兩種方法檢測(cè)人類免疫缺陷病毒抗體結(jié)果比較.doc

《兩種方法檢測(cè)人類免疫缺陷病毒抗體結(jié)果比較.doc》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在工程資料-天天文庫(kù)。

1、兩種方法檢測(cè)人類免疫缺陷病毒抗體結(jié)果比較朱武軍(貴州省貴陽(yáng)市第六人民醫(yī)院檢驗(yàn)科550005)【摘要】目的比較化學(xué)發(fā)光法與酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)法檢測(cè)人類免疫缺陷病毒抗體(抗一HIV)的一致性。方法收集45份室間質(zhì)評(píng)樣本，分別用兩種方法進(jìn)行檢測(cè)。結(jié)果化學(xué)發(fā)光法檢測(cè)樣本的吸光度／臨界值比值明顯高于ELISA法，兩種方法對(duì)抗HIV檢出率差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(Y2—25．002，P

2、446．61；R512．91文獻(xiàn)標(biāo)志碼：B文章編號(hào)：1672—9455(2009)06—0455—02艾滋病即獲得性免疫缺陷綜合征，是由人類免疫缺陷病毒(HIV)引起的嚴(yán)重疾病，迄今仍無(wú)法有效治療，除了行為干預(yù)等社會(huì)學(xué)手段外，阻斷輸血傳播，及時(shí)發(fā)現(xiàn)HIV感染者并采取針對(duì)性措施，是目前疫情控制的重要技術(shù)手段。由于HIV進(jìn)入人體后需要經(jīng)過(guò)一段時(shí)間才會(huì)產(chǎn)生HIV抗體(抗一HIV)，這一時(shí)間醫(yī)學(xué)上稱為“窗口期”。艾滋病研究的重點(diǎn)領(lǐng)域之一就是盡可能縮短“窗口期”，而達(dá)到這一目的最重要的手段就是高質(zhì)量的艾滋病診斷試劑盒和敏感性高的檢測(cè)方法?；瘜W(xué)發(fā)光標(biāo)記方法

3、是近年來(lái)發(fā)展起來(lái)的一種新的非放射性免疫分析技術(shù)。為比較化學(xué)發(fā)光法與酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)法檢測(cè)抗一HIV的一致性，本文對(duì)同一份標(biāo)本采取兩種方法進(jìn)行檢測(cè)，現(xiàn)將結(jié)果報(bào)道如下。1材料與方法1．1標(biāo)本來(lái)源所有標(biāo)本均來(lái)自貴州省臨床檢驗(yàn)中心2006～2008年全省室間質(zhì)評(píng)樣本，一20℃以下保存。1．2儀器化學(xué)發(fā)光儀KPS-KM(北京科美東雅生物技術(shù)有限公司生產(chǎn))；酶標(biāo)儀MuhiskanMK3(芬蘭)；洗板機(jī)(芬蘭雷勃WwllwashPlus)。1．3試劑ELISA法檢測(cè)試劑由北京萬(wàn)泰生物藥業(yè)股份有限公司提供，批號(hào)120080101；化學(xué)發(fā)光法試劑為

4、北京科美東雅生物技術(shù)有限公司生產(chǎn)，批號(hào)20070920。1．4方法隨機(jī)抽取室間質(zhì)評(píng)10份陽(yáng)性標(biāo)本分別以1：5稀釋作為待測(cè)標(biāo)本，與另外35份標(biāo)本，共計(jì)45份標(biāo)本分別用兩種方法進(jìn)行檢測(cè)，均嚴(yán)格按照各自的試劑盒說(shuō)明書操作。1．5統(tǒng)計(jì)學(xué)方法用SPSSl2．0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理，數(shù)據(jù)資料比較采用Y2檢驗(yàn)。2結(jié)果在45份標(biāo)本中，化學(xué)發(fā)光法和ELISA法均為陽(yáng)性29份，其樣本吸光度／臨界值(OD／CO)范圍分別為2．379～179．100和1．633～28．375；兩種方法均為陰性的標(biāo)本12例，其OD／CO值范圍分別為0．077～0．525和0．053～0

5、．617；在化學(xué)發(fā)光法為陽(yáng)性而ELISA法為陰性的3例標(biāo)本中，ELISA法的樣本OD／CO值范圍為0．607～0．849，而化學(xué)發(fā)光法的OD／CO值范圍為1．230～1．787。結(jié)果見(jiàn)表1。表1兩種方法對(duì)45份樣本抗一HIV檢測(cè)結(jié)果(”)由表1可以看出，化學(xué)發(fā)光法的敏感性高于ELISA法，兩種方法抗HIV檢出率差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(Y2—25．002，P<0．01)。3討論艾滋病是由HIV感染所引起的一種獲得性免疫缺陷性疾病，可通過(guò)性傳播、血液傳播和母嬰傳播途徑感染人類，檢出抗一HIV是艾滋病診斷的重要條件，而診斷HIV感染是艾滋病預(yù)防控制工作的重

6、要組成部分。因此，建立敏感、實(shí)用的檢測(cè)方法，對(duì)于監(jiān)測(cè)、診斷或血液篩查以及控制艾滋病的流行顯得尤為重要。目前艾滋病診斷技術(shù)主要包括病毒檢測(cè)和病毒特異性抗體檢測(cè)等。由于HIV病毒分離、病毒載量測(cè)定、病毒核酸測(cè)定以及病毒抗原檢測(cè)等方法難度大、費(fèi)用高，因而抗體檢測(cè)是常規(guī)檢測(cè)方法，包括ELISA、聚丙烯酰胺凝膠電泳、間接免疫熒光試驗(yàn)和斑點(diǎn)印跡在內(nèi)的檢測(cè)技術(shù)用于篩選實(shí)驗(yàn)，免疫印跡試驗(yàn)用于確認(rèn)實(shí)驗(yàn)。由此可見(jiàn)，提高敏感性、特異性，縮短窗El期和方法簡(jiǎn)便、快速，是HIV檢測(cè)試劑未來(lái)發(fā)展的主要趨勢(shì)。白1985年第1代抗HIV檢測(cè)試劑問(wèn)世至今，HIV血清學(xué)檢測(cè)試劑已

7、經(jīng)發(fā)展到第4代。但使用第4代試劑對(duì)艾滋病病毒抗體進(jìn)行檢測(cè)，仍然有2～3周的窗口期。此外，由于把抗宣石曲瓞一薈士濁包的擊田休全原和抗體同時(shí)包被在反應(yīng)板上存在著相互干擾的可能，影響了免疫反應(yīng)的特異性。另外，從方法學(xué)上來(lái)講，這種基于ELISA的分析方法，靈敏度終歸是有限的[1]。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，化學(xué)發(fā)光法檢測(cè)樣本的OD／CO比值明顯高于ELISA法，對(duì)于抗體效價(jià)較低的弱陽(yáng)性血清樣本，化學(xué)發(fā)光法具有明顯優(yōu)勢(shì)，可以大大縮短“窗V1期”，最大可能地避免漏檢，降低窗El期導(dǎo)致醫(yī)院感染的風(fēng)險(xiǎn)，早期發(fā)現(xiàn)疾病，對(duì)防治艾滋病等傳染病有著更大的技術(shù)優(yōu)勢(shì)。而且該技術(shù)與國(guó)

8、外普遍采用的管式發(fā)光法不同，首創(chuàng)板式發(fā)光法，具有高通量的特點(diǎn)，更加適合我國(guó)國(guó)情。目前，該方法的不足之處是試劑成本比較貴，但隨著該技術(shù)逐步實(shí)現(xiàn)產(chǎn)業(yè)化，試