人類免疫缺陷病毒抗體初篩假陽性結果研究

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1、人類免疫缺陷病毒抗體初篩假陽性結果研究【摘要】目的通過對人類免疫缺陷病毒抗體初篩試驗假陽性的原因分析,以減少假陽性結果的發(fā)生。方法對15例初篩試驗陽性的標本用原有試劑加另外一種不同原理或不同廠家的篩查試劑重復檢測。結果15例初篩陽性標本經(jīng)確證有9例呈陽性反應，4例呈陰性反應，2例為不確定。結論HIV抗體初篩假陽性與試劑的敏感性和特異性以及實驗室質(zhì)量管理相關。?【關鍵詞】人類免疫缺陷病毒抗體;初篩試驗;假陽性?作者單位：130021吉林省腫瘤醫(yī)院檢驗科自1985年我國發(fā)現(xiàn)首例艾滋病(HIV)至今，國內(nèi)HIV流行趨勢日益嚴重，目前對艾滋病尚無有

2、效的治療措施，因此，對艾滋病的預防顯得尤為重要。HIV抗體檢測是艾滋病早期診斷的主要依據(jù),為了最大限度并及時地發(fā)現(xiàn)所有的HIV抗體陽性者,血液篩查HIV抗體已廣泛開展。我院2008~2011年共有38790例進行了HIV初篩檢測。共有15例初篩陽性的標本。經(jīng)確認實驗室確認其中9例陽性，4例陰性，2例不確定?，F(xiàn)就HIV抗體假陽性影響因素及處理方法分析如下。6?1資料與方法?1.1標本來源2008~2011年兩年內(nèi),我院共有38790例進行了HIV初篩檢測。?1.2主要試劑酶聯(lián)免疫吸附實驗(ELISA)檢測試劑(珠海麗珠試劑股份有限公司、上?？?/p>

3、華生物工程股份有限公司診斷試劑盒)；膠體金法檢測試劑(上?？迫A生物工程股份有限公司診斷試劑盒)。經(jīng)食品藥品監(jiān)督管理局注冊批準,批檢合格且在有效期內(nèi)。?1.3儀器ELx800型酶標儀和ELx50型洗板機。酶標儀每年通過吉林省計量測試技術研究院的檢定為合格。?1.4方法嚴格按廠家試劑說明書進行,根據(jù)《全國艾滋病檢測技術規(guī)范》2009年修訂版要求,對初篩檢測陽性的標本,使用與初次檢測相同的試劑及另外一種試劑或方法進行雙孔復檢,兩孔陽性或一陰一陽,均送確認實驗室確認。?2結果?2008~2011年我院共檢測38790例,其中有15份標本初篩陽性,9

4、例標本經(jīng)確認后為陽性,4例確認后為陰性,2例為不確定。?3討論?抗體初篩試驗假陽性原因及處理原則：?3.1受檢者自身的原因6某些疾病的部分抗原性物質(zhì)和某些自身免疫病患者的自身抗體與HIV的某些抗原決定簇有交叉反應性或非特異性反應［1-3］，如血液系統(tǒng)惡性病變、多發(fā)性膽汁型肝硬化、酒精性肝炎、多發(fā)性骨髓瘤、腎移植或慢性腎衰；惡性腫瘤、感染梅毒、結核、瘧疾或絲蟲病等或疫苗接種者；病毒感染如巨細胞病毒、EB病毒、乙型肝炎、丙型肝炎；系統(tǒng)性紅斑狼瘡和類風濕性關節(jié)炎(抗鏈球菌溶血素“O”、C反應蛋白、類風濕因子、抗核抗體等)；特殊生理情況如過敏性體質(zhì)

5、、懷孕都易出現(xiàn)假陽性結果。這4份篩查假陽性標本均為惡性腫瘤患者,其中一名患者有乙肝病史，分析原因與個體免疫差異有關,目前的初篩診斷試劑還不能完全避免這種假陽性結果。?3.2試劑的原因目前,國內(nèi)外血源篩查仍主要使用ELISA(雙抗原夾心法)試劑，篩選實驗設計的目的盡可能檢出所有的陽性標本，不能漏檢,即敏感性要高。這樣就可能出現(xiàn)一些假陽性反應。我們實驗室主要用的是珠海麗珠生物試劑有限公司和上?？迫A有限公司生產(chǎn)的HIV(1/2型)抗體診斷試劑盒(雙抗原夾心酶聯(lián)免疫法),快速法用的是上?？迫A有限公司生產(chǎn)的膠體金試劑條。每年在吉林省臨床檢驗中心組織的

6、室間質(zhì)評活動中成績優(yōu)秀，4例假陽性標本經(jīng)我們多次檢測均為陽性反應表明該患6者體內(nèi)存在某種能與試劑盒中反應的物質(zhì)，可能和試劑包被的抗原特異性位點選擇差異、標記抗原的純度、試劑制作過程的污染有關。實驗中嚴格按說明書操作,以降低由試劑的原因造成假陽性結果的比率。若應用某種試劑持續(xù)出現(xiàn)篩查假陽性結果,應考慮更換試劑。?3.3實驗室操作的原因?3.3.1標本血清標本分離不完全,血清中混有纖維蛋白原或紅細胞成份；標本量過多，手工操作時，在加樣后放入孵箱前部分標本等待時間過長；溶血、黃疸、被細菌污染的標本中常含有過氧化物酶,使用辣根過氧化物酶為標志物的試

7、劑,就會出現(xiàn)非特異性顯色,造成假陽性。標本避免溶血。?3.3.2加樣加樣時槍頭沒有對準相應的板孔,或者加樣太快致試劑或標本的飛濺,出現(xiàn)污染假陽性結果。加樣時槍頭懸空,對準板孔,不能觸及板孔底部;加樣時應緩慢,避免標本飛濺及氣溶膠的污染。?3.3.3洗板洗板機洗板時,由于血液中纖維蛋白,造成洗板針堵塞,抽吸不完全,直接影響本底;在洗板機洗板完畢后,拍板由人工操作,操作不當就可能使陽性標本孔的液體污染其他孔導致假陽性結果的出現(xiàn)。?3.3.4反應溫度溫箱孵育時密封不完全,稀釋液蒸發(fā)較多,吸附于孔壁,不易清洗徹底，造成假陽性。?對HIV6抗體篩查檢

8、測陽性標本，篩查實驗室在條件允許時，建議盡量采集第2份血樣標本后再送確證實驗室檢測［5］。對初篩試驗呈陽性反應的樣品用原有試劑和不同原理或不同廠家的篩查試劑重復檢測。如兩種試劑復