沱茶總黃酮的提取及含量測(cè)定.pdf

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1、第3O卷第2期平頂山學(xué)院學(xué)報(bào)Vo1．3ONo．22015年4月JournalofPingdingshanUniversityApr．2015沱茶總黃酮的提取及含量測(cè)定熊偉，張曉娟，楊飛4，楊勇琴，張海洋(1．大理學(xué)院基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院，云南大理671000；2．云南省昆蟲(chóng)生物醫(yī)藥研發(fā)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，云南大理671000；3．大理市第一人民醫(yī)院，云南大理671000；4．云南農(nóng)業(yè)大學(xué)煙草學(xué)院，云南昆明650201)摘要：采用超聲波乙醇法從云南沱茶中提取總黃酮類(lèi)化合物，單因素實(shí)驗(yàn)分析乙醇濃度、提取時(shí)間和料液比3個(gè)因素對(duì)沱茶總黃酮得率的影響．結(jié)果表明，以乙醇濃度=70％、提取時(shí)間30mi

2、n，料液比(g／mL)1：30為超聲法最佳提取工藝，提取總黃酮得率為5．978mg／g，平均回收率為99．83％，RSD=0．96％(／7,=3)，旨在為進(jìn)一步綜合開(kāi)發(fā)利用云南沱茶提供參考依據(jù)．關(guān)鍵詞：總黃酮；沱茶；超聲提??；比色法中圖分類(lèi)號(hào)：R284．2文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A文章編號(hào)：1673—1670(2015)02—0069—040引言1材料與儀器云南沱茶是具有悠久歷史的高級(jí)緊壓茶，由于1．1材料傳統(tǒng)的原料配制與加工工藝技術(shù)形成了特有的色、1．1．1實(shí)驗(yàn)樣品香、味風(fēng)格，受到廣大茶葉消費(fèi)者的歡迎．云南沱購(gòu)自于云南下關(guān)沱茶集團(tuán)股份有限公司(批茶的醫(yī)療保健作用非常廣泛，除具有興

3、奮作用號(hào)：20130516)．外，還具有利尿、強(qiáng)心解痙、減肥、抑制動(dòng)脈硬化、1．1．2試劑及藥品抗菌抑菌、抑制癌細(xì)胞和抗衰老作用_l-3]．因此，蘆丁對(duì)照品(批號(hào)：100080—201308)由中國(guó)在法國(guó)、西班牙、日本、香港等20多個(gè)國(guó)家和地藥品生物制品鑒定所提供；無(wú)水乙醇、石油醚區(qū)有“減肥茶”“窈窕茶”“美容茶”“益壽茶”之美(60～90℃)、亞硝酸鈉、硝酸鋁、三氯化鋁、三氯化稱(chēng)．鐵、鹽酸、鎂粉、濃氨水等化學(xué)試劑為分析純，購(gòu)于生物總黃酮是指黃酮類(lèi)化合物，是一大類(lèi)天北京鼎國(guó)昌盛生物技術(shù)公司．然產(chǎn)物，廣泛存在于植物界，是許多中草藥的有1．2儀器設(shè)備效成分．在自然界中最常見(jiàn)

4、的是黃酮和黃酮醇，微量移液器(德國(guó)Eppendorf公司)；UV9100其他包括雙氫黃(醇)、異黃酮、雙黃酮、黃烷醇、紫外一可見(jiàn)分光光度計(jì)(北京瑞利分析儀器公查爾酮、橙酮、花色苷及新黃酮類(lèi)等HJ．黃酮類(lèi)化司)；BT一224S型電子分析天平(德國(guó)Sartofius公合物具有眾多的生理功能和藥用價(jià)值，然而迄今司)；KQ一205B型超聲波清洗器(廣州鴻富化工有關(guān)對(duì)云南沱茶中黃酮類(lèi)化合物提取工藝和含有限公司)；Fw177型中草藥粉碎機(jī)(天津泰斯特量測(cè)定的研究卻未見(jiàn)報(bào)道．筆者采用單因素實(shí)驗(yàn)儀器有限公司)；數(shù)顯恒溫水浴鍋(江蘇金壇市金分析法對(duì)沱茶總黃酮的提取工藝進(jìn)行研究，并測(cè)城國(guó)勝

5、實(shí)驗(yàn)儀器廠)；DZF一150小型真空衡溫干定沱茶中總黃酮化合物的含量，旨在為進(jìn)一步開(kāi)燥箱(鄭州長(zhǎng)城科工貿(mào)有限公司)；SH2一D(III)循發(fā)利用沱茶提供參考．環(huán)水式真空泵(上海子期實(shí)驗(yàn)設(shè)備有限公司)；收稿日期：2014—08—30基金項(xiàng)目：云南省教育廳科學(xué)研究重點(diǎn)項(xiàng)目(2014Z126)；大理學(xué)院博士科研啟動(dòng)基金(BSKY2012018)；大理學(xué)院應(yīng)用開(kāi)發(fā)研究項(xiàng)目(201406)；云南省大學(xué)生創(chuàng)新創(chuàng)業(yè)計(jì)劃(201408)作者簡(jiǎn)介：熊偉(1982一)，男，湖南省株洲市人，博士，大理學(xué)院基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院副教授，碩士生導(dǎo)師，主要研究方向：植物多糖生物活性．·7O·平頂山學(xué)院學(xué)報(bào)20

6、15焦MAS—II常壓微波輔助合成／萃取反應(yīng)儀(上海新鹽酸一鎂粉反應(yīng)：精確吸取1．0mL提取液于儀器微波化學(xué)科技有限公司)；醫(yī)用離心機(jī)(北京玻璃試管中，加入適量鎂粉，充分搖勻后再加入濃醫(yī)用離心機(jī)廠)．鹽酸5—8滴，觀察其顏色的變化．2．4回收率的測(cè)定方法2實(shí)驗(yàn)方法精確稱(chēng)取沱茶6份，每份1．000g，分別加入蘆2．1蘆丁對(duì)照品標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)的繪制丁對(duì)照品5。0mg，按2．2步驟操作，得到加入蘆丁用電子天平準(zhǔn)確稱(chēng)取蘆丁對(duì)照品20．56mg，置標(biāo)準(zhǔn)液的樣品的吸光度值，根據(jù)公式計(jì)算回收于100mL的容量瓶中，加入=70％乙醇至刻度，率：回收率=樣品加蘆丁標(biāo)樣測(cè)得總黃酮含即得蘆丁對(duì)照品

7、溶液．用微量移液器精密吸取1．0、量一樣品中總黃酮含量／蘆丁的加入量×100％．2．0、3．0、4．0和5．0mL對(duì)照品溶液置于10mL比色3實(shí)驗(yàn)結(jié)果管中，各加入=70％乙醇定容至5mL，加P=5％亞硝酸鈉溶液0．4mL，搖勻放置6rain，再加P=10％3．1黃酮類(lèi)化合物的定性鑒定硝酸鋁溶液0．4mL，搖勻，再放置6min，加P=4％黃酮類(lèi)化合物經(jīng)三氯化鐵反應(yīng)在可見(jiàn)光下呈氫氧化鈉溶液4mL，搖勻放置15min．相同方法配紫色；三氯化鋁反應(yīng)呈灰藍(lán)色；氨顯色反應(yīng)在紫外制空白對(duì)照，在506tim波長(zhǎng)處測(cè)定吸光度值A(chǔ)為縱光下呈明顯的墨綠色熒光斑