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1、黃芪多糖對環(huán)磷酰胺致小鼠骨髓抑制及毒性的保護(hù)作用論文張琰,程建峰,賀建榮,覃華【摘要】目的：研究黃芪多糖（AstragalusPolyaaccharidcs,APS）對環(huán)磷酰胺(Cyclophosphamidecy,Cy)所致小鼠骨髓抑制及其毒性的保護(hù)作用.方法：用流式細(xì)胞儀測定CD4/CD8T淋巴細(xì)胞亞群及其比值，常規(guī)計數(shù)外周血白細(xì)胞數(shù)量及骨髓有核細(xì)胞數(shù)量，觀察25,50和100mgkg-1的APS對小鼠Cy骨髓抑制的保護(hù)作用；同時采用LD50劑量法，觀察APS對小鼠Cy毒性的保護(hù)作用.結(jié)果：給予3種不同劑量APS后，小鼠Cy毒性明顯下降；存活率分別提高20%，30%和50%，其中以10
2、0mgkg-1APS保護(hù)作用最為明顯(P0.05）.與對照組相比，100mgkg-1APS組小鼠Cy有核細(xì)胞和外周血白細(xì)胞數(shù)量分別升高(1.4±0.3vs2.5±0.5)×104L-1(P0.01)和(4.6±0.7vs8.6±1.2)×109L-1(P0.01).freelidecy,Cy）所致免疫低下小鼠的溶血空斑計數(shù)增加；提高小鼠粒系祖細(xì)胞數(shù)量［1］；APS還能增強NK細(xì)胞活性，刺激NK細(xì)胞增殖，增強人體免疫力和抗應(yīng)激反應(yīng)能力，對機體的免疫和造血系統(tǒng)具有明顯的保護(hù)作用［2,3］.本實驗旨在研究APS對Cy所致小鼠骨髓抑制及其毒性的保護(hù)作用，以及該作用的量效關(guān)系，為APS臨床期藥理研究
3、提供實驗依據(jù).1材料和方法1.1材料昆明種小鼠100(♀75,♂25)只，體質(zhì)量(20.0±2.0)g（中國科學(xué)院實驗動物中心提供No.005）.分籠飼養(yǎng)，采用標(biāo)準(zhǔn)化光照及喂食，自由飲水，實驗前12h開始禁食.APS由西安醫(yī)科大學(xué)藥學(xué)院天然藥化研究室提供；注射用Cy：0.2g/瓶(江蘇恒瑞醫(yī)藥股份有限公司生產(chǎn)，批號0009153)，醋氨酚(Aldrich公司產(chǎn)品，批號2005330),CD4,.freelAb購于晶美生物工程有限公司,CD4FITC(批號010640，克隆號RM45)；CD8FITC(批號MCA1108；克隆號YTS105.18).BP650型流式細(xì)胞儀，美國BP公司制造（
4、BectonDickiusohFacscan）.1.2方法1.2.1APS對Cy小鼠毒性的影響♀小鼠50只，隨機分成5組，每組10只，適應(yīng)期1gkg-1給予1.25gL-1的APS；Cy+APSⅡ組小鼠以灌胃法按50mgkg-1給予1.25gL-1的APS；Cy+APSⅢ組小鼠以灌胃法按100mgkg-1給予1.25gL-1的APS；正常組與Cy組以灌胃法給予等量注射用水；連續(xù)給藥4d后，除正常組給予注射用水外，其余4組腹腔注射10gL-1的Cy200mgkg-1.其后，觀察48h內(nèi)小鼠死亡只數(shù).1.2.2APS對CY致小鼠骨髓抑制及T淋巴細(xì)胞亞群改變的影響50只小鼠，♀,♂各半，隨機分成
5、5組，每組10只，♀,♂各5只.適應(yīng)1gkg-1給予1.25gL-1的APS；Cy+APSⅡ組小鼠以灌胃法按50mgkg-1給予2.5gL-1的APS；Cy+APSⅢ組小鼠以灌胃法按100mgkg-1給予5gL-1的APS；其連續(xù)給藥13d.于給藥后4d開始，除正常組給予等量注射用水外，其余4組均以腹腔注射方法按25mgkg-1給予1.25gL-1的Cy，1次d-1，連續(xù)7d.于給予APS后第14日，眶后取血，采用流式細(xì)胞儀檢測外周血CD4/CD8T淋巴細(xì)胞亞群數(shù)量，計算其比值，常規(guī)計數(shù)外周血白細(xì)胞數(shù)量;并取雙側(cè)股骨行骨髓有核細(xì)胞計數(shù).統(tǒng)計學(xué)處理：所有資料采用x±s表示，用單因素方差分析加
6、Dunt法組間兩兩比較，進(jìn)行顯著性檢驗.定性資料采用χ2分析進(jìn)行顯著性檢驗.2結(jié)果APS可引起Cy所致小鼠T淋巴細(xì)胞亞群的改變，同時可緩解Cy對小鼠外周血白細(xì)胞和骨髓有核細(xì)胞的抑制作用（表1），APS對CY所致小鼠的毒性有影響(表2）.表1APS對Cy致小鼠T淋巴細(xì)胞亞群、白細(xì)胞及骨髓有核細(xì)胞的影響（略）表2APS對CY小鼠毒性的保護(hù)性試驗結(jié)果（略）3討論Cy是一種免疫制劑，臨床上主要用于治療腫瘤、自身免疫性疾病和器官移植等.Cy的主要不良反應(yīng)是對免疫功能和造血系統(tǒng)具有抑制作用，對其目前尚無有效防治手段.黃芪具有補氣益衛(wèi)，托毒生肌等功效，是諸多補血或補氣方劑中的重要組成成分.我們的試驗結(jié)果
7、表明，給小鼠口服APS后，其對Cy毒性的耐受性明顯增強，依照給藥劑量的大小，存活率提高20%,30%和50%.與陽性對照組相比，100mgkg-1APS組小鼠骨髓有核細(xì)胞和外周血白細(xì)胞分別升高了86%和72%，說明APS對Cy所致的小鼠免疫和骨髓抑制毒性有明顯保護(hù)作用，且該作用呈劑量依賴性.本次實驗結(jié)果為APS的臨床期藥理研究提供了實驗依據(jù).提示臨床聯(lián)用Cy和APS治療腫瘤的疾病時，可降低Cy的毒副作用且可起到協(xié)同作用.
