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《小麥tacrf2基因的克隆及其在煙草中的初步功能驗證》由會員上傳分享,免費在線閱讀,更多相關(guān)內(nèi)容在教育資源-天天文庫。
1、萬方數(shù)據(jù)作物學報ACTAAGRONOMICASINICA2011,37(8):1389--1397http://www.chinaerops.org/zwxb/ISSN0496-3490;CODENTSHPA9E—mail:xbzw@chinajoumal.net.CUDoI:10.3724/SP.J.1006.2011.01389小麥TaCRF2基因的克隆及其在煙草中的初步功能驗證郭麗香1,2趙昌平2·’高世慶2,料唐益苗2王永波2劉美英3張朝3徐蓓1,21首都師范大學生命科學學院,北京100048;2北京市農(nóng)林科學院雜交小麥
2、工程技術(shù)研究中心.北京100097;3中國科學技術(shù)大學研究生院化學系,安徽合肥230026摘要:通過RT-PCR方法從小麥cDNA中擴增獲得1個鋅指蛋白基因TaCRF2,該基因的cDNA長度為843bp,序列分析表明它編碼1個含有280個氨基酸的蛋白質(zhì)。在線軟件預測該蛋白質(zhì)的相對分子質(zhì)量為30.97kD,等電點為7.03,且在C一末端含有1個典型的RING.H2型鋅指蛋白結(jié)構(gòu)域,在N.末端含有2個跨膜結(jié)構(gòu)域。氨基酸序列比對發(fā)現(xiàn),TaCRF2與水稻中1個RING型鋅指蛋[芻(ABF95226)的相似度為82%。亞細胞定位分析顯示,
3、該蛋白分布在細胞核和細胞膜上。real.timeRT-PCR表達特性分析顯示,TaCRF2基因的表達受干旱、高鹽和外源ABA的強烈誘導,低溫對該基因的表達量影響不明顯。初步功能驗證發(fā)現(xiàn)過表達TaCRF2基因增強了轉(zhuǎn)基因煙草對干旱和高鹽脅迫的耐性。關(guān)鍵詞:煙草;小麥;RING.H2型鋅指蛋白;TaCRF2基因;干旱脅迫;鹽脅迫TaCRF2GeneIsolationfromTriticumaestivumandPrimaryFunctionValida-tioninTobacco(NicotianatabacumL)GUOLi—Xi
4、an91,一,GAOShi.Qin92’”,TANGYi.Mia02,WANGYong.B02,L1UMei—Yin93,ZHANGZha03,XUBcilt_.a(chǎn)ndZHAOChang.Pin92'‘1CollegeofLifeSciences.CapitalNormalUniversity,Beijing100048,China;2BeijingHybridWheatEngineeringandTechnologyResearchCenter,BeijingAcademyofAgricultureandForestrySci
5、ences,Beijing100097,Chhla;3DepartmentofChemistry,GraduateSchoolofUniversityofScienceandTechnologyofChina,Hefei230026,ChinaAbstract:ⅥmeaLlikeothercrops。suffersfromdrought,salt,low.temperatureandotherabioticstresses,seriouslyresultinginyielddecline.ItisaneffectiveWayfo
6、rcropbreedingtoimproveresistanceviamolecularbiologytechniques.Zincfmgerprotein,animportanttranscriptionfactorcommonlyfoundinplant,carlregulatetheexpressionofmultiplestress—induciblegenesandenhancecomprehensiveresistanceseffectively.Inthisstudy,aIu時G-H2zincfingerprote
7、ingene,designatedasTaCRF2,wasisolatedfromTriticumaestivumbvRT-PCR.ItscDNAwas843bpandencodedaputativeproteinof280Rlllinoacidswithapre-dictedmolecularmassof30.97kDandanisoelectricpoint(PI)of7.03.AtypicalRENG.H2fingerdomainwasfoundattheC-terrainalregionofT忙RF2protein.a(chǎn)n
8、dtWotransmembranedomainswerefoundattheN-terminalregion.AlignmentofaminoacidsequenceshowedthatTaCRF2was82%identicaltoOryzasativaputa