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1、小鼠的采血小鼠最大安全采血量(0.2mL)最小致死采血量(0.3mL)取少量血:尾靜脈采血,斷尾采血,眼底靜脈叢采血(做血樣的檢測)取中量血:心臟取血,斷頭取血取大量血:摘眼球取血1.剪尾采血當所需血量很少時采用本法。溫水浸泡,消毒,用銳器(刀或剪刀)割去尾尖0.3-0.5cm,也可在尾部作一橫切口,割破尾動脈或靜脈,收集血液。每鼠一般可采血10余次以上。小鼠每次可取血0.1mL。一、常用的小鼠采血方法6.頸動(靜)脈采血先將動物仰位固定,切開頸部皮膚,分離皮下結(jié)締組織,使頸靜脈充分暴露,可用注射器吸出血液。在氣管兩側(cè)分離出頸動脈,離心端結(jié)扎,向心端剪口將
2、血滴入試管內(nèi)。7.腹主動脈采血最好先將動物麻醉,仰臥固定在手術(shù)架上,從腹正中線皮膚切開腹腔,使腹主動脈清楚暴露。用注射器吸出血液,防止溶血?;蛴脽o齒鑷子剝離結(jié)締組織,夾住動脈近心端,用尖頭手術(shù)剪刀,剪斷動脈,使血液噴入盛器。8.股動(靜)脈采血先由助手握住動物,采血者左手拉直動物下肢,使靜脈充盈。或者以搏動為指標,右手用注射器刺入血管。體重15-20g小鼠采血約0.2-0.8mL。血液包含有四種成分:血漿,紅細胞,白細胞,血小板。血漿約占血液的55%,是水,糖,脂肪,蛋白質(zhì),鉀鹽和鈣鹽的混合物。血細胞和血小板組成血液的另外45%。血漿的主要作用是運載血細胞
3、,運輸維持人體生命活動所需的物質(zhì)和體內(nèi)產(chǎn)生的廢物等。血漿相當于結(jié)締組織的細胞間質(zhì)。是血液的重要組成分,呈淡黃色液體(因含有膽紅素)。離開血管的全血經(jīng)抗凝處理后,通過離心沉淀,所獲得的不含細胞成分的液體,即血漿。血漿的化學成分中,水分占90~92%,溶質(zhì)以血漿蛋白為主。血漿蛋白是多種蛋白質(zhì)的總稱,用鹽析法可將其分為白蛋白、球蛋白和纖維蛋白原三類。血清是指不加抗凝劑的全血經(jīng)過靜置一段時間,血細胞沉降后的上層液體,不含凝血酶原和纖維蛋白原,但含有少量血液凝固時由血管內(nèi)皮細胞和血小板釋放出來的化學物質(zhì),血清不可以再凝。血清含有糖類,無機鹽及抗體等.二、尸體、廢棄物
4、的處理1、受試動物尚未死亡,應(yīng)采用安樂死處理。2、動物尸體與廢棄物處理:實驗廢棄物:分類收集,無害處理。無毒性受試驗物或無重大疫病的動物尸體,集中收集放入尸體袋冷凍,待焚燒處理。有毒性受試驗物的動物尸體,應(yīng)做毒性消除或中和處理。重大疫病的動物尸體,應(yīng)該在達到相應(yīng)生物安全的滅菌消毒器中進行消毒處理后,再冷凍保存焚燒處理。三、實驗內(nèi)容取免疫后的小鼠,用酒精棉球擦拭小鼠面部(確保小鼠的毛是濕的,以避免其掉入容器引起溶血);乙醚麻醉(注意:不要過度麻醉致小鼠死亡)用手術(shù)剪刀或者鑷子迅速摘下小鼠的眼睛,同時用離心管接取血液,約1mL左右;將血室溫放置30min,凝固
5、;2,000rpm離心10min;吸取血清,置1.5mL離心管,做好標記,-5℃冰箱保存。解讀《中國甲狀腺疾病診治指南》前言甲狀腺疾病是內(nèi)分泌系統(tǒng)的常見疾病甲狀腺疾病的規(guī)范化診治是國際國內(nèi)趨勢制定《指南》有利于規(guī)范和提高我國甲狀腺疾病的臨床診治水平,促進國人健康2005年10月開始編撰《指南》17位內(nèi)分泌專家、2位核醫(yī)學專家前言《指南》分六部分:甲狀腺疾病實驗室及輔助檢查甲狀腺功能亢進癥甲狀腺功能減退癥碘缺乏病甲狀腺炎甲狀腺結(jié)節(jié)和甲狀腺良惡性腫瘤第1部分前言原則:實用性公認性先進性時效性甲狀腺疾病實驗室及輔助檢查甲狀腺功能亢進癥甲狀腺功能減退癥甲狀腺疾病
6、實驗室及輔助檢查共11項內(nèi)容一、血清甲狀腺激素測定(TT4TT3FT3FT4)二、血清促甲狀腺激素(TSH)測定三、甲狀腺自身抗體測定(TPOAbTgAbTRAb)四、甲狀腺球蛋白測定五、降鈣素(calcitonin,CT)測定甲狀腺疾病實驗室及輔助檢查六、尿碘測定七、TRH刺激試驗八、甲狀腺細針穿刺和細胞學檢查(FNAC)九、甲狀腺超聲十、甲狀腺核素檢查甲狀腺攝131I功能檢查甲狀腺核素靜態(tài)顯像甲狀腺腫瘤核素顯像甲狀腺正電子發(fā)射斷層顯像(PET)十一、CT和MRI血清甲狀腺激素測定(TT4TT3FT3FT4)甲狀腺素(T4)全部由甲狀腺合成三碘甲狀腺原氨
7、酸(T3)20%直接來自甲狀腺,80%在外周組織中由T4而來。T3是甲狀腺激素在組織實現(xiàn)生物作用的活性形式。循環(huán)中的T4僅有0.02%為游離狀態(tài)(FT4)循環(huán)中的T3約0.3%為游離狀態(tài)(FT3)結(jié)合型甲狀腺激素是激素的儲存和運輸形式,游離型甲狀腺激素是甲狀腺激素的活性部分,直接反應(yīng)甲狀腺的功能狀態(tài)。血清甲狀腺激素測定(TT4TT3FT3FT4)正常成人血清TT464-154nmol/L正常成人血清TT31.2-2.9nmol/L正常成人血清FT49-25pmol/L正常成人血清FT32.1-5.4pmol/L不同方法及實驗室測定結(jié)果差異較大,各地、各實驗
8、室應(yīng)建立自己的參考值范圍。目前大多數(shù)臨床實驗室測定的FT4和FT3