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1、內蒙古大學本科畢業(yè)論文(設計)學校代碼10126學號00611049分類號密級本科畢業(yè)論文（設計）白刺液泡膜Na+/H+逆向轉運蛋白及肌動蛋白基因的克隆與基因序列分析學院、系生命科學學院生物系專業(yè)名稱生物科學年級2006級學生姓名王麗指導教師林曉飛2010年6月1日內蒙古大學本科畢業(yè)論文(設計)白刺液泡膜Na+/H+逆向轉運蛋白及肌動蛋白基因的克隆與基因序列分析摘要白刺屬（NitrariaL.）是蒺藜科(Zygophyllaceae)的古老小屬，中國有8種，內蒙古有4種該屬植物是我國內蒙古、甘肅和新疆一帶荒漠植被的重要建群種之一
2、，為耐干旱、耐鹽堿、抗風蝕沙埋、生長快、易繁殖的優(yōu)良防風固沙先鋒植物，而且具有很高的開發(fā)利用價值，因此開發(fā)其抗逆性基因資源、從分子生物學角度探討耐鹽機理具有重要的理論意義。鹽脅迫是影響植物正常生長發(fā)育的最嚴重的非生物脅迫之一。植物鹽害可分為原初鹽害和次生鹽害，原初鹽害是指鹽離子本身對植物產生的傷害，即離子脅迫導致的傷害，包括破壞質膜的選擇透過性和干擾植物的各種代謝過程；次生鹽害則包括由土壤鹽分過多引起的滲透脅迫和由離子間的競爭引起的營養(yǎng)虧損。植物的耐鹽機制主要包括滲透調節(jié)和降低胞內Na+濃度。減少Na+的吸收、外排Na+和將Na
3、+區(qū)域化是保持胞內低Na+濃度的策略，其中Na+的外排和區(qū)域化主要由Na+/H+轉運蛋白調節(jié)。液泡膜上的Na+/H+逆向轉運蛋白是將胞質內的Na+逆Na+濃度梯度運送到液泡膜中進而將Na+區(qū)域化集中。目前為止一些植物的液泡膜Na+/H+逆向蛋白編碼基因（NHX）已經(jīng)被克隆，而且一些研究表明NHX基因的過量表達可顯著提高植物的耐鹽性。本研究以開發(fā)白刺的耐鹽基因資源、揭示其耐鹽分子機理為目的、利用RT-PCR、RACE技術及iPCR的方法，從小果白刺(N.sibiricaPall)中克隆了NHXcDNA片斷，并對其進行了經(jīng)過同源序列
4、比較及進化關系分析，從而為調查該基因的表達調控模式、作用機理及利用該基因進行甜土植物的耐鹽性遺傳改良奠定了基礎。另外，本研究還克隆了小果白刺的肌動蛋白基因片斷。由于肌動蛋白基因在各種不同器官上恒定表達，因而它常常被用作分子內標來研究其它基因的表達差異。小果白刺的肌動蛋白基因的克隆為今后研究NHX等白刺屬植物的基因表達奠定基礎。關鍵詞：白刺，耐鹽性，Na+/H+逆向轉運蛋白，RT-PCR內蒙古大學本科畢業(yè)論文(設計)MolecularcloningandSequenceAnalysisofavacuolarNa+/H+antipo
5、rterandActingenesformNitrariaL.WangLiLinXiaoFeiAbstractTheNitrariaL.isasmallgenusofZygophyllaceae,whichprimarilygrowsinaridandsemiaridregions,salineandalkaliland,desertandsandareas,andisthemajorconstructivespeciesofforestinwesternInnerMongolia.TheNitrariaplantsexhibi
6、tastrongsalt-resistance,andhaveimportanteconomical-andecological-value.Therefore,theresearchonmolecularmechanismofstresstoleranceisverynecessaryinNitraria.Saltstressisoneofabioticfactorthatcauseseriouslimitationonplantgrowthanddevelopment.Plantsaltstressincludeprimar
7、ysaltandsecondrysalt,primarysaltreferstotheinjuryonplantbyions,includingthedamageofselectivepenetratedpropertyofplasmamembraneandinterferenceonplantmetabolism;secondarysaltreferstotheosmoticstressbyexcessivesoilsalinityandthenutrientlossbyioncompetition.Sincethefirst
8、vacuolarNa+/H+antiportergene,referredtoasNHX,wasclonedfromArabidopsis,morethan500ofNHXorthologswereisolated.Previousresearchindicat
