油橄欖葉中總黃酮含量測定方法探討

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1、第31卷,第2期光譜學(xué)與光譜分析Vol.31,No.2,pp547-5502011年2月SpectroscopyandSpectralAnalysisFebruary,2011油橄欖葉中總黃酮含量測定方法探討鄭媛媛1,2,李辰2,3,封士蘭1,黃新異2,劉永峰2,4,陳小芬2,4,邸多?。?,2*1.蘭州大學(xué)藥學(xué)院,甘肅蘭州7300002.中國科學(xué)院蘭州化學(xué)物理研究所,中國科學(xué)院西北特色植物資源化學(xué)重點(diǎn)實驗室和甘肅省天然藥物重點(diǎn)實驗室,甘肅蘭州7300003.五邑大學(xué)應(yīng)用物理與材料學(xué)院分析測試中心,廣東江門5290204.中國

2、科學(xué)院研究生院,北京100049摘要建立以蘆丁為對照品的油橄欖葉中總黃酮含量的測定方法。采用Al(NO3)3-NaNO2-NaOH和AlCl3兩種顯色法測定油橄欖葉中總黃酮的含量,并分別考察了兩種方法對測定結(jié)果的影響。結(jié)果表明,AlCl3顯色法適宜于油橄欖葉總黃酮的含量測定。該法操作簡便,線性關(guān)系良好,準(zhǔn)確度、重復(fù)性和穩(wěn)定性較好,可用于油橄欖葉總黃酮含量測定,并為中藥和天然產(chǎn)物中總黃酮的含量測定提供參考。關(guān)鍵詞油橄欖葉;總黃酮;紫外-可見分光光度法;AlCl3顯色法中圖分類號:O657.3文獻(xiàn)標(biāo)識碼:ADOI:10.3964

3、/j.issn.1000-0593(2011)02-0547-04[9]。薄層色譜掃量時,該方法需要較多的黃酮化合物對照品引言描法和超臨界流體色譜法存在靈敏度低,重現(xiàn)性差的缺點(diǎn),也需要較多的黃酮化合物對照品。紫外分光光度法是測定天油橄欖(OleaeuropareL.)為木犀科(Oleaceae)木樨欖屬然產(chǎn)物中總黃酮最常用的方法之一,具有儀器廉價、操作簡(Olea)植物,主要分布在歐洲地中海沿岸國家和美國加州地便,檢測成本低等優(yōu)點(diǎn),不需要總黃酮中各黃酮化合物對照區(qū)。自60年代起,油橄欖開始在我國引種,甘肅隴南市是我品,在分析

4、工作中無需對總黃酮中各黃酮化合物同時定性定[1,2]?,F(xiàn)代藥理學(xué)研究表明,國油橄欖最大的種植基地之一量,因此得到廣泛應(yīng)用。但由于中藥和天然藥物提取物成分油橄欖葉提取物具有抗氧化、抗真菌、降血壓、降血脂等活復(fù)雜,在應(yīng)用紫外分光光度法測定含量時很難避免基質(zhì)對測[3,4]。油橄欖葉中的化學(xué)成分包括裂環(huán)烯醚萜類、黃酮類、性定結(jié)果的干擾。本文針對油橄欖葉中的總黃酮,選用紫外分游離醇、甾醇、烷烴類及揮發(fā)性成分等。其中,裂環(huán)烯醚萜光光度法在不同顯色體系中進(jìn)行含量測定,探討干擾測定的類和黃酮類是其主要有效成分。油橄欖葉所含裂環(huán)烯醚萜類主要基

5、質(zhì)因素,以期為中藥或天然產(chǎn)物復(fù)雜基質(zhì)中總黃酮含主要是橄欖苦苷。黃酮類化合物主要有木犀草苷、芹菜苷、量測定方法提供參考。[1,5]。油橄欖葉中黃酮類化合物含槲皮素、蘆丁、山奈酚等量豐富,其藥理活性主要表現(xiàn)在抗氧化及清除自由基作用,1儀器、試劑與材料對心血管系統(tǒng)的作用,抗腫瘤、抗癌作用,對平滑肌的作用,抗炎、抗菌、抗病毒作用,雌激素作用,對中樞神經(jīng)系統(tǒng)的T6新世紀(jì)紫外-可見分光光度計(北京普析通用儀器有作用,降血糖作用,鎮(zhèn)痛止瀉、防治潰瘍的作用。此外,還可限責(zé)任公司),RE-52C型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀(鞏義市予華儀器有限[6]。作為功能

6、食品添加劑、天然抗氧化劑食用責(zé)任公司),BT224S型電子天平(北京賽多利斯儀器系統(tǒng)有目前,總黃酮的含量測定方法主要有分光光度法、薄層限公司)。色譜掃描法、高效液相色譜法、超臨界流體色譜法和毛細(xì)管蘆丁對照品(批號為100081-200707)購于中國藥品生物[7,8]。其中,高效液相色譜法和毛電泳法等幾種主要的方法制品檢定所。橄欖苦苷對照品為本實驗室自制:油橄欖葉乙細(xì)管電泳法具有較高的準(zhǔn)確性和靈敏度,但在測定總黃酮含酸乙酯部位提取物,以氯仿-甲醇(9:1,φ)為洗脫液經(jīng)硅膠收稿日期:2010-05-10,修訂日期:2010-

7、08-20基金項目:中國科學(xué)院“百人計劃”項目和中國科學(xué)院“科技支甘”項目資助作者簡介:鄭媛媛,女,1986年生,蘭州大學(xué)藥學(xué)院在讀碩士研究生e-mail:hn_zyy@163.com*通訊聯(lián)系人e-mail:didl@licp.cas.cn548光譜學(xué)與光譜分析第31卷柱色譜反復(fù)分離重結(jié)晶得到化合物,經(jīng)113為縱坐標(biāo)進(jìn)行線性回歸,得線性回歸方程、相關(guān)系數(shù)分別yHNMR和C-NMR確定化合物為橄欖苦苷,并由HPLC-DAD法-面積歸一化法2=8.355x+0.0369,R=0.9939,n=6。由此可知,蘆丁對測得其含量大于

8、95%。油橄欖葉(干燥品)采于甘肅省隴南照品溶液在0.00788-0.0473mg·mL-1的濃度范圍內(nèi)呈市?,F(xiàn)良好的線性關(guān)系。Al(NO3)3,NaNO2,NaOH和AlCl3為分析純,實驗用2.3.2AlCl3顯色法乙醇為工業(yè)純,實驗用水為蒸餾水。分別精密量取蘆丁對照品溶液Ⅰ0.0,1

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