降糖保腎湯對(duì)糖尿病大鼠腎臟的影響論文

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1、降糖保腎湯對(duì)糖尿病大鼠腎臟的影響論文李美子,郝營麗,陳正愛【摘要】目的探討降糖保腎湯(jiangtangbaoshendecoction,JTBSD)對(duì)糖尿病(diabetesmellitus,DM)大鼠腎臟的保護(hù)作用及其機(jī)制。方法采用單次腹腔注射鏈脲佐菌素(Streptozotocin,STZ)建立DM大鼠模型。大鼠隨機(jī)分為4組:正常組、模型組、JTBSD組、鹽酸貝那普利(Benazeprilhydrochloride,BNPH)組。給藥12周,收集24h尿液測定尿肌酐,心臟采血檢測各組大鼠血尿素氮(bloodureanitrogen,B

2、UN)、血肌酐(serumcreatinine,SCr),并計(jì)算肌酐清除率(creatinineclearancerate,CCr)水平,光鏡下觀察腎組織的病理改變.freelinggroa公司產(chǎn)品;SABC試劑盒、DAB顯色試劑盒和兔抗TGF-β1多克隆抗體均為武漢博士德生物工程有限公司產(chǎn)品。1.2動(dòng)物大鼠BUN、SCr、CCr的影響隨機(jī)法將80只大鼠分為兩組:10只大鼠列為正常組,正常組腹腔注射枸櫞酸緩沖液;另70只單次腹腔注射STZ50mg/kg(臨用前用0.05mol/L枸櫞酸緩沖液溶解,pH為4.4,4℃),注射STZ72h后,尾

3、靜脈采血測空腹血糖并同時(shí)測尿糖,血糖≥16.7mmol/L,尿糖“+++”以上者列入DM觀察對(duì)象。再將造模成功的大鼠隨機(jī)分為模型組(20只)、JTBSD組(15只)和BNPH組(15只)。造模7d后,JTBSD組每天灌服JTBSD30g生藥/kg體質(zhì)量,BNPH組每天灌服BNPH10mg/kg體質(zhì)量,正常組和模型組每日灌服等體積的蒸餾水,共12周。12周末,收集大鼠24h尿液,記錄尿量和檢測尿素氮。之后,用3%水合氯醛10ml/kg腹腔麻醉,心臟采血,測大鼠的BUN、SCr水平,并計(jì)算CCr。對(duì)4組數(shù)據(jù)用SPSS11.0軟件進(jìn)行單因素方差分

4、析處理。結(jié)果見表1。表1JTBSD對(duì)STZ所致DM大鼠BUN、SCr、CCr的影響2.2JTBSD對(duì)STZ所致DM大鼠腎臟組織病理的影響實(shí)驗(yàn)大鼠分組、造模及給藥同“2.1”項(xiàng)方法。12周末,打開腹腔快速切除腎臟,左腎腎臟皮質(zhì)立即置入10%中性福爾馬林液固定,用于HE染色。結(jié)果見圖1。圖1JTBSD對(duì)STZ所致DM大鼠腎臟組織病理的影響(HE染色100×)2.3JTBSD對(duì)STZ所致DM大鼠腎臟細(xì)胞因子TGF-β1的影響實(shí)驗(yàn)大鼠分組、造模、給藥同“2.1”項(xiàng)方法。12周末,打開腹腔快速切除腎臟,左腎腎臟皮質(zhì)立即置入10%中性福爾馬林液固定,用

5、于免疫組化標(biāo)本的制備。結(jié)果見圖2。圖2JTBSD對(duì)STZ所致DM大鼠的腎臟細(xì)胞因子TGF-β1的影響(免疫組化染色,100×)3討論BUN和SCr都是機(jī)體蛋白質(zhì)代謝產(chǎn)物,它們的濃度取決于氮的分解和腎的排泄功能,在攝入食物及體內(nèi)分解代謝比較穩(wěn)定的情況下,其濃度的多少取決于腎的排泄能力。因此,血清肌酐和尿素氮濃度在一定程度上可反映腎小球的濾過功能2。DN時(shí),原有的腎臟功能遭到破壞,BUN、SCr和CCr上升,雙腎濾過率逐漸下降。TGF-β是一種多向性、多效性和多功能的細(xì)胞因子。在哺乳動(dòng)物中存在三種形式的TGF-β,分別為TGF-β1、TGF-β

6、2、TGF-β3,其中TGF-β1所占比例最高(90%),活性也最強(qiáng),是起主要作用的TGF-β因子3,4。TGF-β與其受體(TβR)結(jié)合后,通過細(xì)胞膜上的Smad蛋白可將TGF-β信號(hào)從細(xì)胞表面?zhèn)髦良?xì)胞核內(nèi),從而調(diào)節(jié)靶基因的轉(zhuǎn)錄5。TGF-β1在DN進(jìn)展中發(fā)揮著重要的作用,其介導(dǎo)腎臟病變的機(jī)制有如下幾點(diǎn):①TGF-β1刺激ECM積聚;②抑制細(xì)胞增殖、促進(jìn)細(xì)胞肥大;③促進(jìn)細(xì)胞凋亡;④改變細(xì)胞表型;⑤與其他細(xì)胞因子的相互作用。本實(shí)驗(yàn)表明JTBSD能明顯降低DM大鼠的BUN、SCr、CCr,能夠使DM大鼠腎組織系膜基質(zhì)增生減輕、腎小球硬化明顯減

7、輕、血管水腫減輕,使DM大鼠腎組織中TGF-β1表達(dá)明顯減少。JTBSD對(duì)DM大鼠腎臟具有明顯的保護(hù)作用,其作用機(jī)制可能與防止腎臟功能改變、減輕大鼠腎臟組織病理改變、抑制腎臟細(xì)胞因子TGF-β1的表達(dá)有關(guān)?!?/p>

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