口腔鱗癌患者與健康人唾液差異表達(dá)蛋白的初步研究

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1、《中國(guó)圖書(shū)資料分類法》分類號(hào):R739.85單位代碼：10660學(xué)號(hào):S100343貴陽(yáng)醫(yī)學(xué)院2013屆碩士學(xué)位論文口腔鱗癌患者與健康人唾液差異表達(dá)蛋白的初步研究研究生：孫昆俊導(dǎo)師：馬洪教授年級(jí)：2010級(jí)專業(yè)：口腔臨床醫(yī)學(xué)2013年5月25日基金項(xiàng)目：貴陽(yáng)市科技局社發(fā)攻關(guān)項(xiàng)目基金貴陽(yáng)醫(yī)學(xué)院2013屆碩士研究生學(xué)位論文目錄摘要??????????????2前言??????????????3材料與方法????????????5結(jié)果??????????????14討論??????????????21參考文獻(xiàn)?????????????29英

2、文摘要?????????????34致謝??????????????36略縮詞表?????????????37論文原創(chuàng)性聲明??????????38附：綜述????????????39-1-貴陽(yáng)醫(yī)學(xué)院2013屆碩士研究生學(xué)位論文口腔鱗癌患者與健康人唾液差異表達(dá)蛋白的初步研究專業(yè)：口腔臨床醫(yī)學(xué)（頜面外科方向）研究生：孫昆俊導(dǎo)師：馬洪教授摘要目的：1、通過(guò)口腔鱗癌患者唾液及健康人唾液中蛋白質(zhì)組成的對(duì)比分析，初步研究口腔鱗癌患者唾液蛋白與健康人唾液蛋白差異表達(dá)情況。2、建立口腔鱗癌唾液蛋白質(zhì)組雙向電泳圖譜，為進(jìn)一步獲取口腔鱗癌患者唾液蛋白質(zhì)

3、組的生物學(xué)信息打下初步基礎(chǔ)。方法：收集口腔鱗癌患者唾液17例，健康人唾液17例，通過(guò)以雙向凝膠電泳技術(shù)分離唾液中的蛋白質(zhì)，考染染色獲取唾液蛋白質(zhì)組雙向電泳圖譜，經(jīng)MALDI-TOF/MS質(zhì)譜鑒定以及搜索NCBI數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行生物信息學(xué)分析，獲得口腔鱗癌中差異表達(dá)的蛋白質(zhì)信息。結(jié)果：選取口腔鱗癌和正常人唾液中具有明顯差異表達(dá)的10個(gè)蛋白質(zhì)點(diǎn)，對(duì)其進(jìn)行質(zhì)譜鑒定和生物信息學(xué)分析，共鑒定出4種差異表達(dá)的蛋白質(zhì)，其分別為S100A8、S100A8/S100A9、表皮角蛋白2在口腔鱗癌唾液中均呈高表達(dá)，而載脂蛋白A-Ⅰ在口腔鱗癌唾液中呈低表達(dá)。結(jié)論：

4、1、通過(guò)唾液蛋白質(zhì)組學(xué)方法對(duì)口腔鱗癌患者唾液和健康人唾液中差異表達(dá)蛋白進(jìn)行檢測(cè)，建立了口腔鱗癌唾液蛋白質(zhì)組雙向電泳圖譜，并鑒定出口腔鱗癌的差異蛋白質(zhì)，為深入研究口腔鱗癌發(fā)生發(fā)展的分子機(jī)制提供了實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)，并為獲取口腔鱗癌患者唾液蛋白質(zhì)組的生物學(xué)信息建立了初步基礎(chǔ)。2、本課題證明了在口腔鱗癌發(fā)生發(fā)展過(guò)程中這些功能不同的差異表達(dá)蛋白可能起重要調(diào)控作用，但還有待進(jìn)一步研究與探索其調(diào)控機(jī)制。關(guān)鍵詞：唾液口腔鱗癌蛋白質(zhì)組學(xué)雙向電泳腫瘤標(biāo)志物-2-貴陽(yáng)醫(yī)學(xué)院2013屆碩士研究生學(xué)位論文前言口腔鱗癌（oralsquamouscellcarcinoma

