(guān)部門(mén)機(jī)構(gòu)送交論文的復(fù)印件和電子版，允許被查閱和借閱。本人授權(quán)廣州中醫(yī)藥大學(xué)可以將本學(xué)位論文的全部或
2、部分內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行檢索，可以采用影印、縮印或其他復(fù)印手段保存和匯編本學(xué)位論文。(保密論文在解密后應(yīng)遵守此規(guī)定)論文作者簽名輯論文導(dǎo)師簽名日期：沙-}年f月弓日摘要IIIIIIIIPIIPIIIIPIIIIHIIIIIIIJJIIlY2623128目的：在中醫(yī)學(xué)“腎精虧虛”致衰老論及“干細(xì)胞具先天之精屬性，是先天之精在細(xì)胞層次的存在形式"理論的指導(dǎo)下，探討補(bǔ)腎益精代表方左歸丸對(duì)衰老大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(MsC)增殖與分化的影響。把中醫(yī)藥延緩衰老與干細(xì)胞研究相結(jié)合，從干細(xì)胞角度研究補(bǔ)腎益精法抗衰老的作用機(jī)理。為深入揭示中醫(yī)藥延緩衰老的機(jī)制研究提供創(chuàng)新性的
3、思路，為左歸丸應(yīng)用于臨床抗衰老的保健與治療提供有力的實(shí)驗(yàn)依據(jù)。方法：1、選用3月齡SD大鼠，雌雄各半，通過(guò)腹腔注射D一半乳糖造模，制備衰老大鼠模型。選用補(bǔ)腎益精代表方左歸丸水煎劑對(duì)模型大鼠灌胃治療。2、運(yùn)用全骨髓貼壁法分離、培養(yǎng)MSC，光鏡觀察各組大鼠MSC一般形態(tài)學(xué)特征，電鏡觀察各組大鼠MSC的超微結(jié)構(gòu)特點(diǎn)。3、觀察正常組、模型組、左歸丸組大鼠MSC細(xì)胞形態(tài)、生長(zhǎng)曲線(xiàn)、生長(zhǎng)周期、B一半乳糖苷酶衰老細(xì)胞染色結(jié)果，比較各組大鼠MSC增殖能力。4、觀察正常組、模型組、左歸丸組大鼠MSC在成骨細(xì)胞分化過(guò)程中堿性磷酸酶(ALP)活性的表達(dá)及ALP染色陽(yáng)性細(xì)胞率，比較
4、各組大鼠MSC的成骨細(xì)胞分化能力。5、觀察正常組、模型組、左歸丸組大鼠MSC在成脂細(xì)胞分化過(guò)程中甘油三酯(TG)的表達(dá)及油紅0染色陽(yáng)性細(xì)胞率，比較各組大鼠MSC的成脂細(xì)胞分化能力。結(jié)果：1、模型組P3代大鼠骨髓MSC在光鏡下呈現(xiàn)衰老細(xì)胞形態(tài)學(xué)特征，左歸丸組大鼠骨髓MSC的細(xì)胞形態(tài)與正常組相近。透射電鏡觀察顯示，模型組大鼠P3代骨髓MSC細(xì)胞內(nèi)結(jié)構(gòu)改變呈現(xiàn)衰老特征，左歸丸中劑量組大鼠的骨髓MSC電鏡下的超微結(jié)構(gòu)與正常組最相近。2、從各組大鼠P3、P5代MSC生長(zhǎng)曲線(xiàn)圖可發(fā)現(xiàn)，模型組MSCOD值明顯低于正常組、左歸丸組MSCOD值明顯高于模型組(必0．05)。1
5、3一半乳糖苷酶衰老細(xì)胞染色結(jié)果顯示，模型組衰老細(xì)胞陽(yáng)性率明顯高于正常組(K0．05)，左歸丸可顯著降低衰老細(xì)胞的陽(yáng)性率(尸鋤05)。3、堿性磷酸酶染色，模型組MSC染色陽(yáng)性率明顯低于正常組，左歸丸組MSC染色陽(yáng)性率明顯高于模型組(尸<現(xiàn)05)。成骨誘導(dǎo)14d模型組MSCALP活性值明顯低于正常組、左歸丸組MSCALP活性明顯高于模型組(尸<現(xiàn)徹。4、油紅0染色，模型組MSC染色陽(yáng)性率明顯高于正常組，左歸丸組MsC染色陽(yáng)性率明顯低于模型組(尸<現(xiàn)徹。成脂誘導(dǎo)7d模型組MSCTG表達(dá)量明顯高于正常組、左歸丸組MSCTG表達(dá)量明顯低于模型組(尸<現(xiàn)∞。結(jié)論：1、所
6、培養(yǎng)的大鼠干細(xì)胞在細(xì)胞形態(tài)上具備MSC特征。衰老大鼠MSC的細(xì)胞形態(tài)各方面表現(xiàn)有明顯改變。左歸丸能改善衰老細(xì)胞的形態(tài)學(xué)變化。2、衰老大鼠MSC增殖能力減弱，左歸丸能改善衰老大鼠MSC增殖能力。3、衰老大鼠MSC骨向分化能力降低，脂向分化能力增強(qiáng)。左歸丸水煎液一定濃度時(shí)可促進(jìn)衰老大鼠MSC向成骨細(xì)胞分化，同時(shí)可抑制其向成脂細(xì)胞分化。關(guān)鍵詞：衰老；左歸丸；間充質(zhì)干細(xì)胞：增殖；分化IIEffectsofZuoguiPiIonMSCProIiferation，OsteogeniCDifferentiationandAdipogeniCDifferentiationo
7、fAgingRatsSpeciaIty：ThebasiCtheoryofTraditionaIChineseMediciReAuthor：ZhanFeiSupervisor：Associateprofessor：ZhangJinAbstractResearchpurposeThecurrentstudyinvestigatedtheeffectsofZuoguipill，whichisarepresentiveprescriptiontoinvigoratekidneyandnourishessence，onagingrat’Sbonemarrowmesen
8、chymalstemcells(MSC)pr01if
