腦益康對阿爾茨海默病大鼠中樞膽堿能系統(tǒng)酶的影響論文

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1、腦益康對阿爾茨海默病大鼠中樞膽堿能系統(tǒng)酶的影響論文耿勁松,周愛玲,胡亞娥,朱燕,茅家慧,施海燕【摘要】目的觀察中藥復方腦益康對阿爾茨海默?。ˋlzheimer'sdisease,AD)大鼠中樞膽堿能系統(tǒng)的保護作用。方法采用腦立體定位儀自雙側(cè)基底前腦Meynert核(nucleusbasalisofMeynert,NBM)注射鵝膏蕈氨酸(Ibotenicacid,IBO)建立AD大鼠模型,分別給予不同劑量腦益康對AD大鼠進行治療,測定不同組實驗大鼠腦組織乙酰膽堿酯酶(acetylcholinester

2、ase,AChE)、丁酰膽堿酯酶(butyrocholinesterase,BuChE)活性及膽堿乙酰轉(zhuǎn)移酶(cholineacetyltransferase,ChAT)在基底前腦的表達。結(jié)果腦益康能抑制腦組織AChE和BuChE的活性;改善基底前腦ChAT陽性神經(jīng)細胞形態(tài)并增加其數(shù)量。結(jié)論腦益康通過促進ChAT表達.freelinratser'sdisease(AD).MethodsBilateralinfusionsofIbotenicacid(IBO)intonucleusbasalisofM

3、eynert(NBM)usingstereotaxicapparatusodelofAD.NYKatdifferentdosagehasbeenadministeredtoADrats.Theactivitiesofbrainacetylcholinesterase(AChE)andbutyrocholinesterase(BuChE)asorphologyofcholineacetyltransferase(ChAT)-positivecellsinthebasalforebrainproveth

4、emorphologyandincreasethenumberofChAT-positivecellsasaybeabletoincreasethesynthesisofacetylcholine(ACh)throughelevatingtheexpressionofChAT,inhibitthedegradationofAChbyinhibitingtheactivitiesofAChEandBuChE,thuselevatingthelevelofAChinrats'brainandimprov

5、etheabilityoflearningandmemory.Keyer'sdisease;Acetylcholinesterase;Butyrocholinesterase;Cholineacetyltransferase阿爾茨海默?。ˋD)是發(fā)生在老年前期或老年期,與年齡相關(guān)的神經(jīng)系統(tǒng)退行性疾病。AD的發(fā)病機制極其復雜,病因?qū)W尚不清楚,且無特效治療或逆轉(zhuǎn)疾病進展的藥物,其病理生理機制及防治研究是近年來神經(jīng)科學領(lǐng)域的研究熱點之一。祖國傳統(tǒng)中醫(yī)藥理論對AD有獨到的認識,認為AD屬中醫(yī)學“呆證”“善忘

6、”等病的范疇。中藥復方腦益康由制首烏、知母、石菖蒲等組成。制首烏是祖國醫(yī)學中一種古老的用于延年益壽、益腦調(diào)心的藥物;中藥知母能顯著上調(diào)腦M1-毒蕈堿型乙酰膽堿受體密度,且上調(diào)的幅度和改善記憶之間存在明顯的正相關(guān)[1];石菖蒲有改善記憶、擴張血管、降壓等作用。腦益康有效成分多,藥理作用廣泛,可以多層次、多靶點地發(fā)揮治療作用。本實驗采用自大鼠雙側(cè)基底前腦Mey核(NBM)注射鵝膏蕈氨酸(IBO)建立AD動物模型,生物化學方法檢測皮層乙酰膽堿酯酶(AChE)和丁酰膽堿酯酶(BuChE)活性,免疫組織化學方

7、法觀察基底前腦膽堿乙酰轉(zhuǎn)移酶(ChAT)陽性神經(jīng)細胞形態(tài),為臨床應用腦益康治療AD,促進中樞膽堿能神經(jīng)功能的恢復提供充分的理論依據(jù)。1器材與方法1.1材料1.1.1動物SPF級SD雄性大鼠60只,體質(zhì)量(230±10)g,由南通大學實驗動物中心提供,動物合格證號:SYXK(蘇)2002-0022。1.1.2藥品與試劑實驗所用中藥復方腦益康(NaoYikang,NYK)由南通市中醫(yī)院制劑室制成顆粒劑,每克顆粒劑含生藥1.98g;腦復康(吡拉西坦片,南京白敬宇制藥廠);IBO(Sigma-Aldrich

8、);山羊抗ChAT一抗(美國Chemicon,批號:0510012059);AChE及BuChE測定試劑盒(南京建成生物工程研究所);二抗免疫組化染色及DAB試劑盒(北京中杉金橋生物技術(shù)有限公司)。1.1.3儀器大鼠腦立體定位儀、注射泵及微量注射器(美國Stoelting公司);Y-型迷宮刺激器(張家港市三興教學機械廠);XHF-1高速分散器(上海金達生化儀器廠);754型紫外可見分光光度計(上海光譜儀器有限公司);冰凍切片機(LAICACM1900,德國);數(shù)碼相機

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