廣棗總黃酮對大鼠缺血心肌組織蛋白質表達的影響

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1、·1344·中國藥理學通報ChinesePharmacologicalBulletin2006Nov;22(11):1344~8廣棗總黃酮對大鼠缺血心肌組織蛋白質表達的影響1123張琪,楊玉梅,劉鳳鳴,宋一亭(1.包頭醫(yī)學院心血管研究室,內蒙古包頭014010;2.北京億立生物技術研究所,北京100044;3.內蒙古中蒙醫(yī)研究所,內蒙古呼和浩特010020)中國圖書分類號:R2332;R282171;R28411;R322111;1.2藥品和試劑TFC由內蒙古中蒙醫(yī)研究所提R341;R39413;R542120513;R97716供,生藥濃度為1

2、115kg·L-1,以蘆丁計,總黃酮的文獻標識碼:A文章編號:100121978(2006)11-1344-05純度為48%。尿素、蛋白酶抑制劑、Tris(三羥甲基摘要:目的探討廣棗總黃酮對缺血心肌的保護作用及其相氨甲烷)、HEPES(羥乙基哌嗪乙磺酸)CHAPS[32關蛋白表達譜的改變。方法應用表面增強激光解吸離子(32膽胺丙基)二甲氨基212丙磺酸〕均購自Sigma公化(surfaceenhancedlaserdesorption/lonization,SELDI)蛋白司。SPA購自Fluka公司。IMAC3、SAX2和NP20質芯片技術檢測

3、了經(jīng)廣棗總黃酮處理后的缺血心肌組織和蛋白芯片由北京師范大學高等學校蛋白質組學研究未經(jīng)廣棗總黃酮處理后的缺血心肌組織中的蛋白質譜。用PHSII2C型蛋白芯片閱讀機讀取數(shù)據(jù)并進行比較分析。結果院提供。與未經(jīng)廣棗總黃酮處理后的缺血心肌組織相比,有7個蛋1.3儀器PHSII2C型蛋白芯片閱讀機(美國Ci2白質在經(jīng)廣棗總黃酮處理后的缺血心肌組織中有變化,其中phergen公司),超聲波破碎儀(美國思博明科學器有2個在廣棗總黃酮處理后的缺血心肌組織中呈高表達,5材有限公司),BL2410生物信號處理系統(tǒng)(成都泰盟個蛋白低表達,其中有4個出現(xiàn)在IMAC3芯片上

4、,1個出現(xiàn)公司)。在SAX2芯片上。結論廣棗總黃酮在缺血心肌組織中可2方法調節(jié)相關蛋白表達譜從而產生保護作用。2.1心肌缺血模型的建立20只大鼠,♂♀兼用,體重(215±30)g,隨機分為對照組和給藥組,每組關鍵詞:廣棗總黃酮;心肌缺血;蛋白質組-110只,大鼠以20ml·kg容量灌胃,對照組給予生-1理鹽水,給藥組給予廣棗總黃酮23g·kg(按生藥廣棗為藏、蒙醫(yī)習用藥材,來源于漆樹科南酸棗濃度計算),連續(xù)14d。d14給藥1h后腹腔注射屬植物南酸棗[choerospondiasaxillarisroxbburttet-13%戊巴比妥鈉1ml·k

5、g麻醉,仰位固定,記錄Ⅱhill]的干燥果實。廣棗總黃酮(totalflavonesofCho2導心電圖,分離頸總動脈,行氣管插管術,連接動物erospondiasaxiarisfructus,TFC)為其活性成分,具有呼吸機,左側第四肋間開胸,剪開心包,輕壓胸壁擠多種生理活性,尤其對心血管系統(tǒng)有明顯的作用。出心臟,結扎冠脈左前降支后迅速將心臟送回胸我研究室研究證實,TFC具有明顯的抗心肌缺血損[4]腔,用BL2410生物信號處理系統(tǒng)監(jiān)測缺血前后傷的作用,對實驗性急性心肌缺血導致的多種房性[1~3]心電圖變化。待心肌缺血5h后快速取出心臟,用和室

6、性心律失常具有明顯的保護作用。為進一生理鹽水灌注以清除血液成分,保存于液氮中待測。步探討TFC抗心肌缺血損傷作用的物質基礎,本實2.2細胞總蛋白的提取從液氮中取出心肌組織,驗應用SELDI蛋白質芯片技術對TFC處理后與未稱重,剪碎后加入5倍體積的細胞裂解液(8mol·處理心肌組織蛋白質表達的差異進行了比較研究。-1-1LUrea、4%CHAPS、40mmol·LTris2HClpH1材料-1714、1mg·L的Leupeptin和Aprotinin、011mmol1.1動物Wistar大鼠20只,由內蒙古大學實驗-1·LPMSF),應用超聲波破碎

7、儀于冰上將組織塊動物中心提供,許可證號SCXK(蒙)2002-0001(清進一步破碎,小心勻漿,防止產生過多泡沫,放入離潔級)。心機中(14000×g)離心30min,取上清用BCA蛋收稿日期:2006-06-01,修回日期:2006-08-20白定量試劑盒的微量測試法測定總蛋白濃度,其余基金項目:國家自然科學基金資助項目(No30160102)上清分裝于Eppendorf管中,置于-80℃以備用。作者簡介:張琪(1980-),女,碩士生,Tel:047225991217,E2mail:2.3IMAC3蛋白芯片實驗步驟在IMAC3蛋白Zhangq

8、i2018@yahoo.com.cn;-1芯片8個點(A2H)的表面加10μl100mmol·L楊玉梅(1959-),女,教授,碩士生導

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