熒光定量pcr結(jié)果分析

熒光定量pcr結(jié)果分析

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1、如果有標(biāo)準(zhǔn)曲線，按照標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算。一般都是相對量。則用deltadeltaCT方法來計(jì)算。舉例如下：對照組基因A的CT值為20，內(nèi)參（比如βactin)CT值15。實(shí)驗(yàn)組基因ACT值18，內(nèi)參CT值14。首先算加樣量：deltaCT=15-14=1。2的1次方是2。也就是說實(shí)驗(yàn)組的加樣量是對照組的2倍?；駻:deltaCT=20-18=2。2的2次方是4。也就是說基因A的量在實(shí)驗(yàn)組是對照組的4倍。但是由于加樣量是2倍，所以4處以2=2，最后的相對量是2倍。幾點(diǎn)注意：1。必須確定擴(kuò)增的特異性2。只有相同目標(biāo)的CT值才能相減（擴(kuò)增效率有可能不同）3。2的某次方只是

2、理論值，實(shí)際擴(kuò)增效率低于2。4。最好不用SyberGreen由Ct值用2^-△△Ct法計(jì)算計(jì)算表達(dá)量差異的原理，可以看下面的圖片：附件的Excel文件是計(jì)算用的，感興趣也可以看看由Ct值是如何一步一步算出2^-△△Ct的。

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