鉤藤散浸膏對亞急性衰老模型小鼠的影響

鉤藤散浸膏對亞急性衰老模型小鼠的影響

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1、鉤藤散浸膏對亞急性衰老模型小鼠的影響黃厚才1,胡元亮2,胡春萍1,彭蘊茹1,丁永芳【摘要】目的觀察鉤藤散浸膏對衰老模型小鼠智力、乙酰膽堿酯酶(ACHE)、抗氧化酶(SOD)、自由基(MDA)的影響,探討其抗衰老作用及機制。方法小鼠隨機均分為6組,除正常對照組外,各組每天皮下注射D-半乳糖(0.05g/kg),連續(xù)注射6周。從注射的第7天開始,3個實驗組同時灌胃高、中、低劑量的鉤藤散浸膏,陽性對照組灌以維生素E(0.05g/kg)模型對照組與正常對照組每天灌胃等量的蒸餾水,連續(xù)給藥5周后測定小鼠的訓(xùn)練成績、記憶成績及血清

2、SOD、ACHE和腦組織MDA的含量變化。結(jié)果實驗組的訓(xùn)練成績顯著(P<0.05),測試成績極顯著(P<0.01)好于、血清SOD、ACHE活力極顯著(P<0.01)高于、腦MDA含量極顯著(P<0.01)低于模型對照組;與正常組比,除ACHE偏高外,其余各指標(biāo)相近。結(jié)論鉤藤散能提高抗氧化能力,降低自由基含量,增強膽堿能神經(jīng)系統(tǒng)功能,從而防止衰老?!娟P(guān)鍵詞】D-半乳糖;鉤藤散;衰老;小鼠【Abstract】ObjectiveToobservetheeffectsofGoutengsanextractonmemory,m

3、alondiadehyde(MDA),superoxidedismutase(SOD),ACHEinmicetostudytherapeuticeffectsandmechanismofGoutengsanonagingmodel.MethodsMicelydividedinto6groups.Allgroups,excepttheeserumSOD,ACHEactivitiesinGoutengsanextract-treatedmiceiceentofcholinergicnervesystem.【Keyice老年

4、癡呆是威脅人類健康的重大疾病之一,對其的防治一直是全球關(guān)注的焦點。鉤藤散源于《本事方》,由鉤藤、石膏、陳皮、麥冬、半夏、茯苓、人參、防風(fēng)、生姜、甘草、菊花等11味藥組成,原為治療肝厥頭暈之證的經(jīng)典方劑。本次實驗進(jìn)行了鉤藤散浸膏的抗衰老實驗,以觀察鉤藤散浸膏在抗衰老方面的影響及機制。1材料1.1藥品與試劑(1)鉤藤散:由本院中藥制劑室按傳統(tǒng)方法水提、濃縮、消毒等制成浸膏。臨用前每19ml鉤藤散浸膏加蒸餾水配至100ml,變成0.5g生藥/ml清膏溶液,實驗中所用劑量均以生藥量計。(2)維生素E膠丸:廈門魚肝油廠(批號:1

5、0842002)。用前將維生素E膠丸用蒸餾水按10粒/100ml蒸餾水配成溶液。(3)D-半乳糖:國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司(批號:20050121)。(4)乙酰膽堿酯酶(ACHE)活性測定試劑盒:南京建成生物工程研究所(批號:20050225)。(5)超氧化物歧化酶(SOD)活性測定試劑盒:南京建成生物工程研究所(批號:20041221)。(6)丙二醛MDA活性測定試劑盒:南京建成生物工程研究所(批號:20041224)。1.2動物清潔級KM小鼠:18-22g,雌雄各半,由中科院上海實驗動物中心提供,許可證號:SCXK

6、(滬)2002-0010。1.3儀器(1)MG-2迷宮:張家港市生物醫(yī)學(xué)儀器廠生產(chǎn)。(2)高速冷凍離心機:貝克曼產(chǎn)品。(3)721分光光度計:上海第三分析儀器廠產(chǎn)品。(4)高速分散器XHF-1:上海金達(dá)生化儀器廠產(chǎn)品。1.4實驗環(huán)境清潔級,合格證號:SYXK(蘇)2002-0007。2方法2.1分組、造模、給藥將小鼠分為6組,每組12只,雌雄各半,先進(jìn)行造模,正常對照組皮下注射等體積生理鹽水(1ml/kg),其余各組每天皮下注射D-半乳糖,0.05g/kg體重,連續(xù)注射6周。注射7天后開始給藥,實驗高劑量組每天灌胃給1

7、0g生藥/kg體重,中劑量組5g/kg,低劑量組2.5g/kg,陽性對照組每天給維生素E0.05g/kg體重,模型對照組與正常對照組每天給等量的蒸餾水,每天灌胃1次,每次0.2ml/10g體重;連續(xù)給藥5周。2.2學(xué)習(xí)訓(xùn)練[1]最后1天給藥后1h進(jìn)行學(xué)習(xí)訓(xùn)練,訓(xùn)練時,將小鼠放入Ⅰ臂起步區(qū)停留3min后給予電擊(35V),按Ⅰ→Ⅱ→Ⅲ→Ⅰ或Ⅰ→Ⅲ→Ⅱ→Ⅰ連續(xù)試驗:a項:小鼠到達(dá)安全區(qū)停留0.5min,然后取出放回原臂,1min后給予下次電擊,達(dá)到連續(xù)2次直接逃至安全區(qū)后,以逃入的安全區(qū)作為起步區(qū)進(jìn)行電擊訓(xùn)練。當(dāng)小鼠在三臂

8、均達(dá)到連續(xù)2次直接逃至安全區(qū)后,進(jìn)行b項試驗:小鼠在Ⅰ臂起步區(qū)停留1min后給予電擊,逃至安全區(qū)停留0.5min,再以此區(qū)作為起步區(qū)予以電擊,連續(xù)循環(huán)電擊訓(xùn)練(每兩次電擊之間休息1min),以小鼠連續(xù)10次(或9/10)正確反應(yīng)(直接逃入安全區(qū))作為空間辨別記憶指標(biāo),每回連續(xù)學(xué)習(xí)的電擊總次數(shù)一般不超過30次。最后將a項和b項相加作

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