白刺液泡膜na+h+_逆向轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白及肌動(dòng)蛋白基因的克隆_與基因序列分析畢業(yè)論文

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1、內(nèi)蒙古大學(xué)本科畢業(yè)論文(設(shè)計(jì))本科畢業(yè)論文(設(shè)計(jì))白刺液泡膜Na+/H+逆向轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白及肌動(dòng)蛋白基因的克隆與基因序列分析內(nèi)蒙古大學(xué)本科畢業(yè)論文(設(shè)計(jì))白刺液泡膜Na+/H+逆向轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白及肌動(dòng)蛋白基因的克隆與基因序列分析摘要白刺屬(NitrariaL.)是蒺藜科(Zygophyllaceae)的古老小屬,中國(guó)有8種,內(nèi)蒙古有4種該屬植物是我國(guó)內(nèi)蒙古、甘肅和新疆一帶荒漠植被的重要建群種之一,為耐干旱、耐鹽堿、抗風(fēng)蝕沙埋、生長(zhǎng)快、易繁殖的優(yōu)良防風(fēng)固沙先鋒植物,而且具有很高的開(kāi)發(fā)利用價(jià)值,因此開(kāi)發(fā)其抗逆性基因資源、從分子

2、生物學(xué)角度探討耐鹽機(jī)理具有重要的理論意義。鹽脅迫是影響植物正常生長(zhǎng)發(fā)育的最嚴(yán)重的非生物脅迫之一。植物鹽害可分為原初鹽害和次生鹽害,原初鹽害是指鹽離子本身對(duì)植物產(chǎn)生的傷害,即離子脅迫導(dǎo)致的傷害,包括破壞質(zhì)膜的選擇透過(guò)性和干擾植物的各種代謝過(guò)程;次生鹽害則包括由土壤鹽分過(guò)多引起的滲透脅迫和由離子間的競(jìng)爭(zhēng)引起的營(yíng)養(yǎng)虧損。植物的耐鹽機(jī)制主要包括滲透調(diào)節(jié)和降低胞內(nèi)Na+濃度。減少Na+的吸收、外排Na+和將Na+區(qū)域化是保持胞內(nèi)低Na+濃度的策略,其中Na+的外排和區(qū)域化主要由Na+/H+轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白調(diào)節(jié)。液泡膜上的Na+/

3、H+逆向轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白是將胞質(zhì)內(nèi)的Na+逆Na+濃度梯度運(yùn)送到液泡膜中進(jìn)而將Na+區(qū)域化集中。目前為止一些植物的液泡膜Na+/H+逆向蛋白編碼基因(NHX)已經(jīng)被克隆,而且一些研究表明NHX基因的過(guò)量表達(dá)可顯著提高植物的耐鹽性。本研究以開(kāi)發(fā)白刺的耐鹽基因資源、揭示其耐鹽分子機(jī)理為目的、利用RT-PCR、RACE技術(shù)及iPCR的方法,從小果白刺(N.sibiricaPall)中克隆了NHXcDNA片斷,并對(duì)其進(jìn)行了經(jīng)過(guò)同源序列比較及進(jìn)化關(guān)系分析,從而為調(diào)查該基因的表達(dá)調(diào)控模式、作用機(jī)理及利用該基因進(jìn)行甜土植物的耐鹽性遺

4、傳改良奠定了基礎(chǔ)。另外,本研究還克隆了小果白刺的肌動(dòng)蛋白基因片斷。由于肌動(dòng)蛋白基因在各種不同器官上恒定表達(dá),因而它常常被用作分子內(nèi)標(biāo)來(lái)研究其它基因的表達(dá)差異。小果白刺的肌動(dòng)蛋白基因的克隆為今后研究NHX等白刺屬植物的基因表達(dá)奠定基礎(chǔ)。關(guān)鍵詞:白刺,耐鹽性,Na+/H+逆向轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白,RT-PCR內(nèi)蒙古大學(xué)本科畢業(yè)論文(設(shè)計(jì))MolecularcloningandSequenceAnalysisofavacuolarNa+/H+antiporterandActingenesformNitrariaL.WangLiL

5、inXiaoFeiAbstractTheNitrariaL.isasmallgenusofZygophyllaceae,whichprimarilygrowsinaridandsemiaridregions,salineandalkaliland,desertandsandareas,andisthemajorconstructivespeciesofforestinwesternInnerMongolia.TheNitrariaplantsexhibitastrongsalt-resistance,andha

6、veimportanteconomical-andecological-value.Therefore,theresearchonmolecularmechanismofstresstoleranceisverynecessaryinNitraria.Saltstressisoneofabioticfactorthatcauseseriouslimitationonplantgrowthanddevelopment.Plantsaltstressincludeprimarysaltandsecondrysalt

7、,primarysaltreferstotheinjuryonplantbyions,includingthedamageofselectivepenetratedpropertyofplasmamembraneandinterferenceonplantmetabolism;secondarysaltreferstotheosmoticstressbyexcessivesoilsalinityandthenutrientlossbyioncompetition.SincethefirstvacuolarNa+

8、/H+antiportergene,referredtoasNHX,wasclonedfromArabidopsis,morethan500ofNHXorthologswereisolated.Previousresearchindicatedthatover-expressionofNHXgenecanenhancesalt-toleranceabilityofplants.Inth

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