沙門氏菌毒力因子1

《沙門氏菌毒力因子1》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在行業(yè)資料-天天文庫。

1、沙門氏菌毒力因子1.毒力質(zhì)粒和毒力基因毒力質(zhì)粒(Virulenceplasmdi，VP)，又稱毒力相關(guān)質(zhì)粒(Virulencesociatedplasmid)，自Jones等于1982年在鼠傷寒抄門氏菌中首先發(fā)現(xiàn)60×106Da的毒力質(zhì)粒以來，在都柏林沙門氏菌、腸炎沙門氏菌、豬霍亂沙門氏苗中都發(fā)現(xiàn)了類似的質(zhì)粒。Barrow等對雞沙門氏菌及雛雞白痢沙門氏菌中的質(zhì)粒進(jìn)行了較為深入的研究，發(fā)現(xiàn)兩者均含有大小約85kb的大質(zhì)粒，這些質(zhì)粒影響到細(xì)菌的侵襲力及其對雛雞的病死率。對于大多數(shù)沙門氏菌菌株，一般都采

2、用幾種常規(guī)方法提取質(zhì)粒：如堿變性法、SDS一鹽沉法、Friton--100裂解法、垂直板電泳一步法及蔗糖裂解法等。其中以堿變性法常用。抽取的質(zhì)粒DNA在適當(dāng)?shù)木彌_液中電泳或瓊脂凝膠電泳，再經(jīng)溴乙錠染色，在紫外光下可見不同分子量的質(zhì)粒分離成不同條帶，并與已知標(biāo)準(zhǔn)分子量的質(zhì)粒相比較，測定質(zhì)粒的分子量分離質(zhì)粒DNA可暫時(shí)保存在宿主菌株中，以便大量時(shí)增殖，而且易于用同樣的方法抽提出來，以便進(jìn)一步鑒定。使用標(biāo)記的單股質(zhì)粒DNA作為探針，通過DNA—DNA雜交試驗(yàn)，可證實(shí)不同分子量的質(zhì)粒間的同源性，可以證實(shí)特

3、定基因的分布。目前所做的基因，它編碼是抗生素抗藥性的差異。菌株的質(zhì)粒分析反映幾種不同血清型之間的相互聯(lián)系：即可揭示出其血清型所帶的質(zhì)粒是否一致，表明臨床學(xué)上的致病性，對人和肉角動(dòng)物具胄流行病學(xué)重要性的沙門氏茵都攜帶了同種質(zhì)粒，其分子量在3OMDa～6OMDa之間，包括鼠傷寒沙門氏菌、都柏林沙門氏菌、腸炎沙門氏菌、豬霍亂沙門氏菌等。（1）致病性質(zhì)粒研究Jones等對已知具有粘附和侵襲能力的6株鼠傷寒沙門氏菌進(jìn)行了質(zhì)粒DNA檢測。證明它們

4、都帶有分子量大約60MDa的質(zhì)粒，命名為CR8500的60MDa質(zhì)粒為PCF8O1。通過噬菌體轉(zhuǎn)導(dǎo)將Tn1O插入PCF8O1上得到質(zhì)粒PCF810的菌株CR8510。CR8510經(jīng)溴化乙錠和新霉素處理，得質(zhì)粒消除株CR8100和CR583。從CR-8500衍生的三株菌生化特性和對特異性噬菌體敏感性上與親代相同。將這些細(xì)菌進(jìn)行HeLa細(xì)胞粘附、侵襲作用的研究比較，發(fā)現(xiàn)60MDa質(zhì)粒消除株附著作用明顯降低。侵襲作用喪失說明該質(zhì)粒粘附于控制鼠傷寒沙門氏菌的粘附、侵襲能力上有重要作用。（2）耐藥性質(zhì)粒研究

5、王靜莉報(bào)道：在上海流行期間收集45株鼠傷寒沙門氏菌流行株中，對氨芐青霉素、氯霉素、四環(huán)素、慶大霉素、鏈霉豢．氧嚷嗪青霉素和復(fù)方SMZ-TMP的耐藥者占73.3％，對5種或5種以上的抗菌物耐藥者占93．7%，而同期從帶菌者中分離的9株鼠傷寒沙門氏菌非流行株中，僅1株為多重耐藥株。接合轉(zhuǎn)移和轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)表明，細(xì)菌的多重耐藥性由耐藥(R)質(zhì)粒所介導(dǎo)，25%R質(zhì)粒可將其耐藥性轉(zhuǎn)給大腸桿菌K12，轉(zhuǎn)移頻率為IO-4一10-6。接合轉(zhuǎn)移不僅能獲得用選擇藥物的抗性，同時(shí)還獲得供體所具有的其它抗性。Farrar指出，

6、在細(xì)菌性感染中，由于R質(zhì)粒的結(jié)合作用，造成傳播擴(kuò)散往往是流行的質(zhì)粒，而不是流行的細(xì)菌。國外資料表明，傷寒桿菌的耐藥性除少數(shù)可由IncFII、IncHI2、IncI1、IncB和IncN群質(zhì)粒攜帶外，大多數(shù)是由120MD的IncHI1群及R質(zhì)粒所介導(dǎo)。1985年以來，國內(nèi)一些地區(qū)先后發(fā)生了傷寒流行。如貴州安順1985-1986年分離的耐藥傷寒桿菌90%攜帶l條100MD的大質(zhì)粒。又如湖北仙桃1986年分離的耐藥株攜帶96.47MD的大質(zhì)粒。再如江蘇蘇州1987-1988年分離的耐藥株都有l(wèi)條98.6

7、MD大質(zhì)粒。我國由南列北的耐藥性傷寒流行，都由一條100MD左右的質(zhì)粒所介導(dǎo)質(zhì)粒控制的抗藥性的抗性機(jī)理可歸納為下述三種情況a.質(zhì)粒編碼的基因生酶，這些酶作用于抗生素而使之失活。例如，β～內(nèi)酰胺酶、氯霉素乙酰轉(zhuǎn)移酶、鏈霉素腺苷轉(zhuǎn)移酶，卡那霉素磷酸轉(zhuǎn)移酶分別作用于青霉素、氯霉素、鏈霉素及卡那霉素使之失話。b.質(zhì)粒上編碼基因的作用，改變了藥物作用的靶子。這樣阻斷了藥物與作用的靶子結(jié)合而使細(xì)菌呈抗性。c.質(zhì)?？刂频幕前奉愃幬锘騎MP的抗性，是由于質(zhì)粒縮碼具有正常功能，但對磺胺不敏感的二氫葉酸鹽合成酶的結(jié)果

8、。鼠傷寒沙門菌引起小鼠的致死性感染時(shí)，需要多種毒力基因，這些基因除少數(shù)存在于質(zhì)粒外，大多數(shù)都存在于染色體上，稱為沙門菌毒力島(SPI)。SPl至少由60個(gè)基因組成，包括5個(gè)毒力島：SPI～1、SPI～2、SPI～3、SPI一4和SPI一5。各島的各種毒力基因，都受調(diào)節(jié)基因(如dam基因和phoP／phoQ基因)的調(diào)節(jié)，如將這些調(diào)節(jié)基因刪除，可使細(xì)菌的毒力大大降低。毒力島是指編碼細(xì)菌毒力基因簇的分子質(zhì)量比較大染色體DNA片段，其特點(diǎn)是兩側(cè)一般具有重復(fù)序列和插入元件，通常位于細(xì)菌染色體