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1、中圈紳謄艘求大謄博士學(xué)位論文非洲爪蟾嗅球中間神經(jīng)元樹(shù)突棘的活體成像作者姓名：黃玉斌學(xué)科專(zhuān)業(yè)：神經(jīng)生物學(xué)導(dǎo)師姓名：胡兵教授完成時(shí)間：二O一五年十月UniversityofScienceandTechnologyofChinaADissertationforDoctor，SDegree
2、nvivostudyofdynamicsandstabilityofdendriticspinesonolfactorybulbinterneuronsinXenopuslaevistadpolesAuthor’SNa
3、me：YubinHuangSpeciality：NeurobiologySupervisor：Prof．BingHuFinishedtime：October,2015中國(guó)科學(xué)技術(shù)大學(xué)學(xué)位論文原創(chuàng)性聲明本人聲明所呈交的學(xué)位論文，是本人在導(dǎo)師指導(dǎo)下進(jìn)行研究工作所取得的成果。除已特別加以標(biāo)注和致謝的地方外，論文中不包含任何他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫(xiě)過(guò)的研究成果。與我一同工作的同志對(duì)本研究所做的貢獻(xiàn)均已在論文中作了明確的說(shuō)明。作者簽名：』瞅簽字日期：—盈且厶且乒—～中國(guó)科學(xué)技術(shù)大學(xué)學(xué)位論文授權(quán)使用聲明作為申請(qǐng)學(xué)位
4、的條件之一，學(xué)位論文著作權(quán)擁有者授權(quán)中國(guó)科學(xué)技術(shù)大學(xué)擁有學(xué)位論文的部分使用權(quán)，即：學(xué)校有權(quán)按有關(guān)規(guī)定向國(guó)家有關(guān)部門(mén)或機(jī)構(gòu)送交論文的復(fù)印件和電子版，允許論文被查閱和借閱，可以將學(xué)位論文編入《中國(guó)學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù)》等有關(guān)數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行檢索，可以采用影印、縮印或掃描等復(fù)制手段保存、匯編學(xué)位論文。本人提交的電子文檔的內(nèi)容和紙質(zhì)論文的內(nèi)容相一致。保密的學(xué)位論文在解密后也遵守此規(guī)定?！龉_(kāi)口保密(年)作者簽名：—疊豇j嶂簽字日期：蘭!!上!l!!上導(dǎo)師簽名：簽字Et期：摘要本論文分為兩部分研究?jī)?nèi)容，在非洲爪蟾中
5、我們建立了在位研究樹(shù)突棘的新模型，在成年斑馬魚(yú)中我們構(gòu)建了追蹤眼動(dòng)和視動(dòng)行為的方法。第一部分，樹(shù)突棘在中樞系統(tǒng)的發(fā)育過(guò)程中經(jīng)歷著連續(xù)的重塑過(guò)程。其穩(wěn)定性對(duì)于保持神經(jīng)環(huán)路的功能具有重要的意義。在NgL動(dòng)物模型中，皮層興奮性的椎體神經(jīng)元樹(shù)突棘的穩(wěn)定性和動(dòng)態(tài)特性已經(jīng)有累積大量的研究成果，然而在非哺乳類(lèi)的動(dòng)物模型中，多棘神經(jīng)元卻知之甚少。本文利用單細(xì)胞電穿孔技術(shù)在非洲爪蟾蝌蚪腦內(nèi)標(biāo)記和觀察多棘神經(jīng)元，并且觀察到多棘神經(jīng)元廣泛分布于嗅球和端腦。在蝌蚪的嗅球內(nèi)使用DsRed，PSD．95一GFP標(biāo)記中間神經(jīng)元
6、，確定了樹(shù)突棘的形態(tài)和類(lèi)型(filopodia，thin，mushroom和stubby)。通過(guò)在位活體的時(shí)間序列我們看到，這種神經(jīng)元樹(shù)突棘呈現(xiàn)出高度的動(dòng)態(tài)變化，特別是filopodia和thinspine，而stubby和mushroom更加穩(wěn)定，但也隨觀察時(shí)間的增長(zhǎng)而降低。4種樹(shù)突棘相互轉(zhuǎn)化，但轉(zhuǎn)化的偏好不一樣。通過(guò)嗅神經(jīng)切斷的感覺(jué)輸入剝奪并沒(méi)有明顯影響該類(lèi)神經(jīng)元樹(shù)突棘的穩(wěn)定性。該部分在非洲爪蟾這一經(jīng)典的模型中建立了新的研究樹(shù)突棘的模型。第二部分，眼動(dòng)(OptokineticResponse，
7、OKR)和視動(dòng)(OptomoterResponse，0MR)行為學(xué)是動(dòng)物視功能檢測(cè)和視覺(jué)相關(guān)突變體的篩選很有用的行為學(xué)方法，由于這種行為簡(jiǎn)單、刻板直觀而被廣泛用于幼年斑馬魚(yú)研究中，但在成年斑馬魚(yú)中這種行為學(xué)的分析方法報(bào)道較少。該部分介紹成年斑馬魚(yú)眼動(dòng)反應(yīng)和視動(dòng)反應(yīng)的誘導(dǎo)方式，以及使用模板匹配(PatternMatch)的方法程序跟蹤眼部運(yùn)動(dòng)，使用背景去除的辦法追蹤成年斑馬魚(yú)的運(yùn)動(dòng)軌跡，實(shí)現(xiàn)了成年斑馬魚(yú)OKR和OMR的定量分析。使用OKR分析，檢測(cè)到斑馬魚(yú)雙眼的公共視覺(jué)區(qū)對(duì)OKR行為的產(chǎn)生有一定的貢
8、獻(xiàn)作用，并且成年斑馬魚(yú)單眼對(duì)運(yùn)動(dòng)光柵表現(xiàn)出一定的方向敏感性。使用OMR可以用于評(píng)估視覺(jué)恢復(fù)過(guò)程中成魚(yú)的視覺(jué)功能。成年斑馬魚(yú)OKR的分析方法同樣也可適用于幼年斑馬魚(yú)。此外，利用本方法初步檢測(cè)到鐘基因periodlb突變體與正常魚(yú)之間的視覺(jué)差異。關(guān)鍵詞：非洲爪蟾蝌蚪中間神經(jīng)元顆粒細(xì)胞嗅球共聚焦成像樹(shù)突棘成年斑馬魚(yú)模板匹配行為學(xué)視動(dòng)反應(yīng)眼動(dòng)反應(yīng)摘要AbstractAbstractThisthesiscontainstwoparts．AnewmodelwasestablishedinXenopustadp
9、olestoexploredendriticspinedynamicsinvivo，andthequantitativemeasurementsoftheadultzebrafishOptokineticresponse(OKR)andtheOptomotorresponse(OMR)weresuccessfullysetuptostudyvisualbehavior．Inthefirstpart：Dendriticspinesundergocontinuousremodeling
