蠅蛆殼聚糖對實驗性高脂血癥大鼠的降脂保肝作用

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1、蠅蛆殼聚糖對實驗性高脂血癥大鼠的降脂保肝作用【摘要】目的研究蠅蛆殼聚糖的降脂保肝作用。方法通過喂飼SD大鼠高脂飼料,建立實驗性高脂血癥模型,并用蠅蛆殼聚糖進行治療,測定血清膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白-膽固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白-膽固醇(HDL-C)含量,測定肝臟系數(shù)和肝組織中膽固醇含量,并對各組大鼠肝臟進行病理觀察。結(jié)果蠅蛆殼聚糖能顯著降低實驗性高脂血癥大鼠血清TC，TG，LDL-C水平，升高血清HDL－C水平,降低大鼠的肝臟系數(shù)及膽固醇含量,并能減輕肝細胞脂變程度。結(jié)論蠅蛆殼聚糖能調(diào)

2、節(jié)實驗性高脂血癥大鼠血脂代謝,抑制肝臟脂肪沉積,有良好的降脂保肝作用?！娟P鍵詞】蠅蛆殼聚糖實驗性高脂血癥大鼠降脂保肝甲殼素是地球上除纖維素之外最豐富的天然高分子聚合物，也是昆蟲體內(nèi)構(gòu)成昆蟲體壁的主要成分之一。將甲殼素在強堿液中加熱處理，其分子結(jié)構(gòu)中的乙酰胺基就會水解脫去乙?；?，留下游離的氨基，成為殼聚糖。殼聚糖是一種具有重要開發(fā)價值的天然多糖物質(zhì)，具有免疫調(diào)節(jié)、降低體重和膽固醇、抗腫瘤、調(diào)理腸胃、抗凝血、抗菌等多種生物活性〔1〕。高脂血癥是動脈粥樣硬化形成的原因之一已被確認，而肝臟是脂質(zhì)代謝的中心。本實驗采用高脂

3、血癥大鼠模型，觀察蠅蛆殼聚糖對血清及肝臟脂質(zhì)含量及肝臟病理形態(tài)學的影響。1材料與儀器1.1動物SD大鼠，雄性，100只，體重180～205g，由貴陽醫(yī)學院實驗動物中心提供。1.2藥品與試劑蠅蛆皮，由琨恩生物技術(shù)有限公司提供。蠅蛆殼聚糖，自制。蝦蟹殼聚糖，購自濟南海得貝生物工程有限公司。膽固醇，分析純，中國醫(yī)藥(集團)上?；瘜W試劑公司產(chǎn)品。批號：F20050303?？偰懝檀荚噭┖?、高密度脂蛋白膽固醇試劑盒、甘油三酯試劑盒、低密度脂蛋白膽固醇試劑盒，均由北京中生北控生物科技股份有限公司生產(chǎn)。1.3飼料基礎飼料，由貴陽

4、醫(yī)學院實驗動物中心提供。高脂飼料，用1％膽固醇、5％豬油、10％蛋黃粉及85％基礎飼料配制而成。1.4主要儀器OLYMPUS-AU400全自動生化分析儀；OLYMPUS顯微鏡(日本OLYMPUS)。2方法2.1分組及造模用基礎飼料適應性喂養(yǎng)SD大鼠5d后，隨機分為6組，每組10只。正常對照組每日以基礎飼料喂養(yǎng)，灌胃給等量蒸餾水；高脂模型組每日以高脂飼料喂養(yǎng)，灌胃給等量蒸餾水；殼聚糖低、中、高劑量組自造模日起給高脂飼料的同時分別灌胃蠅蛆殼聚糖300,600,900mg/kg，給藥1次/d。陽性對照組每日以基礎飼料喂

5、養(yǎng)，灌胃給蝦蟹殼聚糖600mg/kg，給藥1次/d。2.2TC，TG，HDL-C，LDL-C的測定以上各組均連續(xù)給藥4周，動物自由進水。給藥第2周，大鼠禁食不禁水12h，斷尾取血，分離血清測定TC，TG，HDL-C，LDL-C水平；于實驗結(jié)束前1天末次給藥后，大鼠禁食不禁水12h，股動脈放血處死，取血并分離血清測定TC，TG，HDL-C，LDL-C水平。2.3病理形態(tài)學觀察及肝臟脂質(zhì)測定取出肝臟并稱肝重（L處，橫切一塊肝組織，用中性福爾馬林固定，常規(guī)脫水，石蠟切片，HE染色，光鏡下觀察肝臟病理形態(tài)學改變。于剩余肝

6、臟中取組織，在蒸餾水中漂洗數(shù)次，濾紙吸干，稱重1g，放入組織勻漿器，加3ml生理鹽水勻漿10min,將漿液放入冰箱（－20℃）3～4h，進行肝臟脂質(zhì)測定。2.4統(tǒng)計學處理全部數(shù)據(jù)采用±s表示，采用SPSS13.0統(tǒng)計軟件IndependentSamplesTTest進行分析。P0.05和P0.01作為顯著性差異界值。3結(jié)果3.1蠅蛆殼聚糖對高脂模型大鼠血清血脂水平的影響給高脂飼料后，高脂模型組大鼠血清TC，TG，LDL-C含量持續(xù)顯著升高，HDL-C含量持續(xù)顯著降低，與正常對照組相比，差別有顯著性意義（P0.01

7、），表明高脂模型造模成功。給予蠅蛆殼聚糖，各劑量組TC，TG，LDL-C含量均降低，HDL-C含量均升高，除低劑量組外，與高脂模型組比較有顯著性差異（P0.01）。同時，隨著給藥時間的增加，殼聚糖抑制了因高脂飲食造成的血清TC，TG，LDL-C含量的升高，HDL-C含量的降低（見表1～2）。表1蠅蛆殼聚糖對大鼠血清TC、TG水平的影響（略）與正常對照組比較，P0.05，P0.01;與模型組比較，▲P>0.05,△P0.05,△△P0.01；n=10表2蠅蛆殼聚糖對HDL-C、LDL-C水平的影響（略）與正常

8、對照組比較，P0.05，P0.01;與模型組比較，▲P>0.05,△P0.05,△△P0.01；n=103.2蠅蛆殼聚糖對高脂模型大鼠肝臟系數(shù)及肝臟膽固醇水平的影響給高脂飼料4周，高脂模型組大鼠肝重、肝臟系數(shù)值顯著升高，肝臟膽固醇含量顯著升高,與正常對照組相比，差別有顯著性意義（P0.05），表明高脂模型造模成功。給予蠅蛆殼聚糖，各劑量組肝重、肝重/體重值均降低，其