紫外分光光度法測氧氟沙星片劑中氧氟沙星的含量

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1、紫外分光光度法測定氧氟沙星片劑中氧氟沙星的含量一、實驗目的1、掌握紫外分光光度法測定氧氟沙星的原理和方法2、熟悉繪制工作曲線的一般方法和應用。二、實驗原理氧氟沙星屬第3代喹諾酮類光譜抗菌藥物,其抗菌作用強,對厭氧菌、支原體以及肺炎衣原體等也有一定作用。氧氟沙星在三氯甲烷中略溶,在水或甲醇中微溶或極微溶解,在冰醋酸或氫氧化鈉溶液中易溶,在0.1mol/L鹽酸中可溶??紤]到0.1mol/L鹽酸溶液較為常用,因此選擇0.1mol/L的鹽酸溶液為溶劑。氧氟沙星的吸收光譜上的最大吸收峰波長為294±1nm。本實驗采用紫外分光光度法測定氧氟沙星片劑中的含量,簡潔、快速,可

2、用作生產(chǎn)過程的快速測定。氧氟沙星的結構如下:三、儀器與試劑儀器:UV—2550紫外分光光度計,容量瓶(100ml),燒杯,具塞刻度試管(10ml),玻璃棒,微量加樣器,研缽,布氏漏斗,吸量管。試劑:氧氟沙星標準樣品,氧氟沙星片(0.1g/片),0.1mol/L鹽酸溶液。四、實驗步驟1、標準溶液的配制:精密稱取105℃干燥至恒重的氧氟沙星標準品10mg,置于燒杯中,用0.1mol/L鹽酸溶液溶解,然后轉移至100ml容量瓶中,稀釋至刻度,定容,搖勻,得100μg/ml氧氟沙星標準溶液。2、波長的選擇精密量取一定量的上述標準溶液11份,分別取0.02、0.2、0.

3、4、0.6、0.8、1、1.2、1.6、2.4、4、5ml的標準溶液于10ml的刻度試管中,用0.1mol/L鹽酸溶液稀釋至刻度線,搖勻。制成濃度分別為0.2、2、4、6、8、10、12、16、24、40、50μg/ml的溶液。以0.1mol/L鹽酸溶液作為空白溶液,用1cm的比色皿在紫外可見分光光度計上測定每份溶液的吸光度。測定前,選取其中濃度為8μg/mL的溶液,以0.1mol/L鹽酸溶液作參比,在200~400nm波長范圍掃描,從光譜中找出吸收峰,以吸光度值最大的波長作為測定波長3、標準工作曲線實驗在最大吸光度的波長處,分別測定上述溶液的吸光度,在線性范

4、圍內(nèi)用吸收度(X)對質(zhì)量濃度(Y)進行回歸,得回歸方程及相關性系數(shù)R。4、檢出限的測定:取0.1mol/L鹽酸溶液1份于10ml的刻度試管中,在相同條件下于λ處測定其吸光度11次,按檢出限公式:D=3σ/K計算。5、精密度的測定:分別吸取已配制好的100ug/ml標準溶液1ml于6個10ml的刻度試管中,并用0.1mol/L鹽酸溶液稀釋至刻度,制成濃度為10μg/ml的溶液。在相同條件下測得各自的吸光度A1、A2、A3、A4、A5、A6,求RSD。6、樣品的測定取氧氟沙星片10片,精密稱定,研細,精密稱?。s相當于氧氟沙星0.1g),置100ml容量瓶中,加0

5、.1mol/L鹽酸溶液至刻度,搖勻,用布氏漏斗抽濾,精密量取續(xù)濾液1ml,置10ml的刻度試管中,加0.1mol/L鹽酸溶液稀釋至刻度,搖勻,作為供試品溶液。吸取供試品溶液8ml于100ml的容量瓶中用0.1mol/L鹽酸溶液稀釋至刻度,作為樣品。取配制好的樣品溶液于吸收池中,在相同條件下于λ處測定其吸光度,求出氧氟沙星片劑中氧氟沙星的實際含量cx。7、回收率的測定:分別取上述2μg/ml,12μg/ml,40μg/ml的標準溶液5ml,與5ml的上述8μg/ml的樣品混合于10ml的刻度試管中,在相同條件下測定吸光度A7、A8、A9在標準曲線上找到其對應的溶

6、度,換算成質(zhì)量。求出回收率。五、數(shù)據(jù)記錄及處理1、波長的選擇2、標準曲線的繪制標準曲線吸光度標準液C(ug/ml)0.22.04.06.08.0101216244050λ處吸光度3、檢出限的測定測得11份0.1mol/LHCl溶液在最大吸光度值的波長處的吸光度,如下:組數(shù)1234567891011吸光度A由標準偏差公式得σ,求D=3σ/K4、精密度的測定平行測定的10ug/ml氧氟沙星溶液在最大吸光度值的波長處的吸光度如下:組數(shù)A1A2A3A4A5A6平均值吸光度求RSD。根據(jù)標準偏差公式求得σ。其相對標準偏差RSD=σ/x*100%(x為A的平均值)5、求氧

7、氟沙星片劑中的含量cx。6、計算回收率(回收率=加入純品后的測得量-加入前的測得量/純品加入量*100%)。

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