獸用疫苗生產(chǎn)

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1、獸用疫苗生產(chǎn)一、獸用生物制品分類二、獸用疫苗的制備技術(shù)三、獸用診斷試劑的制備技術(shù)四、獸用生物制品檢測技術(shù)一、獸用生物制品分類獸用生物制品系指用天然或人工改造的微生物（細菌、病毒、衣原體、鉤端螺旋體等）及其代謝產(chǎn)物、寄生蟲、動物血液或組織等為原材料，采用生物學(xué)、分子生物學(xué)或生物化學(xué)等相應(yīng)技術(shù)制成的生物制劑，用于預(yù)防、治療或診斷畜禽疫病。1、按照性質(zhì)和制造方法疫（菌）苗、類毒素、抗血清、診斷制劑和微生態(tài)制劑等。2、按照作用與用途預(yù)防、診斷和治療用生物制品。（一）預(yù)防用獸用生物制品將細菌、病毒、寄生蟲等接種于特殊基質(zhì)進行培養(yǎng)，收獲其

2、抗原單位或亞單位，或用人工合成的抗原單位或亞單位制備而成的活的或滅活的、具有特異性和免疫原性的生物制品，用于預(yù)防靶動物的疾病。預(yù)防用獸用生物制品包括：滅活疫苗、活疫苗、重組亞單位疫苗、合成肽疫苗、基因缺失疫苗、重組活載體疫苗和核酸（DNA）疫苗。1、滅活疫苗(死疫苗)1)強毒(菌)或弱毒（菌）→培養(yǎng)→滅活或加熱→純化或濃縮→佐劑或防腐劑。2)滅活的毒素或提取的亞單位或rDNA產(chǎn)生亞單位。滅活疫苗穩(wěn)定、安全，便于運輸和保存，易于提純純化和制備多價、多聯(lián)苗。但用量較大、接種次數(shù)多、免疫力產(chǎn)生慢、注射困難、注射局部可能有反應(yīng)等。2、活

3、疫苗(弱毒疫苗)1）致弱的弱毒（菌、蟲）株動物、組織、細胞、雞胚或培養(yǎng)基→培養(yǎng)→降低毒力、保留免疫原性→篩選。2）自然弱（無）毒（菌、蟲）株。3）異種毒（菌、蟲）株。4）基因工程改造弱毒株。活疫苗對原宿主動物無致病性或引起亞臨床感染，能產(chǎn)生主動免疫力，用量少、成本低、免疫力產(chǎn)生快、免疫期長。但可能存在不安全風險。3、重組亞單位疫苗1）微生物→物理和化學(xué)方法→提取有效抗原成分。2）病原→基因工程技術(shù)→保護性抗原基因序列插入合適的表達質(zhì)?！咝Х€(wěn)定表達→生產(chǎn)抗原→亞單位疫苗。4、合成肽疫苗用化學(xué)方法人工合成多肽作為抗原。純度高、穩(wěn)定

4、，但只能線性表達，不能折疊，免疫原性較差。5、基因缺失疫苗病原體→基因工程方法→缺失致病性基因或非必要糖蛋白→保持免疫原性→降低致病性。疫苗毒力不易恢復(fù)，穩(wěn)定性好，可配合鑒別診斷方法，區(qū)別免疫動物和自然感染動物。6、重組活載體疫苗病原保護性抗原基因序列→插入另一種無毒或弱毒的微生物基因組→表達→構(gòu)建重組活載體疫苗株?？梢酝瑫r表達多種抗原，制成多價或多聯(lián)疫苗，毒力不返強。7、核酸疫苗（基因或DNA疫苗）病原保護性抗原基因→連接細菌或病毒DNA→直接導(dǎo)入動物體→表達抗原→誘導(dǎo)產(chǎn)生免疫保護。制造簡便、成本低、安全、免疫期長、熱穩(wěn)定性好

5、，但仍未商品化生產(chǎn)。（二）診斷用制品1、常規(guī)免疫—血清學(xué)診斷技術(shù)（1）凝集試驗抗原：直接凝集試驗（平板法、試管法）：抗原和抗體混合后直接發(fā)生凝集反應(yīng)。間接凝集試驗（間接血凝、膠乳凝集和反相間接血凝試驗）。1、常規(guī)免疫—血清學(xué)診斷技術(shù)（2）免疫沉淀試驗抗原：包括試管沉淀法、單相免疫擴散試驗和雙相免疫擴散試驗、免疫電泳、對流免疫電泳等。（3）中和試驗：將特異性血清與相應(yīng)病原混合，用血清—病毒混合物接種靶動物、雞胚或細胞培養(yǎng)，觀察感染情況進行疾病診斷。（4）補體結(jié)合試驗抗原：抗原抗體復(fù)合物可以激活補體，出現(xiàn)各種生物學(xué)反應(yīng)。1、常規(guī)免疫

6、—血清學(xué)診斷技術(shù)（5）酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）：包括直接法、間接法、雙抗體夾心、競爭ELISA等。（6）熒光抗體染色技術(shù)：直接法、間接法、競爭法等。（7）膠體金免疫檢測技術(shù)。（8）免疫組化診斷試劑。2、生物技術(shù)和分子生物學(xué)診斷技術(shù)（1）生物技術(shù)：單克隆抗體技術(shù)（熒光抗體染色技術(shù)或酶聯(lián)免疫染色技術(shù)）。（2）分子生物學(xué)技術(shù)。PCR（RT－PCR）擴增技術(shù)。熒光定量PCR（RT－PCR）。基于核酸序列擴增技術(shù)（NASBA）。核酸探針。（三）治療及其他制品1、抗血清：用抗原多次免疫動物，提取血清制成，用于治療或預(yù)防動物疾病。2、微

7、生態(tài)制劑：含活菌的制劑，具有調(diào)節(jié)機體菌群、增強免疫力、促生長等。3、卵黃抗體：用抗原多次免疫禽類，提取卵黃抗體制成，用于治療或預(yù)防動物疾病。4、干擾素：用病毒等誘導(dǎo)產(chǎn)生干擾素。5、轉(zhuǎn)移因子：用動物臟器或組織提取制成，作為非特異性免疫調(diào)節(jié)劑，增強機體免疫力，提高生產(chǎn)性能。二、獸用疫苗制備技術(shù)（一）獸用滅活疫苗的制備技術(shù)滅活疫苗是用菌（毒）種培養(yǎng)物或含毒組織或細胞培養(yǎng)物，經(jīng)化學(xué)滅活劑滅活或加熱處理，使微生物失去活性而保持免疫原性，再加入適當?shù)姆栏瘎┗蚣尤朊庖咦魟┲瞥伞?、菌（毒）種1.1、菌（毒）種標準歷史清楚；生物學(xué)性狀明顯；遺傳

8、穩(wěn)定；優(yōu)良的免疫原性與反應(yīng)原性；毒力在規(guī)定的范圍內(nèi)。1.1、菌（毒）種標準原種細菌原種應(yīng)規(guī)定其培養(yǎng)特性、生化特性、血清學(xué)特性、毒力和免疫原性等，并作純粹檢查。病毒原種應(yīng)規(guī)定其生物學(xué)特性、理化特性、血清學(xué)特性、最小感染量、最小免疫量、安全性等，并純粹。基礎(chǔ)種子基礎(chǔ)