強(qiáng)化胰島素治療對2型糖尿病大鼠胰島β細(xì)胞凋亡的影響的論文

《強(qiáng)化胰島素治療對2型糖尿病大鼠胰島β細(xì)胞凋亡的影響的論文》由會員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫。

1、強(qiáng)化胰島素治療對2型糖尿病大鼠胰島β細(xì)胞凋亡的影響的論文強(qiáng)化胰島素治療對2型糖尿病大鼠胰島β細(xì)胞凋亡的影響【關(guān)鍵詞】2型糖尿病;大鼠;強(qiáng)化胰島素治療;胰島;凋亡【摘要】目的觀察強(qiáng)化胰島素治療對2型糖尿病大鼠胰島β細(xì)胞凋亡的影響。方法將36只)發(fā)病的重要環(huán)節(jié)之一，近年來受到越來越多的重視，有觀點(diǎn)認(rèn)為細(xì)胞凋亡導(dǎo)致胰島β細(xì)胞功能受損，比胰島素抵抗(ir)在t2dm的發(fā)病過程中起著更為重要的作用〔1，2〕。.cOm本研究旨在觀察強(qiáng)化胰島素治療對t2dm大鼠胰島β細(xì)胞凋亡的影響?！　?材料與方法　　1.1動物模型的建立和分組　　清潔級遠(yuǎn)交群雄性g/kg，注射3d時若空腹血糖(fpg)>7

2、.8mmol/l及胰島素敏感指數(shù)(isi)降低，提示t2dm大鼠造模成功〔3〕。將造模成功大鼠再隨機(jī)分為2個亞組，即dm對照組(dc，n=12)，腹部皮下注射生理鹽水;胰島素治療組(di，n=12)，每日17～18時在腹部皮下注射諾和靈n2～3u/d。根據(jù)上午8時血糖結(jié)果，每3d調(diào)整胰島素用量，使血糖維持在nc組的水平，治療共4g/kg)，從心臟取血獲得標(biāo)本。血糖測定采用葡萄糖氧化酶法，fins、cp采用放免法測定，游離脂肪酸(ffa)采用試劑盒測定?！　?.2.2動物處死及組織標(biāo)本采集　　治療4g/kg)腹腔內(nèi)注射麻醉，仰臥位固定于手術(shù)臺，打開腹腔，立即分離并取出胰腺，一部分置于1

3、0%多聚甲醛中固定，另留取少量標(biāo)本切成約1×1×1mm3大小的組織塊，置于70%酒精內(nèi)。　　1.2.3胰島β細(xì)胞凋亡的測定　　分別采用dutp缺口標(biāo)記技術(shù)(tunel)和流式細(xì)胞術(shù)(fcm)檢測胰島β細(xì)胞的凋亡?！　?.3統(tǒng)計(jì)學(xué)分析　　用spss12.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行處理，數(shù)據(jù)以x±s表示，測定結(jié)果進(jìn)行正態(tài)性及方差齊性檢驗(yàn)，偏態(tài)分布變量胰島素取自然對數(shù)轉(zhuǎn)為正態(tài)分布后進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，兩組間比較采用t檢驗(yàn)，多組間比較采用方差分析?！　?結(jié)果　　2.1大鼠脂肪乳灌胃第10天的b檢測的各組凋亡胰島β細(xì)胞　　3討論　　研究證實(shí)，無t2dm的肥胖者通過增加胰島β細(xì)胞的數(shù)量來適應(yīng)ir，而肥胖的t2d

4、m患者則有60%的胰島β細(xì)胞數(shù)量缺失。無論是肥胖還是非肥胖的t2dm患者，與其體重指數(shù)相當(dāng)?shù)姆莟2dm人群相比，胰島β細(xì)胞數(shù)量明顯減少，胰島β細(xì)胞凋亡發(fā)生率也明顯高于正常人群，在肥胖和消瘦的t2dm患者中胰島β細(xì)胞的凋亡頻率分別增加了3倍和10倍〔4〕。上述結(jié)果提示胰島β細(xì)胞凋亡使其數(shù)量減少在t2dm患者胰島β細(xì)胞功能衰竭中發(fā)揮了重要作用?！　〖?xì)胞凋亡的檢測方法有多種：①形態(tài)學(xué)觀察;②流式細(xì)胞術(shù);③原位末端標(biāo)記技術(shù)，包括tunel和inst技術(shù);④瓊脂糖凝膠電泳;⑤凋亡相關(guān)蛋白分析;⑥凋亡酶學(xué)分析等。在進(jìn)行凋亡有關(guān)的研究時，需要2～3種以上的方法聯(lián)合應(yīng)用〔5〕。tunel技術(shù)是199

5、2年由gavrieli等〔6〕首次提出的一種可進(jìn)行原位檢測凋亡細(xì)胞的分子生物學(xué)免疫組織化學(xué)方法，它比瓊脂糖凝膠電泳法更加直觀、準(zhǔn)確和快速〔7〕。fcm是目前用于檢測凋亡細(xì)胞最靈敏的方法之一，可以達(dá)到同時定性定量的要求?！　i等研究發(fā)現(xiàn)，糖尿病大鼠予以胰島素治療后，β細(xì)胞的胰島素分泌功能及β細(xì)胞的凋亡明顯改善〔8〕。本研究顯示在強(qiáng)化胰島素治療4發(fā)生的作用?！　≡趖2dm，高血糖、高脂血癥等都是誘導(dǎo)胰島β細(xì)胞凋亡的主要因素。研究表明，血脂紊亂、血清ffa升高，既引起細(xì)胞胰島素分泌功能缺陷，又導(dǎo)致ir的發(fā)生和胰島β細(xì)胞凋亡增加。本研究顯示大鼠注射stz第3天，與nc組比較，dc組血清ff

6、a出現(xiàn)上升趨勢，表明t2dm大鼠出現(xiàn)了高ffa血癥;di組血清ffa顯著低于dc組，提示強(qiáng)化胰島素治療能夠改善與胰島β細(xì)胞功能關(guān)系密切的高ffa血癥，改善t2dm大鼠的血脂紊亂。另有研究表明脂質(zhì)對β細(xì)胞的毒性作用隨葡萄糖濃度的增加而增加，降低血糖水平脂毒性也隨之減弱〔9，10〕，即高脂對組織的損傷作用不是獨(dú)立存在，而是與之共存的高糖環(huán)境密切相關(guān)。有研究證明〔11，12〕ffa對胰島素基因表達(dá)的影響取決于葡萄糖濃度，在低糖濃度時，胰島素的基因表達(dá)正常，而在高糖濃度時卻明顯下降?！　【C上所述，強(qiáng)化胰島素治療可保護(hù)t2dm大鼠胰島β細(xì)胞凋亡，其作用機(jī)制與降低脂毒性、糖毒性相關(guān)，具體機(jī)制仍有

7、待進(jìn)一步研究?！?/p>