熒光定量pcr結果分析

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1、如果有標準曲線,按照標準曲線計算。一般都是相對量。則用deltadeltaCT方法來計算。舉例如下:對照組基因A的CT值為20,內參(比如βactin)CT值15。實驗組基因ACT值18,內參CT值14。首先算加樣量:deltaCT=15-14=1。2的1次方是2。也就是說實驗組的加樣量是對照組的2倍?;駻:deltaCT=20-18=2。2的2次方是4。也就是說基因A的量在實驗組是對照組的4倍。但是由于加樣量是2倍,所以4處以2=2,最后的相對量是2倍。幾點注意:1。必須確定擴增的特異性2。只有相同目標的CT值才能相減(擴增效率有可能不同)3。2的某次方只是

2、理論值,實際擴增效率低于2。4。最好不用SyberGreen由Ct值用2^-△△Ct法計算計算表達量差異的原理,可以看下面的圖片:附件的Excel文件是計算用的,感興趣也可以看看由Ct值是如何一步一步算出2^-△△Ct的。

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