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《白刺液泡膜na+h+逆向轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白及肌動(dòng)蛋白基因的克隆與基因序列分析畢業(yè)論文》由會(huì)員上傳分享,免費(fèi)在線閱讀,更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫。
1、本科畢業(yè)論文(設(shè)計(jì))白刺液泡膜Na+/H+逆向轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白及肌動(dòng)蛋白基因的克隆與基因序列分析白刺液泡膜Na+/H+逆向轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白及肌動(dòng)蛋白基因的克隆與基因序列分析摘要白刺屬(NitrariaL.)是蒺藜科(Zygophyllaceae)的古老小屬,中國有8種,內(nèi)蒙古有4種該屬植物是我國內(nèi)蒙古、甘肅和新疆一帶荒漠植被的重要建群種之一,為耐干旱、耐鹽堿、抗風(fēng)蝕沙埋、生長快、易繁殖的優(yōu)良防風(fēng)固沙先鋒植物,而且具有很高的開發(fā)利用價(jià)值,因此開發(fā)其抗逆性基因資源、從分子生物學(xué)角度探討耐鹽機(jī)理具有重要的理論意義。鹽脅迫是影響植物正常生長發(fā)育的最嚴(yán)重的非生物脅迫之一。植物鹽害可分為原初鹽害和次生鹽害,原初鹽害是指鹽
2、離子本身對(duì)植物產(chǎn)生的傷害,即離子脅迫導(dǎo)致的傷害,包括破壞質(zhì)膜的選擇透過性和干擾植物的各種代謝過程;次生鹽害則包括由土壤鹽分過多引起的滲透脅迫和由離子間的競爭引起的營養(yǎng)虧損。植物的耐鹽機(jī)制主要包括滲透調(diào)節(jié)和降低胞內(nèi)Na+濃度。減少Na+的吸收、外排Na+和將Na+區(qū)域化是保持胞內(nèi)低Na+濃度的策略,其中Na+的外排和區(qū)域化主要由Na+/H+轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白調(diào)節(jié)。液泡膜上的Na+/H+逆向轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白是將胞質(zhì)內(nèi)的Na+逆Na+濃度梯度運(yùn)送到液泡膜中進(jìn)而將Na+區(qū)域化集中。目前為止一些植物的液泡膜Na+/H+逆向蛋白編碼基因(NHX)已經(jīng)被克隆,而且一些研究表明NHX基因的過量表達(dá)可顯著提高植物的耐鹽性。本研究
3、以開發(fā)白刺的耐鹽基因資源、揭示其耐鹽分子機(jī)理為目的、利用RT-PCR、RACE技術(shù)及iPCR的方法,從小果白刺(N.sibiricaPall)中克隆了NHXcDNA片斷,并對(duì)其進(jìn)行了經(jīng)過同源序列比較及進(jìn)化關(guān)系分析,從而為調(diào)查該基因的表達(dá)調(diào)控模式、作用機(jī)理及利用該基因進(jìn)行甜土植物的耐鹽性遺傳改良奠定了基礎(chǔ)。另外,本研究還克隆了小果白刺的肌動(dòng)蛋白基因片斷。由于肌動(dòng)蛋白基因在各種不同器官上恒定表達(dá),因而它常常被用作分子內(nèi)標(biāo)來研究其它基因的表達(dá)差異。小果白刺的肌動(dòng)蛋白基因的克隆為今后研究NHX等白刺屬植物的基因表達(dá)奠定基礎(chǔ)。關(guān)鍵詞:白刺,耐鹽性,Na+/H+逆向轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白,RT-PCRMolecular
4、cloningandSequenceAnalysisofavacuolarNa+/H+antiporterandActingenesformNitrariaL.WangLiLinXiaoFeiAbstractTheNitrariaL.isasmallgenusofZygophyllaceae,whichprimarilygrowsinaridandsemiaridregions,salineandalkaliland,desertandsandareas,andisthemajorconstructivespeciesofforestinwesternInnerMongolia.TheNitr
5、ariaplantsexhibitastrongsalt-resistance,andhaveimportanteconomical-andecological-value.Therefore,theresearchonmolecularmechanismofstresstoleranceisverynecessaryinNitraria.Saltstressisoneofabioticfactorthatcauseseriouslimitationonplantgrowthanddevelopment.Plantsaltstressincludeprimarysaltandsecondrys
6、alt,primarysaltreferstotheinjuryonplantbyions,includingthedamageofselectivepenetratedpropertyofplasmamembraneandinterferenceonplantmetabolism;secondarysaltreferstotheosmoticstressbyexcessivesoilsalinityandthenutrientlossbyioncompetition.SincethefirstvacuolarNa+/H+antiportergene,referredtoasNHX,wascl
7、onedfromArabidopsis,morethan500ofNHXorthologswereisolated.Previousresearchindicatedthatover-expressionofNHXgenecanenhancesalt-toleranceabilityofplants.Inthestudy,weisolatedacDNAfragmentofNHXhomologyfr