根黃酮對亞急性衰老模型小鼠抗氧化作用的論文

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1、根黃酮對亞急性衰老模型小鼠抗氧化作用的論文【摘要】目的：考察葛根黃酮對衰老模型小鼠抗氧化能力的影響。方法：用d半乳糖制備衰老模型小鼠，分為正常對照組、模型組、陽性對照組、高、低劑量組，檢測各組小鼠血清丙二醛(mda)、超氧化物歧化酶(sod)和谷胱甘肽過氧化物酶(gsh—px)水平變化。結(jié)果：葛根黃酮能顯著降低衰老小鼠血清mda水平，同時可提高sod和gsh—px活力水平。結(jié)論：葛根黃酮對亞急性衰老模型小鼠具有抗氧化作用。【關鍵詞】葛根黃酮;抗氧化;亞急性衰老模型d半乳糖致小鼠亞急性衰老模型因其衰老變化明顯，模型穩(wěn)定，在抗衰老研

2、究中被廣泛應用。一般認為，d半乳糖引起的代謝紊亂使機體過氧化反應增強是其致老化反應的重要因素。葛根黃酮(puerarinflavonoid)系葛根中的主要成份之一，葛根始載于《神農(nóng)本草經(jīng)》,為豆科植物野葛和粉葛的干燥根，具有解肌退熱、生津透疹、升陽止瀉的功效。葛根主要有效成分為葛根黃酮和大豆苷元。葛根黃酮藥理作用研究較多，臨床應用非常廣泛，對心腦血管疾病、視網(wǎng)膜疾病等具有良好療效。體外研究表明[1-4]，葛根黃酮具有較強的抗氧化能力，能明顯清除·oh、dpph·自由基，可用于防止生物膜的氧化損傷。本研究采用d半乳糖致小鼠亞急性衰

3、老模型，以觀察葛根黃酮對衰老模型小鼠抗氧化能力的影響?！　?材料與方法　　1.1葛根黃酮的提取[5]取葛根藥材粉碎成粗粉，置圓底燒瓶中，加95%乙醇回流1h，抽濾，保留濾液，藥渣加95%乙醇回流1h，抽濾，濾液合并，回收乙醇并濃縮成膏狀，真空干燥得粗提物，將粗提物加入蒸餾水后加熱煮沸，冷卻到室溫過濾，再將濾液中加入nac1后攪拌溶解，靜置2d析出白色沉淀，過濾出沉淀并用少量水洗滌，得葛根黃酮純品。.　　1.2試劑與儀器陽性對照藥維生素e膠丸(浙江醫(yī)藥股份有限公司新昌制藥廠，批號20090206);d(+)半乳糖(上海君創(chuàng)生物科技有限

4、公司);sod試劑盒(南京建成生物工程研究所，批號20090102);mda試劑盒(南京建成生物工程研究所，批號20081205);gsh—px試劑盒(南京建成生物工程研究所，批號20090209);tdl5000低溫冷凍離心機(上海安亭科學儀器廠);tu1901紫外可見分光光度計(北京普析通用);電熱恒溫水浴鍋(常州國華電器有限公司);萬分之一電子天平(賽多利斯丹佛公司)。超氧化物歧化酶(sod)活性、丙二醛(mda)、gsh—px含量測定均按試劑盒說明書測定?！　?.3動物分組與處理健康昆明小鼠75只(實驗動物中心提供)，體重

5、(18±2)g，雌雄各半，喂養(yǎng)普通飼料適應1da后隨機分為5組，每組15只，雌雄各半。組間體重、血清mda水平無明顯差異。5組分別為正常組(腹腔注射(ip)生理鹽水+灌胃(ig)蒸餾水)，衰老模型組(ipd(+)半乳糖200mg·kg-1+ig蒸餾水)，低劑量組(ipd(+)半乳糖200mg·kg-1+ig葛根黃酮50mg·kg-1)，高劑量組(ipd(+)半乳糖200mg·kg-1+ig葛根黃酮150mg·kg-1)，陽性對照組(ipd(+)半乳糖200mg·kg-1+ig維生素e100mg·kg-1)。　　1.4標本采集本實驗用

6、昆明小鼠ipd(+)半乳糖造成衰老模型，ipd(+)半乳糖5da高于正常對照組，但無統(tǒng)計學意義;當時間增至7da明顯高于正常，兩組數(shù)據(jù)比較有顯著意義，故實驗時間定為7da含量的影響　　結(jié)果見表1。mda可反映機體內(nèi)脂質(zhì)過氧化的程度，間接反映細胞受損的程度。血清mda測定數(shù)據(jù)顯示：模型組血清脂質(zhì)過氧化物mda含量比正常飼料組有明顯增高(p<0.001)，陽性對照組及高劑量組均能明顯降低血清mda水平，與模型組比較均有顯著性意義(p<0.01);低劑量組血清mda與模型組比較有所降低，但無統(tǒng)計學意義(p>0.05)?！?/p>

7、　2.2葛根黃酮對衰老模型小鼠血清超氧化物歧化酶(sod)含量的影響　　結(jié)果見表1。sod對機體的氧化和抗氧化平衡起著至關重要的作用。血清sod測定數(shù)據(jù)顯示，模型組血清sod含量與正常飼料組相比有顯著性差異(p<0.001)，陽性對照組及高劑量組均能明顯升高血清sod活力水平，與模型組比較均有顯著統(tǒng)計學意義(p<0.05)，低劑量組血清sod與模型組比較有所升高，但無統(tǒng)計學意義(p>0.05)?！　?.4葛根黃酮對衰老模型小鼠血清gshpx含量的影響　　gshpx是機體內(nèi)廣泛存在的一種重要的催化過氧化氫分解的酶

8、。特異性催化還原型谷胱甘肽(gsh)對過氧化氫的還原反應，發(fā)揮保護細胞膜結(jié)構(gòu)和功能完整的作用,gshpx的活性高低可影響小鼠體內(nèi)抗氧化能力的強弱。血清gshpx測定數(shù)據(jù)顯示，模型組血清gshpx含量與正常飼料組相比有顯著性差異(