非洲爪蟾嗅球中間神經(jīng)元樹突棘的活體成像

非洲爪蟾嗅球中間神經(jīng)元樹突棘的活體成像

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1、中圈紳謄艘求大謄博士學(xué)位論文非洲爪蟾嗅球中間神經(jīng)元樹突棘的活體成像作者姓名:黃玉斌學(xué)科專業(yè):神經(jīng)生物學(xué)導(dǎo)師姓名:胡兵教授完成時(shí)間:二O一五年十月UniversityofScienceandTechnologyofChinaADissertationforDoctor,SDegree

2、nvivostudyofdynamicsandstabilityofdendriticspinesonolfactorybulbinterneuronsinXenopuslaevistadpolesAuthor’SNa

3、me:YubinHuangSpeciality:NeurobiologySupervisor:Prof.BingHuFinishedtime:October,2015中國(guó)科學(xué)技術(shù)大學(xué)學(xué)位論文原創(chuàng)性聲明本人聲明所呈交的學(xué)位論文,是本人在導(dǎo)師指導(dǎo)下進(jìn)行研究工作所取得的成果。除已特別加以標(biāo)注和致謝的地方外,論文中不包含任何他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果。與我一同工作的同志對(duì)本研究所做的貢獻(xiàn)均已在論文中作了明確的說明。作者簽名:』瞅簽字日期:—盈且厶且乒—~中國(guó)科學(xué)技術(shù)大學(xué)學(xué)位論文授權(quán)使用聲明作為申請(qǐng)學(xué)位

4、的條件之一,學(xué)位論文著作權(quán)擁有者授權(quán)中國(guó)科學(xué)技術(shù)大學(xué)擁有學(xué)位論文的部分使用權(quán),即:學(xué)校有權(quán)按有關(guān)規(guī)定向國(guó)家有關(guān)部門或機(jī)構(gòu)送交論文的復(fù)印件和電子版,允許論文被查閱和借閱,可以將學(xué)位論文編入《中國(guó)學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫》等有關(guān)數(shù)據(jù)庫進(jìn)行檢索,可以采用影印、縮印或掃描等復(fù)制手段保存、匯編學(xué)位論文。本人提交的電子文檔的內(nèi)容和紙質(zhì)論文的內(nèi)容相一致。保密的學(xué)位論文在解密后也遵守此規(guī)定?!龉_口保密(年)作者簽名:—疊豇j嶂簽字日期:蘭!!上!l!!上導(dǎo)師簽名:簽字Et期:摘要本論文分為兩部分研究?jī)?nèi)容,在非洲爪蟾中

5、我們建立了在位研究樹突棘的新模型,在成年斑馬魚中我們構(gòu)建了追蹤眼動(dòng)和視動(dòng)行為的方法。第一部分,樹突棘在中樞系統(tǒng)的發(fā)育過程中經(jīng)歷著連續(xù)的重塑過程。其穩(wěn)定性對(duì)于保持神經(jīng)環(huán)路的功能具有重要的意義。在NgL動(dòng)物模型中,皮層興奮性的椎體神經(jīng)元樹突棘的穩(wěn)定性和動(dòng)態(tài)特性已經(jīng)有累積大量的研究成果,然而在非哺乳類的動(dòng)物模型中,多棘神經(jīng)元卻知之甚少。本文利用單細(xì)胞電穿孔技術(shù)在非洲爪蟾蝌蚪腦內(nèi)標(biāo)記和觀察多棘神經(jīng)元,并且觀察到多棘神經(jīng)元廣泛分布于嗅球和端腦。在蝌蚪的嗅球內(nèi)使用DsRed,PSD.95一GFP標(biāo)記中間神經(jīng)元

6、,確定了樹突棘的形態(tài)和類型(filopodia,thin,mushroom和stubby)。通過在位活體的時(shí)間序列我們看到,這種神經(jīng)元樹突棘呈現(xiàn)出高度的動(dòng)態(tài)變化,特別是filopodia和thinspine,而stubby和mushroom更加穩(wěn)定,但也隨觀察時(shí)間的增長(zhǎng)而降低。4種樹突棘相互轉(zhuǎn)化,但轉(zhuǎn)化的偏好不一樣。通過嗅神經(jīng)切斷的感覺輸入剝奪并沒有明顯影響該類神經(jīng)元樹突棘的穩(wěn)定性。該部分在非洲爪蟾這一經(jīng)典的模型中建立了新的研究樹突棘的模型。第二部分,眼動(dòng)(OptokineticResponse,

7、OKR)和視動(dòng)(OptomoterResponse,0MR)行為學(xué)是動(dòng)物視功能檢測(cè)和視覺相關(guān)突變體的篩選很有用的行為學(xué)方法,由于這種行為簡(jiǎn)單、刻板直觀而被廣泛用于幼年斑馬魚研究中,但在成年斑馬魚中這種行為學(xué)的分析方法報(bào)道較少。該部分介紹成年斑馬魚眼動(dòng)反應(yīng)和視動(dòng)反應(yīng)的誘導(dǎo)方式,以及使用模板匹配(PatternMatch)的方法程序跟蹤眼部運(yùn)動(dòng),使用背景去除的辦法追蹤成年斑馬魚的運(yùn)動(dòng)軌跡,實(shí)現(xiàn)了成年斑馬魚OKR和OMR的定量分析。使用OKR分析,檢測(cè)到斑馬魚雙眼的公共視覺區(qū)對(duì)OKR行為的產(chǎn)生有一定的貢

8、獻(xiàn)作用,并且成年斑馬魚單眼對(duì)運(yùn)動(dòng)光柵表現(xiàn)出一定的方向敏感性。使用OMR可以用于評(píng)估視覺恢復(fù)過程中成魚的視覺功能。成年斑馬魚OKR的分析方法同樣也可適用于幼年斑馬魚。此外,利用本方法初步檢測(cè)到鐘基因periodlb突變體與正常魚之間的視覺差異。關(guān)鍵詞:非洲爪蟾蝌蚪中間神經(jīng)元顆粒細(xì)胞嗅球共聚焦成像樹突棘成年斑馬魚模板匹配行為學(xué)視動(dòng)反應(yīng)眼動(dòng)反應(yīng)摘要AbstractAbstractThisthesiscontainstwoparts.AnewmodelwasestablishedinXenopustadp

9、olestoexploredendriticspinedynamicsinvivo,andthequantitativemeasurementsoftheadultzebrafishOptokineticresponse(OKR)andtheOptomotorresponse(OMR)weresuccessfullysetuptostudyvisualbehavior.Inthefirstpart:Dendriticspinesundergocontinuousremodeling

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