野菊花總黃酮提取工藝的響應(yīng)面設(shè)計優(yōu)化

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1、野菊花總黃酮提取工藝的響應(yīng)面設(shè)計優(yōu)化【關(guān)鍵詞】響應(yīng)面；,,野菊花；,,黃酮　　摘要：目的優(yōu)化野菊花總黃酮提取工藝。方法在分析單因素的基礎(chǔ)上，以總黃酮得率為響應(yīng)值，采用響應(yīng)面實驗設(shè)計方法（RSD）對其提取工藝進行研究。結(jié)果最佳工藝參數(shù)為乙醇濃度56.6%，提取溫度80℃，液固比為19.6，提取時間為3.2h，提取1次，該工藝條件可使總黃酮得率達4.64%。結(jié)論該工藝條件可為工業(yè)生產(chǎn)提供參考數(shù)據(jù)。響應(yīng)面試驗設(shè)計法可在連續(xù)范圍內(nèi)進行分析，優(yōu)于現(xiàn)在普遍采用的只能分析離散條件的正交實驗設(shè)計?！　￡P(guān)鍵詞：響應(yīng)面；野菊花；黃酮　　

2、TheOptimalExtractingConditionsforChrysanthemumIndicumL.byResponseSurfaceDesign(RSD)　　Abstract：ObjectiveToexaminetheprocedureforthechemicalextractionoftheflavonoidsinChrysanthemumindicumL.MethodsTheprocedurefortheextractionedumparameters,ent.ResultsItpleixedarou

3、ndat80℃for3.2h.Therecoveryyieldofflavonoidsgotto4.64%onceextraction.ConclusionTheprocedureoftheextractioncanbehelpfultothefactoryscaleproduction.　　KeyumindicumL.;Flavonoids　　野菊花［1］為菊科植物野菊ChrysanthemumindicumL.北野菊C．borealeMak．或巖香菊C.javandulaefolium(Fish)Mak.的頭狀花

4、序。秋冬二季花初開放時采摘，曬干或蒸后曬干入藥，性涼，味苦、辛，歸肺肝經(jīng)，具有疏風清熱、消腫解毒的功效，是一種臨床歷史長達上千年的常用中藥。應(yīng)用現(xiàn)代中藥化學的分析手段發(fā)現(xiàn)在野菊花中蘊含著豐富的生物類黃酮化合物，體現(xiàn)出野菊花在降血壓，改善心血管循環(huán)，清除超氧陰離子自由基抗衰老，防護紫外線等方面的功效。為了科學、充分地利用野菊花的黃酮資源，采用響應(yīng)面試驗設(shè)計方法（RSD）對影響總黃酮得率的關(guān)鍵因素進行條件優(yōu)化，給大批量生產(chǎn)提供參考數(shù)據(jù)。響應(yīng)面試驗設(shè)計方法RSD［2］是利用合理的試驗設(shè)計并通過實驗得到的一定數(shù)據(jù),采用多元二

5、次回歸方程來擬合因素與響應(yīng)值之間的函數(shù)關(guān)系，通過對回歸方程的分析來尋求最優(yōu)工藝參數(shù)，解決多變量問題的一種統(tǒng)計方法。隨著計算機的發(fā)展,它已成為精度高、應(yīng)用廣并具有實用價值的優(yōu)化技術(shù)?！　?儀器與試劑　　1.1儀器756PC型可見-紫外分光光度儀:上海光譜儀器有限公司，F(xiàn)A2004N電子天平:上海精密科學儀器有限公司?！　?.2試劑與樣品蘆丁對照品，購自中國（天津）藥品生物制品檢定所；野菊花中藥飲片購自天津君福大藥房（產(chǎn)地為河北，經(jīng)中醫(yī)醫(yī)師張淑英確認為中藥野菊花正品）其它試劑均為分析純?！　?方法　　2.1定量原理［3］

6、根據(jù)《中國藥典》（2000年版）及當前普遍采用的“NaNO2AlNO3NaOH”體系?！　?.2標準曲線的制定　　2.2.1對照品試液的配制稱量105℃下烘干至恒重的蘆丁對照品0.0620g，用適量95%乙醇充分溶解，放冷，轉(zhuǎn)移至100ml容量瓶中，用95%乙醇定容至刻度，搖勻做為對照品儲備試液。此試液中蘆丁濃度為0.62g/L。　　2.2.2標準曲線的繪制精密量取對照品試液0.0，1.0，1.5，2.0，2.5，3.0ml，分別置于25ml量瓶中，各加95％乙醇至6ml，加5%亞硝酸鈉溶液1ml，使混勻，放置6mi

7、n。加10%硝酸鋁溶液1ml，搖勻，放置6min。加5%氫氧化鈉溶液5ml，用95％乙醇定容至刻度，搖勻，靜置。15min后測試500nm下的吸光度值，以不含蘆丁的空白溶液為參比。將所得吸光度值與濃度的關(guān)系列于表1?！　”?蘆丁標準液濃度與吸光度值（略）　　應(yīng)用最小二乘法將表1中的蘆丁標準液濃度與吸光度值做一元線性回歸分析，由MicrosoftExcel獲得回歸曲線。結(jié)果見圖1。　　圖1蘆丁吸光度與濃度標準曲線（略）　　3影響黃酮得率的單因素考慮　　3.1乙醇濃度的確定每次稱取15g野菊花粗粉，在80℃，料液比1∶2

8、0，浸提2h，浸提一次的條件下，依次以質(zhì)量分數(shù)為30%~100%的乙醇進行浸提，冰水浴快速冷卻后抽濾。取10ml續(xù)濾液用提取時的乙醇溶液定容至50ml。量取3ml顯色后定容至25ml，在500nm下測得的吸光度與乙醇濃度的關(guān)系見圖2。從圖2可以看出，在乙醇濃度為50%～70%內(nèi)對應(yīng)吸光度值有個小平臺。這種現(xiàn)象反映出野菊花中所含的生物黃酮類化合物