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1、蠅蛆殼聚糖對(duì)實(shí)驗(yàn)性高脂血癥大鼠的降脂保肝作用【摘要】 目的研究蠅蛆殼聚糖的降脂保肝作用。方法通過(guò)喂飼SD大鼠高脂飼料,建立實(shí)驗(yàn)性高脂血癥模型,并用蠅蛆殼聚糖進(jìn)行治療,測(cè)定血清膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白-膽固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白-膽固醇(HDL-C)含量,測(cè)定肝臟系數(shù)和肝組織中膽固醇含量,并對(duì)各組大鼠肝臟進(jìn)行病理觀察。結(jié)果蠅蛆殼聚糖能顯著降低實(shí)驗(yàn)性高脂血癥大鼠血清TC,TG,LDL-C水平,升高血清HDL-C水平,降低大鼠的肝臟系數(shù)及膽固醇含量,并能減輕肝細(xì)胞脂變程度。
2、結(jié)論蠅蛆殼聚糖能調(diào)節(jié)實(shí)驗(yàn)性高脂血癥大鼠血脂代謝,抑制肝臟脂肪沉積,有良好的降脂保肝作用?!娟P(guān)鍵詞】蠅蛆殼聚糖實(shí)驗(yàn)性高脂血癥大鼠降脂保肝 甲殼素是地球上除纖維素之外最豐富的天然高分子聚合物,也是昆蟲(chóng)體內(nèi)構(gòu)成昆蟲(chóng)體壁的主要成分之一。將甲殼素在強(qiáng)堿液中加熱處理,其分子結(jié)構(gòu)中的乙酰胺基就會(huì)水解脫去乙?;粝掠坞x的氨基,成為殼聚糖。殼聚糖是一種具有重要開(kāi)發(fā)價(jià)值的天然多糖物質(zhì),具有免疫調(diào)節(jié)、降低體重和膽固醇、抗腫瘤、調(diào)理腸胃、抗凝血、抗菌等多種生物活性[1]。高脂血癥是動(dòng)脈粥樣硬化形成的原因之一已被確認(rèn),而
3、肝臟是脂質(zhì)代謝的中心。本實(shí)驗(yàn)采用高脂血癥大鼠模型,觀察蠅蛆殼聚糖對(duì)血清及肝臟脂質(zhì)含量及肝臟病理形態(tài)學(xué)的影響。 1材料與儀器 1.1動(dòng)物SD大鼠,雄性,100只,體重180~205g,由貴陽(yáng)醫(yī)學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供?! ?.2藥品與試劑蠅蛆皮,由琨恩生物技術(shù)有限公司提供。蠅蛆殼聚糖,自制。蝦蟹殼聚糖,購(gòu)自濟(jì)南海得貝生物工程有限公司。膽固醇,分析純,中國(guó)醫(yī)藥(集團(tuán))上?;瘜W(xué)試劑公司產(chǎn)品。批號(hào):F20050303??偰懝檀荚噭┖?、高密度脂蛋白膽固醇試劑盒、甘油三酯試劑盒、低密度脂蛋白膽固醇試劑盒,均由北
4、京中生北控生物科技股份有限公司生產(chǎn)?! ?.3飼料基礎(chǔ)飼料,由貴陽(yáng)醫(yī)學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供。高脂飼料,用1%膽固醇、5%豬油、10%蛋黃粉及85%基礎(chǔ)飼料配制而成。 1.4主要儀器OLYMPUS-AU400全自動(dòng)生化分析儀;OLYMPUS顯微鏡(日本OLYMPUS)?! ?方法 2.1分組及造模用基礎(chǔ)飼料適應(yīng)性喂養(yǎng)SD大鼠5d后,隨機(jī)分為6組,每組10只。正常對(duì)照組每日以基礎(chǔ)飼料喂養(yǎng),灌胃給等量蒸餾水;高脂模型組每日以高脂飼料喂養(yǎng),灌胃給等量蒸餾水;殼聚糖低、中、高劑量組自造模日起給高脂飼料的同時(shí)
5、分別灌胃蠅蛆殼聚糖300,600,900mg/kg,給藥1次/d。陽(yáng)性對(duì)照組每日以基礎(chǔ)飼料喂養(yǎng),灌胃給蝦蟹殼聚糖600mg/kg,給藥1次/d?! ?.2TC,TG,HDL-C,LDL-C的測(cè)定以上各組均連續(xù)給藥4周,動(dòng)物自由進(jìn)水。給藥第2周,大鼠禁食不禁水12h,斷尾取血,分離血清測(cè)定TC,TG,HDL-C,LDL-C水平;于實(shí)驗(yàn)結(jié)束前1天末次給藥后,大鼠禁食不禁水12h,股動(dòng)脈放血處死,取血并分離血清測(cè)定TC,TG,HDL-C,LDL-C水平。 2.3病理形態(tài)學(xué)觀察及肝臟脂質(zhì)測(cè)定取出肝臟并稱肝
6、重(L處,橫切一塊肝組織,用中性福爾馬林固定,常規(guī)脫水,石蠟切片,HE染色,光鏡下觀察肝臟病理形態(tài)學(xué)改變。于剩余肝臟中取組織,在蒸餾水中漂洗數(shù)次,濾紙吸干,稱重1g,放入組織勻漿器,加3ml生理鹽水勻漿10min,將漿液放入冰箱(-20℃)3~4h,進(jìn)行肝臟脂質(zhì)測(cè)定?! ?.4統(tǒng)計(jì)學(xué)處理全部數(shù)據(jù)采用±s表示,采用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)軟件IndependentSamplesTTest進(jìn)行分析。P<0.05和P<0.01作為顯著性差異界值?! ?結(jié)果 3.1蠅蛆殼聚糖對(duì)高脂模型大鼠血清血脂
7、水平的影響給高脂飼料后,高脂模型組大鼠血清TC,TG,LDL-C含量持續(xù)顯著升高,HDL-C含量持續(xù)顯著降低,與正常對(duì)照組相比,差別有顯著性意義(P<0.01),表明高脂模型造模成功。給予蠅蛆殼聚糖,各劑量組TC,TG,LDL-C含量均降低,HDL-C含量均升高,除低劑量組外,與高脂模型組比較有顯著性差異(P<0.01)。同時(shí),隨著給藥時(shí)間的增加,殼聚糖抑制了因高脂飲食造成的血清TC,TG,LDL-C含量的升高,HDL-C含量的降低(見(jiàn)表1~2)?! ”?蠅蛆殼聚糖對(duì)大鼠血清TC、TG水
8、平的影響(略) 與正常對(duì)照組比較,*P<0.05,**P<0.01;與模型組比較,▲P>0.05,△P<0.05,△△P<0.01;n=10 表2蠅蛆殼聚糖對(duì)HDL-C、LDL-C水平的影響(略) 與正常對(duì)照組比較,*P<0.05,**P<0.01;與模型組比較,▲P>0.05,△P<0.05,△△P<0.01;n=10 3.2蠅蛆殼聚糖對(duì)高脂模型大鼠肝臟系數(shù)及肝臟膽固醇水平的影響給高脂飼料4周,高脂