5、,OSCC）是嚴(yán)重危害人類健康的口腔頜面部最常見(jiàn)惡性腫瘤之一，在口腔惡性腫瘤中占80%以上。目前雖在很大程度[1-3]上提高了治療水平及治療技術(shù)，但總生存率仍低于60%，所以提高口腔鱗癌治愈率，降低死亡率的重點(diǎn)是早期發(fā)現(xiàn)、早診斷、早治。盡管在研究口腔鱗癌發(fā)病[4,5]機(jī)理方面，從基因(DNA)和基因轉(zhuǎn)錄(mRNA)水平作了眾多的研究,然而是通過(guò)其表達(dá)的蛋白質(zhì)來(lái)實(shí)現(xiàn)基因的功能，若能直接從蛋白質(zhì)水平研究口腔鱗癌，將使OSCC癌變過(guò)程中的分子事件得到更加全面、真實(shí)地揭示，為口腔鱗癌的診斷提供新的手段。腫瘤蛋白組學(xué)研究技術(shù)與傳統(tǒng)的蛋白檢測(cè)技術(shù)

6、如免疫組織化學(xué)法、ELISA及Western等相比，能夠在蛋白的功能和表達(dá)方面具有更加全面的研究。因此，高通量的蛋白組學(xué)研究技術(shù)是研究腫瘤發(fā)生發(fā)展機(jī)制的理想平臺(tái)。至今腫瘤蛋白質(zhì)組學(xué)研究的主要內(nèi)容：一方面是腫瘤全蛋白表達(dá)譜的創(chuàng)立，用于分離鑒定腫瘤；另一方面是腫瘤與正常細(xì)胞的表達(dá)差異研究，鑒定各種病損的差異蛋白，建立腫瘤發(fā)生、發(fā)展的蛋白組譜，針對(duì)發(fā)現(xiàn)可作為生物標(biāo)記的組織、血液及唾液中的特異蛋白進(jìn)行評(píng)估，運(yùn)用于臨床無(wú)創(chuàng)傷早期診斷，判斷預(yù)后以及尋找新的治療的靶[6,7]標(biāo)，促進(jìn)患者生活質(zhì)量的改善，提高生存率。腫瘤蛋白標(biāo)記物能作為腫瘤早期發(fā)現(xiàn)、

7、早期診斷的條件之一，即是其被發(fā)現(xiàn)和合理應(yīng)用。多年來(lái)，研究人員不斷致力于腫瘤的特異性標(biāo)記物的發(fā)掘，其中組織和體液是重點(diǎn)研究方向,而目前關(guān)于口腔鱗癌蛋白質(zhì)組學(xué)研究報(bào)告多是組織、血清方面的蛋白質(zhì)組學(xué)研究，而其他體液蛋白組學(xué)的研究較少。當(dāng)中唾液作為與口腔鱗癌相關(guān)的主要體液之一，其含有口腔組織細(xì)胞及其代謝或分泌產(chǎn)物，并且起到潤(rùn)滑、緩沖、抗菌等諸多作用，而以唾液為中介用于早期診斷其優(yōu)勢(shì)明顯:既取樣方便且安全無(wú)創(chuàng)，又能反復(fù)采集提取，并可用于大規(guī)模的普查篩選等。美國(guó)國(guó)立牙科和顱頜面研究科學(xué)院(NationalInstituteofDentalandC

8、raniofacial[8]Research，NIDCR)于2006年提出了一項(xiàng)重點(diǎn)研究計(jì)劃：創(chuàng)立唾液診斷學(xué)(salivarydiagnostics)，即在研究健康人唾液中近乎所有蛋白質(zhì)組分的基礎(chǔ)上，創(chuàng)建以唾液為研究對(duì)象