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《大田試驗(yàn)轉(zhuǎn)基因楊樹(shù)無(wú)性系的抗蟲(chóng)性研究》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫(kù)。
1、摘要楊樹(shù)是重要的速生材樹(shù)種之一，采用基因工程技術(shù)開(kāi)展轉(zhuǎn)基因楊樹(shù)的研究是培育抗逆、抗蟲(chóng)和抗病楊樹(shù)新品種的有效途徑。本研究以美洲黑楊×小葉楊(Pop“，搬出肋f鼢XP印“螂Jf玳oHfj)的優(yōu)良無(wú)性系NL．80106和新疆楊(聊“，姍扔口v甜口)，眥聊j幽凰)的轉(zhuǎn)抗蟲(chóng)基因(Bt和cpTI)的無(wú)性系為材料，其中NL．80106定植時(shí)間為三年，新疆楊(PDp”，淞口z蚰陽(yáng)rp∥盯m耐矗船)定植時(shí)間為一年，進(jìn)行了一系列的分子檢測(cè)及抗蟲(chóng)性測(cè)定。PCR分子檢測(cè)結(jié)果表明轉(zhuǎn)Bt單基因106楊樹(shù)和轉(zhuǎn)CpTI基因新疆楊，擴(kuò)增出了與質(zhì)粒大小一致的條帶，表明其外源基因仍穩(wěn)定存在于基因組中，但轉(zhuǎn)CpTI基因106楊
2、樹(shù)的PcR沒(méi)有擴(kuò)增出與質(zhì)粒一致的條帶，其原因有待進(jìn)～步研究。ELIsA分析表明，所檢測(cè)的轉(zhuǎn)基因106楊樹(shù)無(wú)性系中Bt毒蛋白表達(dá)存在著差異，其中轉(zhuǎn)基因植株D18、FB51、FB56葉片中殺蟲(chóng)蛋白含量超過(guò)6700ng幢鮮葉，約分別占植物葉片可溶性總蛋白的O．090％、O．036％、O．034％。中等以下的抗性轉(zhuǎn)基因楊樹(shù)無(wú)性系的表達(dá)含量為318_4950n∥g鮮葉。部分轉(zhuǎn)基因植株的殺蟲(chóng)實(shí)驗(yàn)表明，轉(zhuǎn)Bt基因106楊樹(shù)對(duì)楊小舟蛾的化蛹前幼蟲(chóng)的生長(zhǎng)有明顯的抑制作用，但對(duì)化蛹后的幼蟲(chóng)生長(zhǎng)及其蛹重的影響不大。本研究證實(shí)轉(zhuǎn)Bt基因抗蟲(chóng)楊樹(shù)無(wú)性系大田移植植株在室內(nèi)控制和自然條件下對(duì)楊小舟蛾具有顯著的抗蟲(chóng)效果
3、，對(duì)1齡幼蟲(chóng)12d的校正死亡率高達(dá)89．2％。幼蟲(chóng)的死亡高峰為飼養(yǎng)第6～12d，以8d的定期死亡率為最高。不同齡期的楊小舟蛾幼蟲(chóng)對(duì)Bt楊的敏感性不同，隨著蟲(chóng)齡的增大，敏感性顯著減弱。．另外Bt楊樹(shù)對(duì)楊小舟蛾的抗蟲(chóng)性存在著明顯的時(shí)間動(dòng)態(tài)，六月較高56，9‰82．4％下降至7～8月的35．6％q5．1％，九月抗性又回升至74．1％一89．2％。通過(guò)對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)所有不能化蛹的幼蟲(chóng)進(jìn)行分析，結(jié)果表明用轉(zhuǎn)基因無(wú)性系葉片處理8d后，幼蟲(chóng)的取食量、體重增長(zhǎng)速率與對(duì)照存在極顯著的差異。本研究經(jīng)分子和生物測(cè)定，結(jié)果一致，達(dá)含量也高，說(shuō)明兩種方法可以相互代替，抗蟲(chóng)性較高的無(wú)性系其Bt毒蛋白表取長(zhǎng)補(bǔ)短。關(guān)鍵詞
4、轉(zhuǎn)基因楊樹(shù)；抗蟲(chóng)性；蘇云金芽孢桿菌毒蛋白(Bt)基因；豇豆胰蛋白酶抑制劑(cpTI)基因INSECT．RESIs．L悄TRESEARCHOFGENETRANSFoRMATIoNoNPoPLARCLoNESINTHEFIELDAbs仃actPoplarisoneof也eimportantfbreSttreesfort證lber“mfI嬲tgrowm．Thercsearchofgene咖sfo咖ationonpoplarbygcneenginceringtecIlIliqueisae雎c廿Vewayformeseleccionofnewspeciesofpoplar、ⅣithiIlsect．
5、resistam，disease·resist觚t趾dsoon．SeveralmolecuIe鋤dinsect-resis協(xié)ntresearchwerestIldieson(P印“船如加f拙x．P印“沁曲”D"神NL80106withlaIldforthreeyears卸dP印謝甜口，6口v鼎凹，，口刪幽腦withJandforOneyeanPCR鯽alySisoftraIlsgenicpoplarsprovedthatBtgenesexiststeadilyinalltr甜sgenicplan怙．ButPcRarIaIysisoft啪sgensisoncpTIgeneiswr0噸ins
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