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1、小鼠的采血小鼠最大安全采血量(0.2mL)最小致死采血量(0.3mL)取少量血:尾靜脈采血,斷尾采血,眼底靜脈叢采血(做血樣的檢測(cè))取中量血:心臟取血,斷頭取血取大量血:摘眼球取血1.剪尾采血當(dāng)所需血量很少時(shí)采用本法。溫水浸泡,消毒,用銳器(刀或剪刀)割去尾尖0.3-0.5cm,也可在尾部作一橫切口,割破尾動(dòng)脈或靜脈,收集血液。每鼠一般可采血10余次以上。小鼠每次可取血0.1mL。一、常用的小鼠采血方法6.頸動(dòng)(靜)脈采血先將動(dòng)物仰位固定,切開頸部皮膚,分離皮下結(jié)締組織,使頸靜脈充分暴露,可用注射器吸出血液。在氣管兩側(cè)分離出頸動(dòng)脈,離心端結(jié)扎,向心端剪口將
2、血滴入試管內(nèi)。7.腹主動(dòng)脈采血最好先將動(dòng)物麻醉,仰臥固定在手術(shù)架上,從腹正中線皮膚切開腹腔,使腹主動(dòng)脈清楚暴露。用注射器吸出血液,防止溶血?;蛴脽o齒鑷子剝離結(jié)締組織,夾住動(dòng)脈近心端,用尖頭手術(shù)剪刀,剪斷動(dòng)脈,使血液噴入盛器。8.股動(dòng)(靜)脈采血先由助手握住動(dòng)物,采血者左手拉直動(dòng)物下肢,使靜脈充盈?;蛘咭圆珓?dòng)為指標(biāo),右手用注射器刺入血管。體重15-20g小鼠采血約0.2-0.8mL。血液包含有四種成分:血漿,紅細(xì)胞,白細(xì)胞,血小板。血漿約占血液的55%,是水,糖,脂肪,蛋白質(zhì),鉀鹽和鈣鹽的混合物。血細(xì)胞和血小板組成血液的另外45%。血漿的主要作用是運(yùn)載血細(xì)胞
3、,運(yùn)輸維持人體生命活動(dòng)所需的物質(zhì)和體內(nèi)產(chǎn)生的廢物等。血漿相當(dāng)于結(jié)締組織的細(xì)胞間質(zhì)。是血液的重要組成分,呈淡黃色液體(因含有膽紅素)。離開血管的全血經(jīng)抗凝處理后,通過離心沉淀,所獲得的不含細(xì)胞成分的液體,即血漿。血漿的化學(xué)成分中,水分占90~92%,溶質(zhì)以血漿蛋白為主。血漿蛋白是多種蛋白質(zhì)的總稱,用鹽析法可將其分為白蛋白、球蛋白和纖維蛋白原三類。血清是指不加抗凝劑的全血經(jīng)過靜置一段時(shí)間,血細(xì)胞沉降后的上層液體,不含凝血酶原和纖維蛋白原,但含有少量血液凝固時(shí)由血管內(nèi)皮細(xì)胞和血小板釋放出來的化學(xué)物質(zhì),血清不可以再凝。血清含有糖類,無機(jī)鹽及抗體等.二、尸體、廢棄物
4、的處理1、受試動(dòng)物尚未死亡,應(yīng)采用安樂死處理。2、動(dòng)物尸體與廢棄物處理:實(shí)驗(yàn)廢棄物:分類收集,無害處理。無毒性受試驗(yàn)物或無重大疫病的動(dòng)物尸體,集中收集放入尸體袋冷凍,待焚燒處理。有毒性受試驗(yàn)物的動(dòng)物尸體,應(yīng)做毒性消除或中和處理。重大疫病的動(dòng)物尸體,應(yīng)該在達(dá)到相應(yīng)生物安全的滅菌消毒器中進(jìn)行消毒處理后,再冷凍保存焚燒處理。三、實(shí)驗(yàn)內(nèi)容取免疫后的小鼠,用酒精棉球擦拭小鼠面部(確保小鼠的毛是濕的,以避免其掉入容器引起溶血);乙醚麻醉(注意:不要過度麻醉致小鼠死亡)用手術(shù)剪刀或者鑷子迅速摘下小鼠的眼睛,同時(shí)用離心管接取血液,約1mL左右;將血室溫放置30min,凝固
5、;2,000rpm離心10min;吸取血清,置1.5mL離心管,做好標(biāo)記,-5℃冰箱保存。解讀《中國甲狀腺疾病診治指南》前言甲狀腺疾病是內(nèi)分泌系統(tǒng)的常見疾病甲狀腺疾病的規(guī)范化診治是國際國內(nèi)趨勢(shì)制定《指南》有利于規(guī)范和提高我國甲狀腺疾病的臨床診治水平,促進(jìn)國人健康2005年10月開始編撰《指南》17位內(nèi)分泌專家、2位核醫(yī)學(xué)專家前言《指南》分六部分:甲狀腺疾病實(shí)驗(yàn)室及輔助檢查甲狀腺功能亢進(jìn)癥甲狀腺功能減退癥碘缺乏病甲狀腺炎甲狀腺結(jié)節(jié)和甲狀腺良惡性腫瘤第1部分前言原則:實(shí)用性公認(rèn)性先進(jìn)性時(shí)效性甲狀腺疾病實(shí)驗(yàn)室及輔助檢查甲狀腺功能亢進(jìn)癥甲狀腺功能減退癥甲狀腺疾病
6、實(shí)驗(yàn)室及輔助檢查共11項(xiàng)內(nèi)容一、血清甲狀腺激素測(cè)定(TT4TT3FT3FT4)二、血清促甲狀腺激素(TSH)測(cè)定三、甲狀腺自身抗體測(cè)定(TPOAbTgAbTRAb)四、甲狀腺球蛋白測(cè)定五、降鈣素(calcitonin,CT)測(cè)定甲狀腺疾病實(shí)驗(yàn)室及輔助檢查六、尿碘測(cè)定七、TRH刺激試驗(yàn)八、甲狀腺細(xì)針穿刺和細(xì)胞學(xué)檢查(FNAC)九、甲狀腺超聲十、甲狀腺核素檢查甲狀腺攝131I功能檢查甲狀腺核素靜態(tài)顯像甲狀腺腫瘤核素顯像甲狀腺正電子發(fā)射斷層顯像(PET)十一、CT和MRI血清甲狀腺激素測(cè)定(TT4TT3FT3FT4)甲狀腺素(T4)全部由甲狀腺合成三碘甲狀腺原氨
7、酸(T3)20%直接來自甲狀腺,80%在外周組織中由T4而來。T3是甲狀腺激素在組織實(shí)現(xiàn)生物作用的活性形式。循環(huán)中的T4僅有0.02%為游離狀態(tài)(FT4)循環(huán)中的T3約0.3%為游離狀態(tài)(FT3)結(jié)合型甲狀腺激素是激素的儲(chǔ)存和運(yùn)輸形式,游離型甲狀腺激素是甲狀腺激素的活性部分,直接反應(yīng)甲狀腺的功能狀態(tài)。血清甲狀腺激素測(cè)定(TT4TT3FT3FT4)正常成人血清TT464-154nmol/L正常成人血清TT31.2-2.9nmol/L正常成人血清FT49-25pmol/L正常成人血清FT32.1-5.4pmol/L不同方法及實(shí)驗(yàn)室測(cè)定結(jié)果差異較大,各地、各實(shí)驗(yàn)
8、室應(yīng)建立自己的參考值范圍。目前大多數(shù)臨床實(shí)驗(yàn)室測(cè)定的FT4和FT3