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《精原干細(xì)胞動態(tài)標(biāo)記物的初步篩選》由會員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫。
1、寧夏醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文摘要分類號：R3單位代碼：10752密級：公開學(xué)號：201200209寧夏醫(yī)科大學(xué)碩士研究生學(xué)位論文精原干細(xì)胞動態(tài)標(biāo)記物的初步篩選Screeningofdevelopmentalmarkersinspermatagonialstemcells學(xué)位申請人：田稼指導(dǎo)教師：馬良宏申請學(xué)位類別：醫(yī)學(xué)專業(yè)領(lǐng)域名稱：外科學(xué)研究方向：精原干細(xì)胞的應(yīng)用基礎(chǔ)研究所在學(xué)院：臨床醫(yī)學(xué)院論文完成日期：二〇一五年三月寧夏醫(yī)科大學(xué)研究生院I寧夏醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文摘要NingxiaMedicalUniversityThesisforApplicationof
2、Master’sDegreeScreeningofdevelopmentalmarkersinspermatagonialstemcellsStudent’sName:TianjiaSupervisor：MalianghongSubjectCategory:MedicalScienceMajor:SurgerySpecialty:UrinarysurgerySchool:ClinicalMedicineSchoolCompletionDate:Mar.2015II寧夏醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文摘要精原干細(xì)胞動態(tài)標(biāo)記物的初步篩選III寧夏醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文摘要
3、摘要精原干細(xì)胞移植對男性不育的治療具有潛在的臨床應(yīng)用價值，尤其對青春期前接受大劑量化療致生精功能嚴(yán)重受損的非梗阻性無精子癥患者，具有獨(dú)特的臨床應(yīng)用價值。只要在非梗阻性無精子癥患者睪丸內(nèi)找到精原干細(xì)胞，就有可能促使其增殖分化獲得精子；或通過特異性標(biāo)志物分選，體外獲得純度較高的精原干細(xì)胞用于增殖培養(yǎng)或移植。然而，如何確定所獲得細(xì)胞是精原干細(xì)胞，成為此項(xiàng)工作的首要條件。精原干細(xì)胞在增殖和分化的過程中細(xì)胞表面和細(xì)胞內(nèi)會表達(dá)許多蛋白質(zhì)，這些蛋白質(zhì)如果有較好的特異性和敏感性，作為精原干細(xì)胞標(biāo)志物，將對分離及鑒定精原干細(xì)胞發(fā)揮重要作用。我們將不同年齡階段小鼠精原干細(xì)胞
4、采用復(fù)合酶消化、免疫磁珠分選技術(shù)分離純化出后，通過雙向凝膠電泳及蛋白質(zhì)質(zhì)譜分析技術(shù)動態(tài)觀測各年齡階段精原干細(xì)胞蛋白質(zhì)表達(dá)的差異，運(yùn)用生物信息學(xué)蛋白質(zhì)組數(shù)據(jù)庫篩選并確定差異性蛋白質(zhì)或發(fā)現(xiàn)新的蛋白質(zhì)。目的：利用iTRAQ蛋白質(zhì)質(zhì)譜分析技術(shù)觀測各年齡階段精原干細(xì)胞（SSCs）蛋白的表達(dá)，進(jìn)一步分析SSCs標(biāo)志物表達(dá)的動態(tài)變化，運(yùn)用生物信息學(xué)蛋白質(zhì)組數(shù)據(jù)庫篩選并發(fā)現(xiàn)新的標(biāo)志物。方法：以健康雄性C57BL/6小鼠為研究對象，按照年齡段不同分為8組，無菌提取各組小鼠睪丸組織，采用復(fù)合酶消化、免疫磁珠分選的方法純化SSCs后提取蛋白，利用雙向電泳及iTRAQ標(biāo)記蛋白質(zhì)
5、質(zhì)譜分析技術(shù)并結(jié)合蛋白質(zhì)數(shù)據(jù)庫對各組蛋白質(zhì)進(jìn)行分析鑒定。結(jié)果：質(zhì)譜實(shí)驗(yàn)共得到譜圖248510張，通過Mascot軟件進(jìn)行分析，共鑒定到1132種蛋白。以蛋白豐度差異倍數(shù)達(dá)到1.2倍以上，且經(jīng)統(tǒng)計學(xué)檢驗(yàn)P?0.05視為存在差異性蛋白,8組共檢測到差異蛋白298種。鑒定到目前已知的SSCs標(biāo)志物9種（PCNA、GFRA1、CDH1、AnnexinA7、UCHL1、VASA、CD49f、CD29、PLZf），通過各組對比獲得在不同年齡段內(nèi)表達(dá)變化趨勢，其中GFRA1、CD49f、CD29在SSCs中的變化IV寧夏醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文摘要趨勢與以往文獻(xiàn)一致，并篩
6、選出10種蛋白質(zhì)（P63、CD71、CD98、K19、ACE、K18、K15、K17、SH2、SH3）作為SSCs標(biāo)志物進(jìn)一步研究的對象。結(jié)論：SSCs內(nèi)的蛋白隨著機(jī)體年齡的變化表達(dá)存在差異，iTRAQ蛋白質(zhì)質(zhì)譜分析技術(shù)可以對SSCs蛋白質(zhì)組學(xué)信息進(jìn)行分析與比較，獲得各年齡階段差異性表達(dá)蛋白，為進(jìn)一步分析和研究這些差異性蛋白的功能與作用提供了新的方法。關(guān)鍵詞：精原干細(xì)胞，蛋白質(zhì)組學(xué)，生物標(biāo)記物，同位素標(biāo)記相對和絕對定量技術(shù)ScreeningofdevelopmentalmarkersinspermatagonialstemV寧夏醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文摘要c
7、ellsAbstractSpermatogonialstemcellstransplantationhasapotentialclinicalvalueforthetreatmentofmaleinfertility.Especiallyforthosenon-obstructiveazoospermiapatientswithseverelyimpairedspermatogenesis,whichiscausedbyreceivinghigh-doseofchemotherapybeforepuberty,thistechniqueisassocia
8、tedwithauniqueclinicalvalue.Itispossible
