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《廣棗總黃酮對cvb_3病毒引起細胞凋亡的影響》由會員上傳分享,免費在線閱讀,更多相關內(nèi)容在教育資源-天天文庫。
1、廣棗總黃酮對CVB_3病毒引起細胞凋亡的影響第17卷第3期VoI.17No.3中蓮藥導最GuidingJournalofTraditionalChineseMedicineandPharmacy2011年3月March.2011廣棗總黃酮對CVB3病毒引起細胞凋亡的影響劉爽(內(nèi)蒙古醫(yī)學院第二附屬醫(yī)院,內(nèi)蒙古呼和浩特010000)『摘要1目的:建立病毒性心肌炎的體外模型,用新的化學方法提取到含量較高的廣棗總黃酮,研究廣棗總黃酮抗病毒的效果方法:化學法提取廣棗總黃酮,高效液相法測定其含量.培養(yǎng)HeLa~胞和乳鼠心肌細胞,在HeLa~胞和心肌
2、細胞水平上對柯薩奇B病毒進行毒力滴定,并測定廣棗總黃酮的藥物毒性,建立體外病毒性心肌炎模型,通過細胞病變抑制實驗測定廣棗總黃酮體外抗柯薩奇病毒能力.采用Hoechst33258熒光單染觀察染色質(zhì)凝聚,觀察病毒性心肌炎發(fā)病過程中心肌細胞是否存在凋亡,以及運用流式細胞儀檢測廣棗總黃酮是否抑制細胞凋亡.統(tǒng)計學方法采用T檢驗.結果:成功建立體外病毒性心肌炎的模型,廣棗總黃酮在HeLa細胞和乳鼠心肌細胞實驗中可有效抑制CVB3病毒引起的細胞病變數(shù)(P<O.05),對病毒繁殖及細胞凋亡有抑制作用.結論:成功建立體外細胞模型,通過體外實驗證實提
3、取的廣棗總黃酮對心肌細胞有保護作用,通過凋亡相關實驗證實病毒性心肌炎發(fā)病過程中有心肌細胞凋亡,且廣棗總黃酮能抑制心肌細胞凋亡作用.『關鍵詞】廣棗總黃酮;病毒性心肌炎;CVB3;細胞凋亡『中圖分類號1R285.5[文獻標識碼】A[文章編號】1672—951X(201l】03—0087—03TheeffectofTFCtocellapoptosisinducedbyCVB3virusABSTRACTLiuShuangsecondaffiliatedhospitalofinnermongoliamedicalcollege,hohhotOLO
4、OOO)[Objectives】Toestablishmodelofviralmyocarditisinvitro,TodistillTFC(Totalflavonesofchoerospondiasaxillariesfructus1withanewmethod,Totesttheanti—viraleffectofTFC.Method:UsingchemicalmeanstodistillTFCandtestcontentwithHPLCmethod.TCID50ofCVB(coxsackievirusB1)wasdetermine
5、dwithReed—Muenchmethod,theanti—viraleffectofTFCinvitrowasvalidatedthroughcytopathiceffectexperiment.CardiomyocyteApoptosiswasperformedbyusingHoechst33258,Flowcytometry.Result:Theviralmyocarditismodelinvitrowassuccessfullyestablished,TFCcaninhibitCPE(P<0.05)inCPEexperi
6、ment.Virus-reproducinginhibitingexperimentshowsTFCcaneffectivelyinhibitcoxsackievirus,Loga—rithmValueraisemorethanoneunit,Apoptosisrateofcellswasreduced.Conclusion:weestablishedviralmycarditismud—elinvitroandprovedTFCisaneffectiveantiviraldrug.TFCcanreducetherateofapopto
7、sisinducedbyCVB3.[KeywordJTFC;VMC;CVB3;Apoptosis廣棗為蒙醫(yī)常用藥材,主要分布于華中,華南各省f區(qū))及貴州,云南,福建,浙江等省區(qū),是漆樹科南酸棗屬植物南皂苷具有專屙陛強,顯色靈敏的優(yōu)點,明顯優(yōu)于傳統(tǒng)顯色劑.3.2溶劑選擇對照品與供試品的溶解性試驗結果顯示,二者在70%乙醇中易溶,溶解度優(yōu)于甲醇,經(jīng)試驗70%乙醇對比色測定無干擾,故選擇70%乙醇作為供試品與對照品的溶劑.3.3提取方法比較對皂苷的提取方法進行了比較試驗,結果顯示超聲與回流提取效果基本一致,而超聲具有操作簡便快速的優(yōu)點,故選擇
8、了超聲處理的方法;對超聲時間考察結果顯示,超聲30min已提取完全,故確定超聲時間為30min.參考文獻[1】國家中醫(yī)藥管理局.中華本草第8冊【M】.上海:上??茖W技術出版社,2000:252【2】康阿龍,