野菊花總黃酮提取工藝的響應(yīng)面設(shè)計(jì)優(yōu)化

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1、野菊花總黃酮提取工藝的響應(yīng)面設(shè)計(jì)優(yōu)化【關(guān)鍵詞】響應(yīng)面；,,野菊花；,,黃酮　　摘要：目的優(yōu)化野菊花總黃酮提取工藝。方法在分析單因素的基礎(chǔ)上，以總黃酮得率為響應(yīng)值，采用響應(yīng)面實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)方法（RSD）對(duì)其提取工藝進(jìn)行研究。結(jié)果最佳工藝參數(shù)為乙醇濃度56.6%，提取溫度80℃，液固比為19.6，提取時(shí)間為3.2h，提取1次，該工藝條件可使總黃酮得率達(dá)4.64%。結(jié)論該工藝條件可為工業(yè)生產(chǎn)提供參考數(shù)據(jù)。響應(yīng)面試驗(yàn)設(shè)計(jì)法可在連續(xù)范圍內(nèi)進(jìn)行分析，優(yōu)于現(xiàn)在普遍采用的只能分析離散條件的正交實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)?！　￡P(guān)鍵詞：響應(yīng)面；野菊花；黃酮　　

2、TheOptimalExtractingConditionsforChrysanthemumIndicumL.byResponseSurfaceDesign(RSD)　　Abstract：ObjectiveToexaminetheprocedureforthechemicalextractionoftheflavonoidsinChrysanthemumindicumL.MethodsTheprocedurefortheextractionedumparameters,ent.ResultsItpleixedarou

3、ndat80℃for3.2h.Therecoveryyieldofflavonoidsgotto4.64%onceextraction.ConclusionTheprocedureoftheextractioncanbehelpfultothefactoryscaleproduction.　　KeyumindicumL.;Flavonoids　　野菊花［1］為菊科植物野菊ChrysanthemumindicumL.北野菊C．borealeMak．或巖香菊C.javandulaefolium(Fish)Mak.的頭狀花

4、序。秋冬二季花初開放時(shí)采摘，曬干或蒸后曬干入藥，性涼，味苦、辛，歸肺肝經(jīng)，具有疏風(fēng)清熱、消腫解毒的功效，是一種臨床歷史長(zhǎng)達(dá)上千年的常用中藥。應(yīng)用現(xiàn)代中藥化學(xué)的分析手段發(fā)現(xiàn)在野菊花中蘊(yùn)含著豐富的生物類黃酮化合物，體現(xiàn)出野菊花在降血壓，改善心血管循環(huán)，清除超氧陰離子自由基抗衰老，防護(hù)紫外線等方面的功效。為了科學(xué)、充分地利用野菊花的黃酮資源，采用響應(yīng)面試驗(yàn)設(shè)計(jì)方法（RSD）對(duì)影響總黃酮得率的關(guān)鍵因素進(jìn)行條件優(yōu)化，給大批量生產(chǎn)提供參考數(shù)據(jù)。響應(yīng)面試驗(yàn)設(shè)計(jì)方法RSD［2］是利用合理的試驗(yàn)設(shè)計(jì)并通過(guò)實(shí)驗(yàn)得到的一定數(shù)據(jù),采用多元二

5、次回歸方程來(lái)擬合因素與響應(yīng)值之間的函數(shù)關(guān)系，通過(guò)對(duì)回歸方程的分析來(lái)尋求最優(yōu)工藝參數(shù)，解決多變量問(wèn)題的一種統(tǒng)計(jì)方法。隨著計(jì)算機(jī)的發(fā)展,它已成為精度高、應(yīng)用廣并具有實(shí)用價(jià)值的優(yōu)化技術(shù)。　　1儀器與試劑　　1.1儀器756PC型可見-紫外分光光度儀:上海光譜儀器有限公司，F(xiàn)A2004N電子天平:上海精密科學(xué)儀器有限公司?！　?.2試劑與樣品蘆丁對(duì)照品，購(gòu)自中國(guó)（天津）藥品生物制品檢定所；野菊花中藥飲片購(gòu)自天津君福大藥房（產(chǎn)地為河北，經(jīng)中醫(yī)醫(yī)師張淑英確認(rèn)為中藥野菊花正品）其它試劑均為分析純。　　2方法　　2.1定量原理［3］

6、根據(jù)《中國(guó)藥典》（2000年版）及當(dāng)前普遍采用的“NaNO2AlNO3NaOH”體系?！　?.2標(biāo)準(zhǔn)曲線的制定　　2.2.1對(duì)照品試液的配制稱量105℃下烘干至恒重的蘆丁對(duì)照品0.0620g，用適量95%乙醇充分溶解，放冷，轉(zhuǎn)移至100ml容量瓶中，用95%乙醇定容至刻度，搖勻做為對(duì)照品儲(chǔ)備試液。此試液中蘆丁濃度為0.62g/L?！　?.2.2標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制精密量取對(duì)照品試液0.0，1.0，1.5，2.0，2.5，3.0ml，分別置于25ml量瓶中，各加95％乙醇至6ml，加5%亞硝酸鈉溶液1ml，使混勻，放置6mi

7、n。加10%硝酸鋁溶液1ml，搖勻，放置6min。加5%氫氧化鈉溶液5ml，用95％乙醇定容至刻度，搖勻，靜置。15min后測(cè)試500nm下的吸光度值，以不含蘆丁的空白溶液為參比。將所得吸光度值與濃度的關(guān)系列于表1。　　表1蘆丁標(biāo)準(zhǔn)液濃度與吸光度值（略）　　應(yīng)用最小二乘法將表1中的蘆丁標(biāo)準(zhǔn)液濃度與吸光度值做一元線性回歸分析，由MicrosoftExcel獲得回歸曲線。結(jié)果見圖1?！　D1蘆丁吸光度與濃度標(biāo)準(zhǔn)曲線（略）　　3影響黃酮得率的單因素考慮　　3.1乙醇濃度的確定每次稱取15g野菊花粗粉，在80℃，料液比1∶2

8、0，浸提2h，浸提一次的條件下，依次以質(zhì)量分?jǐn)?shù)為30%~100%的乙醇進(jìn)行浸提，冰水浴快速冷卻后抽濾。取10ml續(xù)濾液用提取時(shí)的乙醇溶液定容至50ml。量取3ml顯色后定容至25ml，在500nm下測(cè)得的吸光度與乙醇濃度的關(guān)系見圖2。從圖2可以看出，在乙醇濃度為50%～70%內(nèi)對(duì)應(yīng)吸光度值有個(gè)小平臺(tái)。這種現(xiàn)象反映出野菊花中所含的生物黃酮類化合物