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《在線固相萃取-高效液相色譜聯(lián)用測(cè)定動(dòng)物源食品中的維生素A、E.pdf》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在行業(yè)資料-天天文庫(kù)。
1、第42卷分析化學(xué)(FENXIHUAXUE)研究報(bào)告第9期2014年9月ChineseJournalofAn~yticalChemistry1343～1347DOI：10．11895／j．issn．0253-3820．140445在線固相萃?。咝б合嗌V聯(lián)用測(cè)定動(dòng)物源食品中的維生素A、E謝云峰王浩劉佟任丹丹楊永壇(中糧營(yíng)養(yǎng)健康研究院，營(yíng)養(yǎng)健康與食品安全北京市重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，北京102209)摘要采用固相萃取與雙梯度高效液相色譜聯(lián)用技術(shù)，建立了一種在線固相萃取一高效液相色譜同時(shí)測(cè)定動(dòng)物源食品中維生素A、E的分析方法。樣品于8O℃下皂化反應(yīng)30min，經(jīng)離心沉淀后引入一維c固
2、相萃取柱，采用60％(V／V)甲醇溶液對(duì)目標(biāo)物進(jìn)行在線富集凈化，然后通過(guò)閥切換將其轉(zhuǎn)移至二維液相分析系統(tǒng)進(jìn)行分離檢測(cè)?？疾炝溯腿√盍稀⑸蠘尤軇┘跋疵摋l件對(duì)豬肝、雞蛋和配方乳粉的維生素A、E富集和基質(zhì)凈化效果。結(jié)果表明，在優(yōu)化條件下，方法線性范圍為0．02～20mg／L，線性相關(guān)系數(shù)R30．9998，對(duì)維生素A、E的檢出限(S／N=3)為3．0—30．0g／L，實(shí)際樣品加標(biāo)回收率為87．3％～115．0％，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD)為1．8％4．6％。本方法操作簡(jiǎn)便，靈敏度高，可用于動(dòng)物源食品中維生素A、E的快速測(cè)定。關(guān)鍵詞在線固相萃取；雙梯度高效液相色譜；動(dòng)物源食品；維生
3、素A；維生素E1引言維生素A和維生素E是機(jī)體維持正常生理功能和物質(zhì)能量代謝必需的微量營(yíng)養(yǎng)成分，但是它們?cè)隗w內(nèi)不能合成或合成量不足以滿足身體需要，必須通過(guò)食物進(jìn)行補(bǔ)充]。肝臟、蛋類和乳品等動(dòng)物源食品含有豐富的維生素A、E，是人體所需脂溶性維生素的重要來(lái)源。由于脂溶性維生素化學(xué)性質(zhì)不穩(wěn)定，易受光照、空氣和溫度影響導(dǎo)致氧化分解_2]，而且動(dòng)物源食品蛋白脂肪含量高，干擾因素多，高效提取和測(cè)定復(fù)雜基質(zhì)食品中維生素A、E仍然是維生素分析技術(shù)的難點(diǎn)_3．4]。目前，維生素A和維生素E的分析方法主要有層析法E、比色法[、熒光法[、電化學(xué)法[、氣相色譜法[]和高效液相色譜法[m]，其中
4、以高效液相色譜法最為常用?，F(xiàn)行食品檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)在內(nèi)的大多數(shù)脂溶性維生素分析方法的樣品前處理主要包括皂化、萃取、濃縮、凈化等步驟[1l1]，涉及多次蒸發(fā)溶解，操作繁瑣、費(fèi)時(shí)，容易造成待測(cè)組分損失，導(dǎo)致測(cè)定結(jié)果偏低且重現(xiàn)性不好。近年來(lái)，前處理技術(shù)與色譜分離分析的在線聯(lián)用為簡(jiǎn)化繁瑣的手工前處理操作．提高復(fù)雜食品基質(zhì)分析效率提供了新的技術(shù)手段H]。本研究利用雙梯度液相色譜系統(tǒng)結(jié)合柱切換技術(shù)，建立了一種同時(shí)測(cè)定動(dòng)物源食品中維生素A、E的在線固相萃取與高效液相色譜聯(lián)用方法，具有分析效率高、溶劑消耗少、測(cè)定結(jié)果準(zhǔn)確且重現(xiàn)性好等特點(diǎn)。與文獻(xiàn)[15]相比，本方法不僅擴(kuò)大了動(dòng)物源食品檢測(cè)種類
5、，而且縮短了分析時(shí)間，提高了檢測(cè)靈敏度，為動(dòng)物源食品中維生素A、E的測(cè)定提供了更為簡(jiǎn)便、靈敏、可靠的分析方法。2實(shí)驗(yàn)部分2．1儀器與試劑Ultimate3000雙三元液相色譜系統(tǒng)(ThermoScientific公司)，配備雙三元梯度泵、自動(dòng)進(jìn)樣器、柱溫箱含六通閥、二極管陣列檢測(cè)器、變色龍色譜管理軟件；Milli．Q超純水機(jī)(Millipore公司)；臺(tái)式高速冷凍離心機(jī)(ThermoScientific公司)。維生素A(視黃醇)、一維生素E、JB．維生素E、一維生素E和6一維生素E標(biāo)準(zhǔn)品(Sigma公司)；KOH、抗壞血酸(分析純，國(guó)藥集團(tuán)北京化學(xué)試劑有限公司)；無(wú)水
6、乙醇、甲醇(色譜級(jí)，F(xiàn)isher公司)；其它試劑均為分析純；無(wú)水乙醇經(jīng)脫醛處理后使用；豬肝、雞蛋和嬰幼兒配方乳粉購(gòu)自本地超市。2014—05—26收稿；2014．07．21接受本文系中糧集團(tuán)有限公司年度科技計(jì)劃資助項(xiàng)目(No．2013一C2·F001)E—mail：yangongan@coco．com分析化學(xué)第42卷2．2色譜條件分析柱：ZorbaxExtend—C】8(150mm×4．6mm，5Ixm)；固相萃取柱：ZorbaxSB—C8(12．5mmX4．6mm，5m)；進(jìn)樣量：100txL；柱溫：30℃；在線凈化流動(dòng)相：甲醇．水溶液(60：40，)，洗脫條件：使
7、用pH7．5甲醇．水溶液，以1mL／min流速上樣并清洗萃取小柱5min，再使用pH3．5甲醇一水溶液清洗萃取小柱5min，分析測(cè)定。流動(dòng)相：甲醇．水溶液(98：2，)，流速：1．7mL／min；紫外檢測(cè)波長(zhǎng)設(shè)為325和300nm。2．3標(biāo)準(zhǔn)溶液配制準(zhǔn)確稱取維生素A標(biāo)準(zhǔn)品10．0mg，一維生素E．維生素E、y．維生素E和．維生素E各50．0mg，用脫醛乙醇溶解并定容于100mL棕色容量瓶中，配制成濃度分別為100mg／L維生素A和500mg／LOt，，和6維生素E標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液，于一2O℃保存。測(cè)定前用紫外分光光度法標(biāo)定標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液準(zhǔn)確濃度，再用脫醛乙醇稀
