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《超低溫冷凍保存對(duì)黃顙魚精子脂筏的影響.pdf》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在應(yīng)用文檔-天天文庫(kù)。
1、萬(wàn)方數(shù)據(jù)答辯委員會(huì)主席：魏丕砑究旦蟲國(guó)盒旦旦I：1型旦I：旦I撿定嬰窺暄答辯委員會(huì)成員：夔苤嬰窒旦蟲國(guó)金星墊昌撿定嬰塞院楊丕仨數(shù)援漁劃醫(yī)型太堂蔓紅出塾援濕趔匡型太堂論文答辯日期：2Q!壘生§旦2壘旦萬(wàn)方數(shù)據(jù)溫州醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文中英文縮略語(yǔ)對(duì)照表????????????????????5摘要???????????????????????????????????．．6第一章前言???????????????????????101．1精子超低溫保存的研究現(xiàn)狀與進(jìn)展???????????101．2膜脂和精子超低溫冷凍????????????????101
2、．3“脂筏"結(jié)構(gòu)域???????????????????111．4ATP結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白A1(ABCAl)a信5介????????．．111．5本文的研究?jī)?nèi)容??????????????????．121．5．1低溫冷凍對(duì)黃顙魚精子脂筏含量的影響??????．．121．5．2低溫冷凍對(duì)黃顙魚精子脂筏相關(guān)各基因表達(dá)的影響?．．131．5．3低溫冷凍對(duì)黃顙魚精子中ABCAl蛋白表達(dá)的影響??131．5．4鞘磷脂酶抑制劑對(duì)黃顙魚精子活力以及其抗凍性的影n向第二章超低溫冷凍保存對(duì)黃顙魚精子脂筏含量的影響????．．142．1實(shí)驗(yàn)材料???????????????
3、???????142．1．1研究對(duì)象????????????????????142．1．2精子樣本的獲取?????????????????142．1．3主要試劑????????????????????142．1．4主要儀器????????????????????152．2實(shí)驗(yàn)方法??????????????????????152．2．1膽固醇．環(huán)糊精復(fù)合體的制備????????????152．2．2鮮精的膽固醇轉(zhuǎn)入????????????????15萬(wàn)方數(shù)據(jù)溫州醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文2．2．3鮮精的膽固醇剔除????????????????162．2．
4、4精子的超低溫冷凍保存與解凍???????????162．2．5黃顙魚精子膜上脂筏含量的測(cè)定??????????162．2．6數(shù)據(jù)處理????????????????????172．3結(jié)果????????????????????????．172．3．1五組精子樣本活力的測(cè)定?????????????172．3．2五組精子樣本脂筏含量的測(cè)定???????????182．4分析與討論?????????????????????19第三章超低溫冷凍對(duì)黃顙魚精子的脂筏相關(guān)基因的表達(dá)的影響．．213．1實(shí)驗(yàn)材料??????????????????????213．
5、1．1研究對(duì)象????????????????????213．1．2精子樣本的獲取?????????????????213．1．3主要試劑????????????????????213．1．4主要儀器????????????????????2l3．2實(shí)驗(yàn)方法??????????????????????223．2．1精子的超低溫冷凍保存及解凍???????????223．2．2精子活力的測(cè)定?????????????????223．2．3精子內(nèi)LXR、ABCAl、KDSR、LASS2、DEGS2、SGMSl基因表達(dá)的檢測(cè)????????????????
6、??223．2．3．1精子總RNA的提?。????????????．223．2．3．2RNA樣本的逆轉(zhuǎn)錄?????????????．．233．2．3．2各個(gè)基因的q-PCR檢測(cè)???????????一242萬(wàn)方數(shù)據(jù)溫州醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文3．2．4數(shù)據(jù)分析????????????????????．243．3結(jié)果????????????????????????????????243．3．1檢測(cè)黃顙魚精子總RNA的完整性?????????．．243．3．2超低溫冷凍對(duì)精子脂筏相關(guān)基因表達(dá)的影響?????253．4分析與討論????????????????
7、?????26第四章低溫冷凍對(duì)黃顙魚精子中ABCAl蛋白表達(dá)的影響???274．1實(shí)驗(yàn)材料??????????????????????274．1．1精子樣本的獲取?????????????????274．1．2主要試劑????????????????????274．1．3主要儀器????????????????????274．2實(shí)驗(yàn)方法??????????????????????284．2．1蛋白樣品的提取?????????????????284．2．2蛋白樣品的定量?????????????????284．2．3SDS電泳與WesternBlot?
8、????????????????．．294．2．3．1SDS凝膠電泳????????????????．．29
