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《豬胸膜肺炎放線桿菌的分離與鑒定》由會員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在行業(yè)資料-天天文庫。
1、實(shí)驗(yàn)研究豬胸膜肺炎放線桿菌的分離與鑒定邵洪澤，蘇雙，李萌，任銳（吉林省獸醫(yī)科學(xué)研究所，吉林長春130062）【摘要】吉林省某規(guī)?；B(yǎng)豬場送檢疑似豬傳染性胸膜肺炎的死豬病料，采用不同培養(yǎng)基進(jìn)行病原菌分離，結(jié)果分離出3株疑似胸膜肺炎放線桿菌。通過對分離菌進(jìn)行鏡檢、培養(yǎng)特性試驗(yàn)、生化特性試驗(yàn)、PCR鑒定，確定為3株均為胸膜肺炎放線桿菌，致病性試驗(yàn)結(jié)果表明，分離的胸膜肺炎放線桿菌具有強(qiáng)致病性?！娟P(guān)鍵詞】胸膜肺炎放線桿菌；分離；鑒定【中圖分類號】S852.61+9【文獻(xiàn)標(biāo)識碼】A【文章編號】1672－2078（2006）04－0
2、009－03TheIsolationandIdentificationofActinobacillusPleuropneumoniaeSHAOHong-ze，SUShuang，LIMeng，RENRui(VeterinaryresearchinstituteofJilinProvince,Changchun,Jilin130062)【Abstract】TissuesamplesfromonehoggeryinJilinProvince,weredetectedforporcinecontagiouspleuropneu
3、moria.Dif-ferentmediumwereusedtoseparatepathogenicbacteria,threestrainsAPPsuspectedwereseparatedfromthetissuesam-ples.Accordingtoetiologicalmorphologyobservation,culturecharacteristic,biochemicalcharacteristicandPCR,thethreestrainswereallActinobacillusPleuropneu
4、moniae.Theresultsofpathogenicitytestindicated,thethreeseparatedAPPsho-wedhighpathogenicity.【Keywords】ActinobacillusPleuropneumoniae,；Isolation,；Identification豬傳染性胸膜肺炎（PorcinecontagiousPleurop-瓊脂培養(yǎng)基、綿羊血瓊脂培養(yǎng)基、含V因子的綿羊neumoria，PCP）是由胸膜肺炎放線桿菌（血瓊脂培養(yǎng)基、含V因子的胰蛋白大豆瓊脂培養(yǎng)，AP
5、P）引起的豬的一種高度傳基（改良TSA培養(yǎng)基）及部分生化培養(yǎng)基。染性的呼吸系統(tǒng)疾病。本病呈世界性分布，為國際1.2病料來源[1]上公認(rèn)的危害養(yǎng)豬業(yè)最嚴(yán)重的疫病之一。本病以來自吉林省某豬場送檢3頭份疑似PCP病死急性出血和慢性纖維素性胸膜肺炎為特征，具有較豬的肺臟、肝臟、脾臟病變組織。高的發(fā)病率和致死率。該病多呈急性爆發(fā)導(dǎo)致病豬死亡，致死率高達(dá)80%～100%，一旦發(fā)展成為慢1.3金黃色葡萄球菌標(biāo)準(zhǔn)菌株性型，則導(dǎo)致病豬生長緩慢，抵抗力下降，飼料利用購自中國獸藥監(jiān)察所。[2]率降低，養(yǎng)殖成本增加。楊旭夫（1990）首次報(bào)道
6、1.4參考陽性菌株本病在我國的的發(fā)生并分離到病原菌，近年來，隨著我國養(yǎng)豬業(yè)規(guī)?；?、集約化的發(fā)展，有關(guān)本病發(fā)本研究室保存血清4型APP。[3-11]生的報(bào)道也隨之增多。研究表明豬傳染性胸膜1.5PCR引物合成肺炎在我國的流行不僅呈上升趨勢，而且所造成的根據(jù)已發(fā)表的APXⅣA基因序列，參照國內(nèi)經(jīng)濟(jì)損失也越加嚴(yán)重。2004年11月，我們采集吉[12,13]外的文獻(xiàn)報(bào)道合成引物，序列為：林省某豬場疑似PCP病死豬的病料，進(jìn)行病原菌上游引物P1：5'tggcactgacggtgatga3'的分離與鑒定。下游引物P2：5'ggcc
7、atcgactcaaccat3'1材料由寶生物工程公司合成。1.1培養(yǎng)基1.6酶類及相關(guān)試劑普通瓊脂培養(yǎng)基、麥康凱瓊脂培養(yǎng)基、巧克力dNTP，10×Buffer，TaqDNAPolymerase，10×LoadingBuffer，100bpDNALadderMarker，均購自寶生物生物工程有限公司（TaKaRa）。電泳緩沖液TAE、0.8%瓊脂糖凝膠。收稿日期：2006－02－28吉林畜牧獸醫(yī)◢2006.04電話/0431-7989877/7989866/79897669實(shí)驗(yàn)研究1.7試驗(yàn)動物陰性的小球桿菌，培養(yǎng)72
8、h后形成少量彎曲的長絲健康小白鼠，購自長春市衛(wèi)生部生物制品研究所。狀多形性菌體。2方法3.3生長特性該菌在含V因子的綿羊鮮血瓊脂培養(yǎng)基上產(chǎn)2.1病原菌的分離培養(yǎng)生狹窄的溶血環(huán)；CAMP試驗(yàn)呈陽性，在葡萄球菌無菌采取疑似PCP肺臟、肝臟、脾臟等病變組接種線邊緣見針尖大小、圓形半透明灰白色小菌織，接種于普通瓊脂培養(yǎng)基、麥康凱瓊脂培養(yǎng)基
