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《大田試驗轉(zhuǎn)基因楊樹無性系的抗蟲性研究》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫。
1、摘要楊樹是重要的速生材樹種之一，采用基因工程技術(shù)開展轉(zhuǎn)基因楊樹的研究是培育抗逆、抗蟲和抗病楊樹新品種的有效途徑。本研究以美洲黑楊×小葉楊(Pop“，搬出肋f鼢XP印“螂Jf玳oHfj)的優(yōu)良無性系NL．80106和新疆楊(聊“，姍扔口v甜口)，眥聊j幽凰)的轉(zhuǎn)抗蟲基因(Bt和cpTI)的無性系為材料，其中NL．80106定植時間為三年，新疆楊(PDp”，淞口z蚰陽rp∥盯m耐矗船)定植時間為一年，進行了一系列的分子檢測及抗蟲性測定。PCR分子檢測結(jié)果表明轉(zhuǎn)Bt單基因106楊樹和轉(zhuǎn)CpTI基因新疆楊，擴增出了與質(zhì)粒大小一致的條帶，表明其外源基因仍穩(wěn)定存在于基因組中，但轉(zhuǎn)CpTI基因106楊
2、樹的PcR沒有擴增出與質(zhì)粒一致的條帶，其原因有待進～步研究。ELIsA分析表明，所檢測的轉(zhuǎn)基因106楊樹無性系中Bt毒蛋白表達存在著差異，其中轉(zhuǎn)基因植株D18、FB51、FB56葉片中殺蟲蛋白含量超過6700ng幢鮮葉，約分別占植物葉片可溶性總蛋白的O．090％、O．036％、O．034％。中等以下的抗性轉(zhuǎn)基因楊樹無性系的表達含量為318_4950n∥g鮮葉。部分轉(zhuǎn)基因植株的殺蟲實驗表明，轉(zhuǎn)Bt基因106楊樹對楊小舟蛾的化蛹前幼蟲的生長有明顯的抑制作用，但對化蛹后的幼蟲生長及其蛹重的影響不大。本研究證實轉(zhuǎn)Bt基因抗蟲楊樹無性系大田移植植株在室內(nèi)控制和自然條件下對楊小舟蛾具有顯著的抗蟲效果
3、，對1齡幼蟲12d的校正死亡率高達89．2％。幼蟲的死亡高峰為飼養(yǎng)第6～12d，以8d的定期死亡率為最高。不同齡期的楊小舟蛾幼蟲對Bt楊的敏感性不同，隨著蟲齡的增大，敏感性顯著減弱。．另外Bt楊樹對楊小舟蛾的抗蟲性存在著明顯的時間動態(tài)，六月較高56，9‰82．4％下降至7～8月的35．6％q5．1％，九月抗性又回升至74．1％一89．2％。通過對實驗結(jié)束時所有不能化蛹的幼蟲進行分析，結(jié)果表明用轉(zhuǎn)基因無性系葉片處理8d后，幼蟲的取食量、體重增長速率與對照存在極顯著的差異。本研究經(jīng)分子和生物測定，結(jié)果一致，達含量也高，說明兩種方法可以相互代替，抗蟲性較高的無性系其Bt毒蛋白表取長補短。關(guān)鍵詞
4、轉(zhuǎn)基因楊樹；抗蟲性；蘇云金芽孢桿菌毒蛋白(Bt)基因；豇豆胰蛋白酶抑制劑(cpTI)基因INSECT．RESIs．L悄TRESEARCHOFGENETRANSFoRMATIoNoNPoPLARCLoNESINTHEFIELDAbs仃actPoplarisoneof也eimportantfbreSttreesfort證lber“mfI嬲tgrowm．Thercsearchofgene咖sfo咖ationonpoplarbygcneenginceringtecIlIliqueisae雎c廿Vewayformeseleccionofnewspeciesofpoplar、ⅣithiIlsect．
5、resistam，disease·resist觚t趾dsoon．SeveralmolecuIe鋤dinsect-resis協(xié)ntresearchwerestIldieson(P印“船如加f拙x．P印“沁曲”D"神NL80106withlaIldforthreeyears卸dP印謝甜口，6口v鼎凹，，口刪幽腦withJandforOneyeanPCR鯽alySisoftraIlsgenicpoplarsprovedthatBtgenesexiststeadilyinalltr甜sgenicplan怙．ButPcRarIaIysisoft啪sgensisoncpTIgeneiswr0噸ins
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