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1、碩士學位論文猴頭菇抗氧化活性成分的分離純化及結構鑒定研究作者姓名黃越學科專業(yè)食品科學與工程指導教師黃惠華教授所在學院食品科學與工程學院論文提交日期2018年4月19日StudyontheIsolation,PurificationandStructureIdentificationofAntioxidantConstituentsinHericiumerinaceusADissertationSubmittedfortheDegreeofMasterCandidate：HuangYueSupervisor：Prof.HuangHuihuaSouthCh
2、inaUniversityofTechnologyGuangzhou,China分類號：TS201.1學校代號：10561學號：201520120524華南理工大學碩士學位論文猴頭菇抗氧化活性成分的分離純化及結構鑒定研究（罐組式“動態(tài)逆流集成超聲波”技術研究及猴頭菇多糖提取示范、2013B090600008；猴頭菇多糖提取物對動物胃黏膜細胞的保護及抗過敏、調(diào)節(jié)機體免疫等功能活性的研究）作者姓名：黃越指導教師姓名、職稱：黃惠華教授申請學位級別：工學碩士學科專業(yè)名稱：食品科學與工程研究方向：食品科學論文提交日期：2018年4月19日論文答辯日期：2018年
3、6月3日學位授予單位：華南理工大學學位授予日期：年月日答辯委員會成員：主席：歐仕益教授委員：李斌教授；趙強忠教授；唐傳核教授；黃惠華教授摘要猴頭菇屬擔子菌綱、多孔菌目、齒菌科、猴頭屬，關于其抗氧化研究大多集中在猴頭菇多糖上。本課題以猴頭菇子實體為原料，優(yōu)化乙醇提取抗氧化活性成分工藝，對所得醇提物的不同極性萃取相進行抗氧化活性成分篩選，選擇乙酸乙酯萃取相經(jīng)硅膠柱層析和半制備液相色譜法進行進一步分離純化，將純化得到的單體化合物進行結構表征與鑒定。研究所得結論如下：（1）通過單因素和正交實驗得到乙醇提取猴頭菇抗氧化活性成分的最佳提取工藝：乙醇濃度50%，料液
4、比1:15g/mL，提取溫度50°C，提取時間5h，提取次數(shù)2次。按最優(yōu)提取工藝得到的猴頭菇醇提物具有較好的ABTS+·清除率以及良好的DPPH·、·OH清除率和還原能力，對DPPH·、ABTS+·的清除率分別可達到56.85%（5mg/mL）、79.85%（0.5mg/mL）。（2）將猴頭菇醇提物采用不同極性有機溶劑萃取后得到石油醚相、乙酸乙酯相、正丁醇相和剩余水相，其得率分別為3.23%、2.55%、7.99%和42.25%。其中乙酸乙酯相的總酚以及總黃酮含量最高，分別為16.52mg/g和10.08mg/g。猴頭菇醇提物的不同極性萃取相均表現(xiàn)出一
5、定的抗氧化活性，在相同濃度下，乙酸乙酯相的整體抗氧化活性相對較高，其對DPPH·、·OH和ABTS+·的清除率分別可達到41.64%（2.5mg/mL）、82.84%（2.5mg/mL）和89.18%（0.5mg/mL），但對·OH的清除率稍低于石油醚相的96.85%（2.5mg/mL）。綜合分析，篩選出猴頭菇醇提物的乙酸乙酯萃取相進行后續(xù)分離單體化合物研究。（3）采用薄層色譜法和硅膠柱層析對猴頭菇醇提物的乙酸乙酯萃取相進行粗分離，得到10個組分C1-C10，其DPPH·、ABTS+·清除能力測定結果表明，極性較大的組分表現(xiàn)出更高的DPPH·、ABTS
6、+·清除率，最高分別可達到50.12%（2.0mg/mL）和81.84%（100μg/mL），可考慮進行進一步分離純化。（4）采用薄層色譜法、硅膠柱層析、半制備型HPLC和重結晶法從組分C1-C10中分離純化得到5個單體化合物，經(jīng)紅外光譜、質(zhì)譜、核磁共振分析確定其化學結構，分別為：油酸（Oleicacid，化合物H1）、HericenoneI（化合物H2）、正二十九烷（n-Nonacosane，化合物H3）、尿苷（Uridine，化合物H4）、HericenoneJ（化合物IH5），其中HericenoneI與HericenoneJ為猴頭菇子實體的次生
7、代謝產(chǎn)物，屬于異苯并呋喃酮衍生物。關鍵詞：猴頭菇；抗氧化成分；抗氧化活性；分離純化；結構鑒定IIAbstractHericiumerinaceusbelongstoBasidiomycetes,Polyporales,Hydnaceae,Hericium.TherehavebeenalotofstudiesontheantioxidantsofHericiumerinaceus,mostofwhichfocusedonpolysaccharidesinHericiumerinaceus.Inthisstudy,ethanolextractionmeth
8、odwasoptimizedtoextractantioxidantsfromHericium
